3a. aula turma nova

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NA AULA PASSADA TÍNHAMOS VISTO TUDO
QUE PODE EXISTIR EM UMA BACTÉRIA, QUANDO
OLHADA DE FORA PARA DENTRO
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VIMOS QUE AS BACTÉRIAS NÃO TEM MUITA
 DIVERSIDADE MORFOLÓGICA
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-COCOS
-BASTONETES
-ESPIRILOS
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BACTÉRIAS QUE SE MOVIMENTAM SÃO RÁPIDAS 
– MAIS RÁPIDAS DO QUE A
CHITA (LEOPARDO)
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O TAMANHO DIMINUTO TEM IMPORTÂNCIA
FISIOLÓGICA
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CÉLULAS MAIS EXPOSTAS AO MEIO
-MAIOR PERCEPÇÃO DE MODIFICAÇÕES
NO MEIO DE CULTIVO
ALTA TAXA DE CRESCIMENTO
LATA TAXA DE METABOLISMO
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DIFERENÇAS NAS PAREDES 
DAS GRAM + E -
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GRAM +
Mais peptoglicano
Menos lipídeos
GRAM –
Menos peptoglicano
Mais lipídeos
Duas membranas cito-
plasmática, sendo uma
mais externa
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MOVIMENTO DO FLAGELO É 
ROTACIONAL
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De onde vem a energia para movimentação do
flagelo?
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H
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
H
+
ATP 
sintase
ADP
ATP
-
-
-
-
-
-
-
-
-
H
+
Transportador de elétrons
Membrana
citoplasmática
Movimento do flagelo
ocorre por quimiosmose
citoplasma
exterior
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Flagelo de uma bactéria morta pode funcionar por
alguns instantes?
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ADICIONE ÁCIDO FRACO NO MEIO (VINAGRE, LIMÃO)
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GROSSEIRAS
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c) ELEVAÇÃO
d) CROMOGÊNESE
e) DETALHES ÓPTICOS
-opacas
-translúcidas
-opalescente
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2) COLÔNIA EM ÁGAR-INCLINADO
-QUANTIDADE
Escassa
Moderada
Abundante
-MARGEM
Uniforme
irregular
-CONSISTÊNCIA
Butírica
Viscosa
Quebradiça
Seca
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Inóculo
Liquefaz
(Preseça de
 protease)
Não ataca a
 gelatina
4- CRESCIMENTO EM COLUNA DE GELATINA
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3) CRESCIEMENTO EM CALDO NUTRITIVO
ODOR:
-pútrido
-frutas ou aromáticos
-desprezível
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4) QUANTIDADE E DISTRIBUIÇÃO DO CRESCIMENTO
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INFORMAÇÕES ÚTEIS PARA A CARACTERIZAÇÃO 
1-CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS
-TAMANHO
-FORMA
-ARRANJOS
USA COLORAÇÃO
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2-CARACTERÍSTICAS NUTRICIONAIS + CULTURAIS
NECESSIDADES SIMPLES OU COMPLEXAS
TEMPERATURA
OXIGÊNIO
CO
2
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3-CARACTERÍSTICAS METABÓLICAS
CONSIDERA DETALHES DE UMA VIA METABÓLICA
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4-CARACTERÍSTICAS ANTIGÊNICAS
A PAREDE CELULAR DAS BACTÉRIAS
FUNCIONAM COMO ANTÍGENO
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5-CARACTERÍSTICAS QUÍMICAS 
ANÁLISE DAS CÉLULAS OU PARTES
PARTE MAIS USADA É A PAREDE
CELULAR
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6-CARACTERÍSTICAS GENÉTICAS
C+G + A+T
C+G
= G+C
(%)
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SONDAS DE DNA
ABRIMOS O DNA DE UMA BACTÉRIA DESCONHECIDA
E DE UMA CONHECIDA.
