Avaliãção da integridade ESTRUTURAL da membrana

Prévia do material em texto

UNIVERSIDADE FEDERAL DO OESTE BAHIA 
CENTRO MULTIDISCIPLINAR CAMPUS DE BARRA 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
ISABEL FERREIRA BONFIM 
THAILAN SILVA MARTINS 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
RELATÓRIO DE PRÁTICA 01 
“AVALIAÇÃO DA INTEGRIDADE ESTRUTURAL DA 
MEMBRANA DAS CÉLULA ESPERMÁTICAS DE UM EQUINO” 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Barra 
2018 
 
ISABEL FERREIRA BONFIM 
THAILAN SILVA MARTINS 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
RELATÓRIO DE PRÁTICA 01 
“Avaliação da integridade estrutural da membrana das células espermáticas de um 
equino” 
 
 
 
 
 
 
Relatório apresentado como requisito de avaliação parcial no 
componente curricular de Biofísica e Fisiologia Veterinária I, 
semestre 2018.1, ministrado pela Prof.ª Alexandra Soares 
Rodrigues, no curso de Medicina Veterinária da Universidade 
Federal do Oeste da Bahia-UFOB. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Barra 
2018 
1. INTRODUÇÃO 
 
 
A membrana plasmática é uma bicamada fosfolipídica que cerca as células do 
organismo. Além de separar o conteúdo interno das células do espaço extracelular, exerce 
diversas funções importantíssimas para o seu metabolismo. Interiormente, as células também 
são compartimentadas por membranas biológicas que cercam as organelas e funcionam como 
local de diversos processos endocelulares imprescindíveis (KOEPPEN & STANTON, 2009). 
Nas células espermáticas, as membranas são estruturalmente especializadas, com 
funções essências no processe de fecundação. A ocorrência de lesões nessas estruturas pode 
estar relacionada ao processo de congelamento e descongelamento, por exemplo, gerando 
assim, decréscimos na concentração de células viáveis e, consequentemente, baixas taxas de 
fecundação. 
Para a avaliação da viabilidade dos espermatozoides, existem atualmente uma gama de 
testes realizados previamente ao processo de fertilização, como aqueles em que são avaliadas a 
motilidade e a morfologia dos mesmos, o que poupa custos e tempo, garantindo o sucesso do 
procedimento. 
Os testes de integridade estrutural das membranas são importantes ferramentas para 
avaliação de amostras de sêmen submetidas ao armazenamento, criopreservação ou em casos 
de animais com problemas termo regulatórios. Um exemplo de metodologia para esse tipo de 
avaliação, é a utilização de colorações como a eosina, que sendo um corante supravital, 
penetrará apenas aquelas células cuja membrana encontra-se lesionada, o que irá permitir a 
observação de espermatozoides viáveis ou não em determinadas amostras. 
 
2. OBJETIVO 
 
Está pratica teve como objetivo avaliar a integridade estrutural da membrana plasmática 
dos espermatozoides de um equino. 
 
3. METODOLOGIA 
 
Para realização do teste, foi utilizado sêmen de equino previamente colhido e mantido 
em refrigeração com posterior aquecimento (37 °C) para utilização na prática. Uma alíquota de 
10 microlitros (µL) do sêmen foi depositada sobre uma lamina para microscopia pré-aquecida 
a 37 °C, adicionou-se sobre a mesma 10µL da solução corante Eosina-citrato, a mistura foi 
homogeneizada e confeccionou-se um esfregaço desta para que fosse submetida ao microscópio 
ótico de luz no aumento de 40x. Como orientado, contou-se 100 espermatozoides com o intento 
de determinar o percentual de células integras e lesionadas. 
 
4. RESULTADOS E DISCUSSÃO 
 
Após a contagem de 100 espermatozoides verificou-se que todos estavam corados, este 
fator é indicativo de células lesionadas uma vez que o corante só consegue penetrar em células 
cuja integridade funcional de sua membrana esteja danificada. 
 
5. CONCLUSÃO 
 
Conclui-se que, com base na taxa de viabilidade espermática representada pela 
porcentagem mínima de 60% de espermatozoides viáveis, a amostra analisada foi totalmente 
reprovada uma vez que esta apresentou 100% de gametas inviáveis. 
Supõe-se que o fator promotor para a inviabilidade destes espermatozoides esteja 
relacionado à refrigeração do material que foi feita de maneira inadequada comprometendo 
assim a qualidade da amostra. 
 
6. REFERÊNCIAS 
 
ARRUDA, R. L. et al. Técnicas para avaliação laboratorial da integridade estrutural e 
funcional do sêmen congelado de touros. Revista Brasileira de Reprodução Animal, Belo 
Horizonte, v.34, n.3, p.168-184, jul./set. 2010. Disponível em: <www.cbra.org.br>. Acesso 
em: 16 jun. 2018 
 
KOEPPEN, B. M.; STANTON, B. A. (EE.). Berne & Levy: Fisiologia. Tradução de Adriana 
Pitella Sudré et. al. 6. ed. Rio de Janeiro: Elsevier, 2009. 
 
VIDIGAL, K. F. Integridade e funcionalidade da membrana plasmática, acrossomo e 
mitocôndrias espermáticas em caprinos segundo a conformação escrotal. 2008. 77 f. 
Dissertação (Mestrado em Ciência Animal) – Centro de Ciências Agrárias, Universidade 
Federal do Piauí, Piauí, 2008. Disponível em: <http://leg.ufpi.br/s/ciencianimal 
/DM_KFV.pdf>. Acesso em: 16 jun 2018.