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Bioquímica Clínica 6º sem. Relatório de Aula Prática 2 Hemoglobina Glicada

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FACULDADE MAURÍCIO DE NASSAU CURSO DE BIOMEDICINA – 6º SEMESTRE / NOITE
 
BIOQUÍMICA CLÍNICA APRESENTAÇÃO DE RELATÓRIO TÉCNICO CIENTÍFICO: HEMOGLOBINA GLICADA
ANTONIO WESLEY ARAÚJO DOS SANTOS
DEBORA MARIA PORTELA DOS SANTOS
HENRIQUE DIAS LIMA
JOEL VERAS DE OLIVEIRA
RONALDO FONTELES DA ROCHA
THIAGO BRUNO MACIEL DA SILVA ARAÚJO
WELLINGTON ARCANJO
 
FORTALEZA 2016
BIOQUÍMICA CLÍNICA APRESENTAÇÃO DE RELATÓRIO TÉCNICO CIENTÍFICO: HEMOGLOBINA GLICADA
ANTONIO WESLEY ARAÚJO DOS SANTOS
DEBORA MARIA PORTELA DOS SANTOS
HENRIQUE DIAS LIMA
JOEL VERAS DE OLIVEIRA
RONALDO FONTELES DA ROCHA
THIAGO BRUNO MACIEL DA SILVA ARAÚJO
WELLINGTON ARCANJO
	Relatório de aula prática da disciplina de Bioquímica Clínica do curso de Biomedicina na Faculdade Maurício de Nassau, sob a orientação do professor Jannison Ribeiro, para a obtenção de nota parcial referente à 2ª avaliação (AV-2) do 6º semestre.
	