DEIXAMOS A MISTURA HIBRIDIZAR E VEMOS A
PORCENTAGEM DE HIBRIDIZAÇÃO
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OUTRAS TÉCNICAS DE BIOL. MOLECULAR
Por exemplo Car Woese usou seqüências de RNA
ribossomal 16 S dos procariotos para mostrar suas
 relações evolutivas.
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Bacteria
Archaea
Eucarya
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PARA IDENTFICAÇÃO QUAL É A MELHOR 
CARACTERÍSTICA A SER UTILIZADA?
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Ás vezes temos que usar todas para o reconhecimento
de uma bactéria, pois não existe muitas diferenças
entre elas, como acontece a outros tipos de organismos.
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EXIGÊNCIAS NUTRICIONAIS, 
CULTIVO E CRESCIMENTO DOS 
MICRORGANISMOS
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CULTIVO DOS MICRORGANISMOS
PARA ESTUDAR QUALQUER MICRORGANISMO
CULTIVO EM LABORATÓRIO
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PRÉ-REQUISITO
CONHECIMENTO DAS EXIGÊNCIAS 
 NUTRITIVAS
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 EXISTEM CATALOGADOS CERCA DE 1300 
FÓRMULAS DE MEIOS PARA BACTÉRIAS
 E FUNGOS
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EXISTE UM MEIO UNIVERSAL
 QUE SERVE PARA TODOS ?
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NÃO EXISTE UM MEIO UNIVERSAL
MAS EXISTE UMA GAMA DE NECESSIDADES 
QUE SÃO COMUNS
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QUAIS ?
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1) Fonte de Energia
2) Fonte de Carbono
3) Fonte de Nitrogênio
4) Fonte de Enxofre
5) Fósforo
7) Vitaminas 
8) Água
6) Elementos minerais 
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A)
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B)
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EXIGÊNCIAS COMUNS
1. FONTE DE ENERGIA
ALGUMAS BACTÉRIAS
 COMPOSTOS
 INORGÂNICOS
C)
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2. FONTE DE CARBONO
DIÓXIDO DE CARBONO
PLANTAS
BACTÉRIAS
(ALGUMAS)
ALGAS
A)
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3. NITROGÊNIO
SAIS INORGÂNICOS
 
PLANTAS
FUNGOS
BACTÉRIAS
(MAIORIA)
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5. FÓSFOROS
SUBSTÂNCIAS FOSFATADAS
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6. ELEMENTOS MINERAIS
SÓDIO, POTÁSSIO, CÁLCIO, CLORO, MAGNÉSIO E FERRO
EM BAIXAS CONCENTRAÇÕES (MICRONUTRIENTES):
COBALTO, MANGANÊS, ZINCO, COBRE, MOLIBDEÊNIO E
 
NÍQUEL.
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7. VITAMINAS
ANIMAIS : DIETA
BACTÉRIAS
ALGUMAS SINTETIZAM TODAS 
AS NECESSÁRIAS
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8. ÁGUA
MUITO IMPORTANTE PARA BACTÉRIAS
E FUNGOS 
DEVIDO ABSORÇÃO DE SUBSTÂNCIAS
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O transporte da glicose ocorre contra o seu gradiente de concentração, graças ao transporte simultâneo do sódio a favor do seu gradiente eletroquímico.. 
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COMO VOCÊ DEFINIRIA UM ORGANISMO
 AUTOTRÓFICO ?
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TIPOS NUTRITIVOS DAS BACTÉRIAS
 
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MEIO SINTÉTICO 
x
MEIO COMPLEXO
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MEIO SINTÉTICO OU DEFINIDO
EXEMPLO:
FOSFATO DE AMÔNIO – 1g
GLICOSE – 5 g 
CLORETO DE SÓDIO – 5g
FOSFATO DE POTÁSSIO –1g
ÁGUA DESTILADA – 1 L
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MEIO COMPLEXO OU COMPLETO
EXEMPLO: CALDO NUTRITIVO
EXTRATO DE CARNE – 3g
PEPTONA – 5g
CLORETO DE SÓDIO – 8g
ÁGUA DESTILADA 1L
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MEIO COMPLEXO OU COMPLETO
EXEMPLO: AGAR NUTRITIVO
EXTRATO DE CARNE – 3g
PEPTONA – 5g
CLORETO DE SÓDIO – 8g
AGAR – 18g
ÁGUA DESTILADA 1L
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QUAL É A DIFERENÇA DE UM
 
MEIO COMPLETO E MEIO 
SINTÉTICO ?
