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Enzimologia Clínica Enzima como elemento de diagnóstico clínico Atividade enzimática no corpo O que são enzimas: “Enzimas são catalisadores biológicos de alta especificidade” CLASSIFICAÇÃO QUANTO A COMPOSIÇÃO QUÍMICA ENZIMAS SIMPLES: apenas aminoácidos em sua estrutura molecular. Exemplo: amilase ENZIMAS CONJUGADAS: proteína + não protéica. Holoenzima = apoenzima + coenzima. (vitaminas) Exemplo: transaminases ISOENZIMAS: São enzimas que catalisam a mesma reação e apresentam estrutura molecular semelhante. Exemplo: CK tem 3 isoenzimas: CKMM , CKMB e CKBB. NOMENCLATURA Substrato + reação que catalisa + ASE Exemplos: Lactato desidrogenase amido hidrolase (amilase) amino transferase (transaminase) Velocidade de Ação Enzimática (Atividade) V (atividade) = ∆S ou V = ∆P ∆t ∆t Quando se quantifica enzimas a unidade enzimática (U) equivale à 1 μg de substrato ou produto formado, nas condições do experimento realizado. Cuidados experimentais na avaliação enzimática Fatores que influenciam na atividade enzimática: Temperatura pH Concentração de substrato (concentração ideal = 10 x o valor do limiar máximo dos valores de referência). Inibidores. Tempo de ação da enzima. Utilização das enzimas na determinação de patologias Aumento da atividade plasmática: Lesão no tecido as enzimas são derramadas no meio plasmático. Obstrução de ductos, as enzimas podem ser derramadas no meio plasmático. Neoplasias podem aumentar a atividade enzimática. Diminuição da atividade plasmática: Quando ocorre síntese enzimática reduzida nos tecidos . (Deficiência congênita de enzimas). Perfil Cardíaco Diagnóstico clínico de cardiopatia coronariana por enzimas e proteínas Para diagnosticar cardiopatias, as principais enzimas e proteínas são: ENZIMÁTICOS - Creatina Fosfoquinase ou Creatina Quinase (CPK) ou (CK) - Lactato Desidrogenase (LDH) - Transaminase (TGO) PROTÉICOS - Troponina T Cardíaca (cTnT) - Mioglobina Lesão do miocárdio na isquemia coronariana As enzimas que normalmente apresentam baixos níveis séricos, mas que aumenta consideravelmente quando o tecido em que estão presentes é lesado. Creatina Quinase (CK) CK CREATINA – P + ADP → CREATINA + ATP Isoenzimas: CK1 - BB (Cérebro) CK2 - MB ( Miocárdio) CK3 - MM ( Músculo Esquelético) IAM: acontece o aumento da fração enzimática CK-MB no plasma sanguíneo sendo o indicador mais preciso do infarto agudo do miocárdio. Sua concentração aumenta após 4 à 6 horas a partir da dor precordial, atingindo seu nível máximo entre 12 e 24 horas, permanecendo elevado até 4 dias após a lesão CK-MB : 1 a12 UI/L 4 a 6 horas após lesão CK total : 15 a 160 UI/L 4 a 6 horas após lesão Lactato de desidrogenase (LDH) LDH Lactato + NAD → Piruvato + NADH2 No IAM (Infarto Agudo do Miocárdio): a enzima aumenta sua concentração dentro de 6 à 8 horas após o infarto, e atinge seu pico entre 24 e 48 horas, permanecendo elevada por até 14 dias. LDH : 80 a 120 UI/L 6 a 8 horas após lesão TGO OU AST Transaminase Glutâmico Oxaloacética Aspartato aminotransferase TGO aspartato + cetoglutarato → oxaloacetato + ac. Glutâmico IAM (Infarto Agudo do Miocárdio): a enzima aumenta sua concentração dentro de 10 à 12 horas após o infarto, e atinge seu pico entre 36 e 48 horas, permanecendo elevada por até 5 dias. TGO: 5 à 32 UI/L 10 a 12 horas após lesão Troponina T cardíaca (cTnT) Troponina: proteína muscular globosa no filamento de actina Troponina: < 0,2 µg/L 1 a 3 horas após lesão IAM: Sua concentração aumenta após 1 à 3 horas a partir da dor precordial, atingindo seu nível máximo entre 12 e 24 horas, permanecendo elevado até 4 dias após a lesão. MIOGLOBINA Mioglobina:proteína porfirínica monômero da hemoglobina Mioglobina: < 55 µg/L 1 a 2 horas após lesão IAM: Sua concentração aumenta após 1 à 2 horas a partir da dor precordial, atingindo seu nível máximo entre 10 e 12 horas, permanecendo elevado até 24 horas após a lesão. ENZIMÁTICOS APÓS O INFARTO CK-MB: 1 à 12 mUI/mL 4 a 6 horas após lesão LDH: 80 à 120 UI/L 6 a 8 horas após lesão TGO: 5 à 32 UI/L 10 a 12 horas após lesão Avaliação dos exames proteicos com a CK-MB Mioglobina: < 55 µg/L 1 a 2 horas após lesão Troponina: < 0,2 µg/L 1 a 3 horas após lesão CK-MB: 1 à 12 mUI/mL 4 a 6 horas após lesão
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