Baixe o app para aproveitar ainda mais
Prévia do material em texto
UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO - UFPE CENTRO DE TECNOLOGIA E GEOCIENCIAS - CTG DEPARTAMENTO DE ENGENHARIA QUIMICA – DEQ MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA Técnicas de Contagem PROFESSORAS: Glória Maria Vinhas e Sara Horácio de Oliveira ALUNA: Iara Alves Freire Recife, 2018 1. Contagem na câmara de Neubauer O corante azul de metileno foi utilizado para diferenciar as células vivas das células mortas, pois as células vivas têm membranas integras, ou seja, não permitindo a passagem do corante ao seu interior, por isso não adquirem nenhuma coloração. Enquanto as células mortas têm suas membranas danificadas, permitindo a entrada do corante no interior da célula, o que lhes confere a coloração azul. A contagem na câmera foi feita considerando que as células no interior e nas fronteiras (esquerda e inferior) faziam parte de cada quadrado da câmara de Neubauer. O cálculo do número de leveduras/mL na suspensão é feito utilizando a equação 1. Concentração celular (leveduras/mL) = N x 25000 x fator diluição (eq.1) Sendo N o número total de células (vivas e mortas). Como 1,0 mL da solução de levedura foi misturada com 1,0 mL da solução de corante, o fator de diluição nesse caso é igual a 2. A Tabela 1 mostra o resultado da contagem feita durante o experimento. Tabela 1 – Quantidade de células vivas e mortas, contagem de levedura na câmara de Neubauer. Quadrado Vivas Mortas 1 12 8 2 20 9 3 22 5 4 17 6 5 15 3 6 16 3 7 19 7 8 22 5 9 14 4 10 16 2 Soma 173 52 De acordo com a Tabela 1, o somatório de células resulta em N=151, ressaltando que como os quadrados 8 e 3 são o mesmo, somente o quadrado 8 foi considerado durante a soma. Substituindo o valor de N na equação 1, temos que a concentração celular é igual a 7,55x106 leveduras/mL. A figura 1 ilustra a câmera de Neubauer com a correspondente numeração utilizada na Tabela 1. Figura 1 – Câmara de Neubauer. É também possível calcular a viabilidade celular com auxílio da equação 2. Viabilidade celular (%) = células vivas x 100 / (células vivas + células mortas) (eq.2) Substituindo o número de células vivas e células mortas na eq.2, temos uma viabilidade celular de 67%. 2. Contagem na placa de Petri Dentre as placas de Petri onde as culturas foram desenvolvidas, deveriam ser escolhidas aquelas placas cuja quantidade unidades formadoras de colônia (UFC) estivessem entre o intervalo 30 a 300. Porém a única que foi possível observar colônias foi a 100. Na figura 2 é possível observar como foi feita a contagem, mas a mesma não foi concluída, pois os pontinhos pretos presentes na imagem já somas 300 UFC, o que nos neva a concluir que é “impossível” contar. Figura 2: Contador de colônias
Compartilhar