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MEIO SINTÉTICO OU DEFINIDO
EXEMPLO:
FOSFATO DE AMÔNIO – 1g
GLICOSE – 5 g 
CLORETO DE SÓDIO – 5g
FOSFATO DE POTÁSSIO –1g
ÁGUA DESTILADA – 1 L
MEIO COMPLEXO OU COMPLETO
EXEMPLO: CALDO NUTRITIVO
EXTRATO DE CARNE – 3g
PEPTONA – 5g
CLORETO DE SÓDIO – 8g
ÁGUA DESTILADA 1L
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COMO ESCOLHEMOS ENTRE O MEIO
SINTÉTICO OU DEFINIDO E O MEIO
COMPLEXO OU COMPLETO ?
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TIPOS DE MEIOS
A) ENRIQUECIDO
USADOS PARA ORGANISMOS
FASTIDIOSOS
+ SANGUE
 OU
+ TECIDOS DE PLANTAS
 OU
+ TECIDOS DE ANIMAIS
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B) SELETIVO : PREVINE O CRESCIMENTO DE UNS E
 NÃO AFETA O DOS OUTROS
EXEMPLOS ?
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C) DIFERENCIAL
PRESENÇA DE SUBSTÂNCIA QUE DURANTE 
O CRESCIMENTO DIFERENCIA AS BACTÉRIAS 
DESEJADAS
AGAR-SANGUE
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D) MEIO DE DOSAGEM
USADO PARA DETERMINAÇÃO DE :
-AMINOÁCIDOS
-ANTIBIÓTICOS
-VITAMINAS E DESINFETANTES
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E) MEIO DE CONTAGEM
ADICIONA-SE UMA SUBSTÂNCIA QUE
 RESTRINGE O CRESCIMENTO EXAGERADO
MUITO UTILIZADO PARA FUNGOS FILAMENTOSOS
EXEMPLO: L-SORBOSE RESTRINGE O CRESCIMENTO
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E) MEIO DE ESTOCAGEM
GLICOSE PERMITE UM RÁPIDO CRESCIMENTO
PARA ESTOCAGEM COLOCAMOS BAIXA QUANTIDADE 
DE GLICOSE
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QUANTO À CONSISTÊNCIA
SÓLIDOS
-FATIAS DE BATATAS
-FATIAS DE CENOURAS
SOLIDIFICADO COM AGAR
 1,5 A 2,0 % 
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SEMI-SÓLIDOS
0,5 % DE AGAR OU
FARELO DE TRIGO SÓ EMPAPADO 
COM ÁGUA
-
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LÍQUIDOS 
-LEITE
-CALDO NUTRITIVO
-MEIO DE VOGEL
-MEIO DE CZAPEC
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COMPOSIÇÃO DO LEITE g/L 
 (VACA)
GORDURAS – 35-40
AÇÚCAR – 65-70
CASEÍNA – 10-12
PROTEÍNAS DO SORO – 5-6
SAIS – 2-3
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FARELO DE 
TRIGO
(SÓLIDO)
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Wheat bran, crude
New Search
Refuse: 0%   NDB No: 20077 (Nutrient values and weights are for edible portion) 
USDA National Nutrient Database for Standard Reference, Release 20 (2007)
New Search
FARELO DE TRIGO
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Cont.
