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1 Módulo 4 Indicadores fisiológicos do bem-estar 2 Objetivos de aprendizagem • Entender a relação entre bem-estar e fisiologia • Examinar de que forma o sistema neuroendócrino está associado ao bem-estar • Entender como o bem-estar pode ser avaliado a partir das respostas do sistema neuroendócrino • Os prós e contras dos diferentes indicadores de avaliação do bem-estar Sumário do conteúdo • Sistema neuroendócrino • HHA, hipófise anterior e posterior • Medidas: - Glicocorticóides - ACTH - Hormônios de reprodução - Temperatura - Patologias - Opióides • Limitações dessas medidas • Conclusões “Bem-estar animal é o estado físico e psicológico de um animal diante de suas tentativas de lidar com o ambiente.” Professor Donald M Broom Colleen Macleod Professor de Bem-Estar Animal University of Cambridge UK Definição de bem-estar animal (estado físico) Alteração do bem-estar = Alteração nesses estados = Respostas fisiológicas Tipos de resposta Respostas do sistema nervoso autônomo Respostas do sistema neuroendócrino Mudança no bem-estar Ativação do SNC 2 Sistema neuroendócrino (SN) 1. O eixo hipotálamo-hipófise-adrenal (HHA) 2. A hipófise anterior 3. A hipófise posterior Uma mudança no bem-estar afeta três subdivisões do SN: Eixo hipotálamo-hipófise-adrenal (HHA) • Maior mediador de respostas endócrinas • HHA = mobilização de reservas de energia para reação física • HHA medeia respostas para: – Estresse - Atividade sexual – Cortejo - Chegada de alimentos Cascata HHA Glândula hipófise anterior CRH Córtex adrenal ACTH Fígado Glicocorticóides estímulo Vasos do SPH circulação Hipotálamo Características do HHA • Não tão imediato quanto o SNS • Medida de mudanças agudas no bem-estar – Exemplo: glicocorticóides no plasma aumentaram entre 2 e 10 minutos após o estímulo – Podem permanecer elevados durante horas, dependendo da gravidade do estímulo Avaliação das técnicas de medição Prós e contras das técnicas de medição em termos de: • Invasividade – Severidade da implantação • Restrição – Restrição necessária • Perturbação – Efeito da técnica usada sobre o parâmetro Glicocorticóides • Espécie - dependente: Cortisol: Corticosterona: Humanos Ratos Macacos Camundongos Suínos etc. Outros roedores • Útil como medida direta aguda 3 Glicocorticóide: exemplo 1 • Cortisol em cordeiros, em resposta a: – Corte da cauda – Castração (Mellor & Murray, 1989) Glicocorticóide: exemplo 2 • Corticosterona em ratos após confronto agressivo: – Vencedor: inicial , depois – Vencido: inicial , permanecendo elevado (Henry & Stephens, 1977) Medição de glicocorticóide • Análise: – Enzyme-linked immunosorbent assay - ELISA – Cromatografia líquida de alta precisão - HPLC – Técnica de ligação protéica competitiva – Radioimunoensaio - RIA Método Invasivo Restritivo Perturbador Plasma ou ou Saliva Urina Fezes Avaliação do estado de bem-estar crônico • Avaliação indireta do HHA –Sensibilização do HHA: teste desafio com ACTH –Níveis dos receptores cerebrais de glicocorticóides: • Hipocampo e amígdala cerebral Teste estimulação com ACTH • ACTH é administrado e os níveis de glicocorticóides resultantes são medidos • Longos períodos de superlotação = resposta mais alta de cortisol do que nos controles em vacas de leite (Friend et al., 1977) Receptores cerebrais de glicocorticóides • Teste post-mortem • Amostras cerebrais expostas a glicocorticóides radiomarcados • níveis de receptores em ratos expostos a manejo e perturbação prolongados (Wadham, 1997) 4 Limitações do HHA - 1 1. Diferenças individuais - Experiência anterior - Ratos (Levine et al., 1967) - Sexo - Ratos (Livezey et al., 1985) 2. Perturbação devida ao método - Presença humana, manejo, restrição