Extração de DNA

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CEDUP RENATO RAMOS DA SILVA
DISCIPLINA: BIOLOGIA
PRÁTICA LABORATORIAL DE BIOLOGIA
EXTRAÇÃO DE DNA
ANDRÉ FELIPE SILVA FERNANDES
LAGES
SETEMBRO DE 2017
CEDUP RENATO RAMOS DA SILVA
ANDRÉ FELIPE SILVA FERNANDES
PRÁTICA LABORATORIAL DE BIOLOGIA
EXTRAÇÃO DE DNA
Trabalho produzido para avaliação na disciplina de Biologia do 1º ano 01 de Biotecnologia do CEDUP Renato Ramos da Silva, sob orientação da Professora Mara Lucia Bueno
LAGES
	2017	
INDICE
Introdução 4
 
Objetivos 5
 
Materiais utilizados 6
 
Procedimento experimental 7
 
Resultados e discussão 8
 
Conclusão 9
 
Anexos 10
 
Referências bibliográficas 13
INTRODUÇÃO
		O DNA (ácido desoxirribonucleico) é um dos ácidos nucleicos que constituem o material genético da maioria dos seres vivos. O DNA é formado por nucleotídeos, e cada nucleotídeo é formado por uma molécula de desoxirribose, uma molécula de fosfato e uma base nitrogenada que pode ser púrica ou pirimídica.
		Nesta aula prática, iremos utilizar o método de lise para melhor visualização proveniente da extração do DNA da banana.
OBJETIVOS
Realizar a extração de DNA da banana.
MATERIAIS UTILIZADOS
1/2 Banana
 
Saco plástico comum transparente
Detergente
Água
Béquer
Colher de medida (de café)
Proveta
Álcool etílico absoluto ou doméstico
Gaze para filtrar
Tubo de ensaio
Cloreto de sódio (sal de cozinha)
Funil
Faca
Bastão de vidro
Conta-gotas
PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL
Misturar 6 ml de detergente, 4g de NaCl (4 colheres de café de sal de cozinha) e água suficiente para formar 60 ml de solução de lise.
 
Cortar e macerar a banana com a solução de lise até obter uma solução liquefeita da fruta, o que facilitará a filtração.
 
Misturar a solução durante 2 a 3 minutos e filtrar o conteúdo utilizando a gaze, o funil e o tubo de ensaio.
 
Acrescentar lentamente o álcool etílico gelado, com o conta-gotas até dobrar o volume inicial da solução.
RESULTADOS E DISCUSSÃO
	O resultado esperado foi visualizado corretamente, que é uma espécie de “nuvem” encima da camada de álcool etílico.
QUESTIONÁRIO PROPOSTO
Como se apresentou o DNA extraído? Descreva qual o seu aspecto e em que região da solução do tubo de ensaio ele foi visualizado.
Manchas brancas, formando uma espécie de nuvem, foi melhor visualizado com o álcool etílico.
 
Qual a importância da etapa do maceramento?
Para dissolver mais facilmente na solução de lise e possibilitar a infiltração do detergente nas células da banana mais rapidamente.
Qual o papel da solução de lise? Responda, especificando as funções do detergente e do sal?
Sal: proporcionou ao DNA um ambiente favorável, pois contribuiu com os íons positivos que neutralizaram a carga negativa do DNA, para que assim as numerosas células de DNA pudessem coexistir na solução, através da precipitação das proteínas.
Detergente: lisar as membranas, pois são constituídas de lipídios, que são insolúveis em água, mas são solúveis em detergente. Com a ruptura dessa membrana, o conteúdo celular, incluindo as proteínas e o DNA, soltou-se e dispensou-se na solução.
Qual o papel do álcool etílico na extração do DNA?
Como o DNA é insolúvel em álcool, esta forma uma aglomeração de moléculas, portanto o álcool permite o isolamento do DNA.
Por que você não pode ver a dupla-hélice do DNA extraído?
Pois para visualizar a dupla hélice, necessita-se de um microscópio eletrônico
CONCLUSÃO
	Essa prática permitiu a visualização do DNA da banana, através de substâncias usadas (álcool etílico), através da lise da membrana, a precipitação salina e o isolamento do DNA.
ANEXOS
Foto 1 – Materiais utilizados
 Foto 2 – Preparo de solução de lise
Foto 3 – Maceramento da banana
Foto 4 – Filtragem da banana
Foto 5 – Adicionar álcool etílico na solução
Foto 6 – Resultado da prática, pode-se notar pequena nuvem no álcool etílico
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
LOUREDO, Paula. Atividade prática para extração do DNA. Disponível em: http://educador.brasilescola.uol.com.br/estrategias-ensino/atividade-pratica-para-extracao-dna.htm. Acesso em: Setembro/2017
MEDEIROS, Heloisa. Extração de DNA da banana. Disponível em: http://www.ebah.com.br/content/ABAAABboAAL/extracao-dna-banana. Acesso em: Setembro/2017