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FARELO DE 
TRIGO
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CALDO NUTRITIVO
EXTRATO DE CARNE – 3g
PEPTONA – 5g
ÁGUA – 1L
pH 7-7,2
AGAR NUTRITIVO
IGUAL AO CALDO
 +
AGAR 1,8%
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SAIS DE VOGEL
 (50 X)
-CITRATO DE SÓDIO – 125-g
-FOSFATO DE POTÁSSIO – 250g
(MONOBÁSICO) 
-NITRATO DE AMÔNIO – 100g
-SULFATO DE MAGNÉSIO – 10g
-CLORETO DE CÁLCIO – 5g
-GLICOSE – 2%
- 5 ml de micronutrientes
- ÁGUA – PARA 1 L
MICRONUTRIENTES: SAIS DE ZINCO, FERRO,COBRE,
MANGANÊS E MOLIBDÊNIO. 
USADO PARA
FUNGOS 
FILAMENTOSOS
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CZAPECK 
-NITRATO DE SÓDIO 0,2%
-FOSFATO DE POTÁSSIO 0,1%
 (MONOBÁSICO)
CLORETO DE POTÁSSIO 0,1%
-SULFATO DE MAGNÉSIO 0,05%
SULFATO DE FERRO 0,01
FONTE DE CARBONO 1% 
-Solução com traços de elementos
USADO PARA FUNGOS FILAMENTOSOS
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MEIO AGAR BATATA – CENOURA
-BATATA 20g
-CENOURA 20 g
-ÁGUA DESTILADA 1 L
FERVER 30 MINUTOS E FILTRAR EM GAZE
ADICIONAR 15 g DE AGAR E AUTOCLAVAR
USADO PARA FUNGOS
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TAMANHO DO FRASCO
VOLUME DO MEIO = USAMOS 
1/5 DO VOLUME DO FRASCO
POR QUE ?
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FACILITA ESTERILIZAÇÃO E AERAÇÃO
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REAGENTES OU OS MEIOS DE CULTIVOS SÃO VENDIDOS NA FORMA DE PÓ
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pH
ÁCIDO PARA FUNGOS
NEUTRO OU LIGEIRAMENTE 
BÁSICO PARA BACTÉRIAS
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CONDIÇÕES FÍSICAS
TEMPERATURA
- PSICRÓFILOS –5ºC A –7ºC
-MESÓFILOS 25ºC A 40ºC 
-TERMÓFILOS 45ºC A 70ºC
-ARCHAE 110-130ºC
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EXIGÊNCIAS ATMOSFÉRICA
AERÓBIOS 
 MICROAERÓBIOS
FACULTATIVOS
ANAERÓBIOS
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Gas Parck
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GAS PARCK: POSSUI SUBSTÂNCIA DENTRO DE 
UMA EMBALAGEM QUE É FURADA AO ENROSCAR
A TAMPA. COM A RUPTURA OCORRE A LIBERAÇÃO
DE HIDROGÊNIO, QUE REAGE IMEDIATAMENTE COM
O OXIGÊNIO. ALÉM DO HIDROGÊNIO HÁ LIBERAÇÃO 
TAMBÉM CO
2
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DESSECADOR : ÚTIL PARA RETIRADA DE AR E
CRESCIMENTO EM CO OU N 
2
2
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FORMA DE RETIRADA DE OXIGÊNIO 
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EXIGÊNCIAS FÍSICAS
LUZ NOS CASOS DOS ORGANISMOS
FOTOTRÓFICOS.
2) ALTA CONCENTRAÇÃO DE SAL
 HALÓFICAS OBRIGATÓRIAS
 (EXIGEM 10 A 15 % DE NaCl)
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ESCOLHA DO MELHOR 
MEIO ?
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A ESCOLHA DO MELHOR MEIO PARA UM
ORGANISMO DESCONHECIDO EXIGE TENTATIVAS
DE ACERTOS E ERROS
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PARA UM ORGANISMO CONHECIDO PODEMOS FAZER
PEQUENAS MODIFICAÇÕES NO MEIO JÁ PADRONIZADO, 
TENTANDO MELHORAR A PRODUÇÃO DE UMA
 SUBSTÂNCIA DESEJADA