FORTALEZA 2016
Sumário
INTRODUÇÃO
Os exames laboratoriais são realizados por solicitação médica, com o objetivo de diagnosticar, monitorar ou acompanhar o tratamento de uma doença. O resultado de todo exame laboratorial deve ter qualidade e isso só será possível se houver padronização dos processos e controle de qualidade, desde a aquisição dos insumos e reagentes até a emissão do resultado.
Dentre os diversos tipos de exames terei como modelo o de Hemoglobina Glicada (sangue), mostrando o desenrolar de todo o procedimento e as BPL’s, além de toda a fase pré-analítica que engloba a recepção identificação, preparação do paciente, coleta, armazenamento e transporte. 
Dependendo da análise, o exame poderá ser realizado no sangue total (Ex.: Hemograma); no plasma (Ex.: glicose, provas de coagulação); no soro (Ex.: bioquímicos e sorológicos). Quando a análise for realizada no soro, este será obtido através da coleta em tubo sem anticoagulante (seco), para que ocorra o processo de coagulação. Quando se pretende fazer a análise no plasma, a amostra deverá ser colhida em tubo de ensaio contendo anticoagulante específico. Neste caso não ocorre a coagulação, pois o anticoagulante irá inibir um dos fatores da coagulação (geralmente cálcio) impedindo assim a formação do coágulo.
Durante as punções venosas, para prevenir lesão de algum ramo nervoso, recomenda-se evitar a inserção muito rápida ou profunda da agulha. A punção de uma veia por meio de múltiplas tentativas de redirecionamento da agulha já inserida, de forma aleatória, não deve ser realizada. Caso não se obtenha sucesso na primeira tentativa de punção, retira-se a agulha e uma segunda punção deve ser realizada, preferencialmente em outro local. O paciente deve ser orientado a não realizar movimentos bruscos durante o ato da coleta.
Nessa prática analisaremos a Hemoglobina (Hb), que é uma proteína presente em nossas hemácias (glóbulos vermelhos). A função da hemoglobina é transportar oxigênio no sistema circulatório. Denomina-se hemoglobina glicada (HbA1c) a fração da hemoglobina que se liga a glicose. Durante o período de vida da hemácia - 90 dias em média - a hemoglobina vai incorporando glicose, em função da concentração deste açúcar no sangue. Se as taxas de glicose estiverem altas durante todo esse período ou sofrer aumentos ocasionais, haverá necessariamente um aumento nos níveis de hemoglobina glicada. Dessa forma, o exame de hemoglobina glicada consegue mostrar uma média das concentrações de hemoglobina em nosso sangue durante aproximadamente 60 dias - não podemos dizer que são durante todos os 90 dias porque a hemácia pode não ter ficado viva todo esse tempo. Gravidas diabéticas, devem fazer sua mensuração a cada 3 meses e as gravidas a cada 15 ou 30 dias. Diabéticos com um mau controle glicêmico, fazem sua monitoração a cada 2 meses para um maior controle.
A hemoglobina glicada serve para diagnosticar a acompanhar o diabetes, em conjunto com os exames de curva glicêmica e glicemia de jejum. As principais doenças envolvidas na dosagem de glicose são o diabetes tipo 1 e o diabetes tipo 2, mas a hemoglobina glicada pode ser indicada pelo seu médico mesmo que você não tenha sintomas definidos, apenas como parte do check-up de uma consulta - principalmente porque o diabetes pode permanecer assintomático por muito tempo. Em alguns casos, a hemoglobina glicada pode ser pedida para fazer o diagnóstico de anemia ou baixas contagens de hemoglobina. Raramente o médico pedirá o exame para fazer o diagnóstico de uma hipoglicemia, mas pode acontecer. Alguns sintomas ou condições que podem levar seu médico a pedir o exame de glicemia de jejum para uma investigação mais profunda são:
Exame de glicemia de jejum acima do normal
Urinar várias vezes ao dia
Sede intensa
Perda de peso apesar da ingestão de alimentos
Glicemia fora do jejum maior que 200mg/dl
Desidratação
Tonturas
Mal estar (em crianças pode se manifestar como uma dor abdominal)
Fome intensa
Náusea
Desmaios ou comas
Troca da dosagem ou do medicamento para tratamento do diabetes
Parente direto com diabetes.
OJETIVOS
 Objetivo Geral
Temos como objetivo geral, o nosso aprimoramento / aprendizado prático do exame de Hemoglobina Glicada para a averiguação do nível de glicemia em sugestivos portadores de diabetes mellitus (DM) com um mau controle glicêmico, grávidas e grávidas diabéticas.
 Objetivo Específico
Como objetivo específico, visamos à análise (observação) da amostra obtida no processamento (preparo da amostra), com intuito de averiguar a concentração de Hemoglobina Glicada presentes nas hemácias. Obteremos o resultado final, através de espectofotometria. 
MATERIAIS UTILIZADOS - (Insumos / Equipamentos)
Agulha descartável c/ suporte para tubo a vácuo;
Álcool etílico 70%;
Algodão hidrofílico;
Amostra de sangue total;
Caneta / Pincel;
Curativos;
Cianeto de potássio;
Espectrofotômetro;
Estante para tubos;
Garrote;
Luvas descartáveis;
Pipeta automática 10-100 microlitros;
Ponteiras;
Recipiente para descartar material perfuro-cortante;
Tubos coletor a vácuo;
Tubos de ensaio;
Tubo “pirulito” c/ gel (agarose);
METODOLOGIA / PROCEDIMENTO
- Paramentamo-nos e fizemos a devida assepsia pessoal/individual;
- Posicionamos o paciente de forma satisfatória para a coleta (sentado e com o braço relaxado em angulação de 75º) e o orientamos sobre o procedimento que será realizado;
- Após a devida identificação do paciente no tubo coletor, fizemos a punção de acordo o POP obtendo uma amostra de sangue total.
 Hemoglobina Glicada
- Retiramos 100 microlitros de sangue total com pipeta automátina 10-100 (microlitros) para hemólise das hemácias e liberação das hemoglobinas;
- Hemolisamos as hemácias com 500 microlitros de cianeto de potássio, adicionado à amostra;
- Agitamos o tubo para homogeneizar o preparado e aguardamos por 5 minutos;
- Pipetamos 100 microlitros do homogeneizado (sangue + cianeto de potássio) e o transferimos para um tubo pirulito com gel e adicionamos 1 ml de resina, para a formação da coluna iônica;
- Homogeneizamos mais uma vez por 5 minutos após a colocação do “pirulito” no tubo contendo o homogeneizado com o gel. A homogeneização deve ser ininterrupta, pois a interação entre os compostos podem ser prejudicadas e com isso aumentar o tempo para a reação (ligação do gel com a hemoglobina);
- Deixamos o preparado descansar por 10 minutos;
- Após o descanso, o preparado se dividiu em duas fases: 1 – Sedimento de Hb+ Gel de agarose; 2 – Sobrenadante com Hb A1c (glicada) + H2O;
- Apertamos o pirulito (separador / filtro) onde no ato do aperto, o sobrenadante sobe e o gel permanece na parte de baixo do tubo;
- Pipetamos o sobrenadante e o transferimos para a cubeta do espectrofotômetro para sua leitura.
 Hemoglobina Total
- Pipetamos 20 microlitros do homogeneizado e o transferimos para a cubeta;
- Adicionamos 5 ml de água destilada à amostra de sangue total e o levamos ao espectrofotômetro para sua leitura
 5. LEITURA DO ESPECTROFOTÔMETRO
- Paciente Ana Audrey Veracruz HbT = 0,559 
 0,880
 HbG = 0,492
a. Fórmulas para o Cálculo do Resultado
I - HbA1c = P.amostra (proporção da amostra)
 HbTotal
II - P.amostra . 4,5 = HbA1c (%)
 0,835
 6. RESULTADO / DISCURSÃO
- 4,7 % - 6,0 % 
- Valores de referência: 6,0 – 8,3 %;
 > 17 % = Diabetes.
Todo o procedimento de coleta foi satisfatório (punção com tubo à vácuo) o processamento foi eficás, resultando em amostras. O tubo utilizado para a coleta estava sem anticoagulante, pois o mesmo interfere na ligação da hemoglobina com a resina. Essa resina é armazenada com iazida (anti fúngico).
Na espectrofotometria, o comprimento de onda adequado para se aferir a HbA1c é 415. Esse exame não exige jejum, pois o resultado se baseia na glicose que se ligou às hemácias nos últimos 120 dias do consumo alimentar.
 Vimos ainda os tubos com gel separador, o qual facilita a retirada do sobrenadante para melhor análise bioquímica.
Através da observação desse protocolo, concluímos que todo o profissional de saúde (Biomédico) deve receber treinamento específico sobre a técnica utilizada, para a seleção e uso dos equipamentos e materiais adequados, além de terem que estar capacitados para o preparo das amostras seja para análise imediata e/ou armazenamento e transporte, para que não haja resultados falsos, prejudicando, assim, tanto o diagnóstico como o prognóstico. Todas essas atividades devem ser devidamente registradas.
CONCLUSÃO
O resultado do exame mostrou que a paciente voluntária Ana Audrey Veracruz, está com a porcentagem de HbA1c um pouco abaixo dos valores normais.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
http://www.sbpc.org.br/upload/conteudo/320090814145042.pdf 
http://www.sbpc.org.br/upload/conteudo/livro_coleta_biologica2013.pdf 
http://www.prefeitura.sp.gov.br/cidade/secretarias/upload/saude/arquivos/assistencialaboratorial/Coleta_Laboratorial_Cap2.pdf

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