e método de amostragem Limitações do HHA - 2 3. Outros fatores causando mudanças - Espécie • Os macacos do novo mundo (Klostermann et al., 1986) - Metabolismo - Horário de colheita de amostras Hipófise anterior (HA) • ACTH • Hormônios reprodutivos: – Prolactina – Hormônio luteinizante (LH) – Hormônio folículo-estimulante (FSH) Outros hormônios associados a alterações no bem-estar: ACTH • Medida aguda: – Mais rápido que glicocorticóides – Meia-vida curta • Análise por radioimunoensaio • Níveis apresentam variação diurna • ACTH em macacos Rhesus quando confinados e expostos a barulho (Kalin et al., 1985) Hormônios reprodutivos • Associados com outros indicadores do bem-estar • Sensibilidade: – Prolactina > LH > FSH • Análise por Radioimunoensaio • Medidas agudas = rápido, permanecem elevados durante horas Exemplos de hormônios reprodutivos • Prolactina com manejo e colheita de amostras de sangue em ratos (Gärtner et al., 1980) • de LH em ratos em ambiente novo e imobilização (Briski & Sylvester, 1987) • de FSH em ratos com pequena mudança de lugar da gaiola (Gärtner et al., 1980) 5 Limitações dos hormônios reprodutivos • Hora da amostragem, ex.: – Prolactina = diurno – LH = liberação pulsátil • Sexo – Fêmeas > machos • Estágio do estro, ex.: – Prolactina: Proestro > diestro – FSH: Pré-ovulatório > ovulatório Hipófise posterior (HP) • Diferenças entre espécies: – Imobilização em ratos = 5-10 vezes – Confinamento e barulho em macacos Rhesus = por 30 minutos A ocitocina da hipófise posterior é associada a mudanças no bem-estar: Outras medidas • Temperatura • Níveis de opióides • Patologias em órgãos Outros efeitos dos sistemas neuroendócrino e nervoso autônomo podem ser usados para avaliar o bem-estar: Temperatura corporal • da temperatura corporal de ratos induzido por tempestades e pessoas estranhas (Georgiev, 1978) • Temperatura corporal observada em musaranhos vencidos em brigas (von Holst, 1986) Alterações em outros sistemas fisiológicos (ex. atividade adrenal) = mudanças da temperatura corporal central = medida do estado agudo Medição da temperatura Método Local Temp. central Invasivo Restritivo Perturbador Direto, ex. termômetro Boca, orelha e reto Telemetria implantada Interno Imagem térmica Pele Patologias em órgãos • Alterações crônicas do bem-estar = grande variedade de patologias • A maioria é avaliada post-mortem • As patologias incluem: – Hipertrofia da adrenal – Lesões renais – Lesões do miocárdio – Aterosclerose 6 Exemplos de patologias • Instabilidade social em grupos de ratas = hipertrofia da adrenal (Haller et al., 1999) • A presença de animais dominantes causa lesões renais em animais subordinados em camundongos (Henry & Stephens-Larson, 1985) • Lesões do miocárdio causadas por períodos de contenção mais prolongados em suínos (Wutzen et al., 1987) Opióides • Três tipos: – Endorfinas – Encefalinas – Dinorfinas • Funções: – Analgesia induzida por estresse – Controle da secreção hormonal Medição de opióides Método Invasivo Restritivo Perturbador Sangue Receptores cerebrais Exemplos de opióides • de ß-endorfina no plasma em cordeiros durante castração, corte da cauda e “mulesing” (Shutt et al., 1987) • Porcas confinadas = densidade de receptores opióides maior que em porcas mantidas em grupo (Zanella et al., 1992) Conclusão • Sistema neuroendócrino = indicador para o bem-estar agudo e crônico • Respostas do SNA podem ser medidas direta e indiretamente • Medidas do SN são limitadas, portanto deve-se ter cuidado com sua avaliação • Outras respostas fisiológicas também podem ser usadas na avaliação do bem- estar, inclusive temperatura, níveis de opióides e patologias em órgãos
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