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Características gerais dos Fungos Prof.ª Dr.ª Andreia Alves andreiaac2@gmail.com HISTÓRICO DA MICROBIOLOGIA “Meu Deus, que maravilhas existem em uma criatura tão pequena” ( Leewenhooek, Londres 1693 ) Os Microrganismos (MO) participam de quase todos os aspectos da vida humana com efeitos benéficos ou maléficos; Toda a vida no planeta depende das atividades dos MO; Contribuem no melhoramento na produção de alimentos, exploração de minérios, etc; Engenharia genética e biologia molecular: MO “ feitos sob medida” para produzir medicamentos, compostos industriais, vacinas, alimentos, etc; Microbiologia : estudo de MO (Organismos microscópios) – Mikros: pequeno bios: vida logos: ciência MO: se originaram à 4 milhões de ano (são os ancestrais de todas as formas de vida); MO: foram observados pela primeira vez à 300 anos e à 200 anos foi reconhecida a sua importância; Descobriu-se que os microrganismos surgiam de seres como eles e não de causas sobrenaturais ou de organismos em putrefação Descobriu-se que eles eram a causa e não o resultado da fermentação MO: realizam uma grande variedade de reações bioquímicas semelhantes às dos organismos superiores Benefícios para a sociedade: produção de álcool, medicamentos (penicilina), insulina humana (bactéria geneticamente construída), decomposição de componentes do petróleo em derramamento de óleos, decomposição de herbicidas, etc Biotecnologia: construção de MO HISTÓRIA: Leeuwenhoek: “Pai” dos Microscópios Animálculos (protozoários de vida livre) Examinou águas de rios, saliva, fezes, etc; Leeuwenhoek mostrando seus microscópios à rainha Catherine da Inglaterra Réplica de um microscópio feito em 1673 por Leeuwenhoek Esboços de bactérias da cavidade oral humana, observadas por Leeuwenhoek. Esses desenhos mostram que ele observou bacilos, cocos e bactérias espiraladas. Também demonstrou a motilidade de algumas bactérias, isto é, o traçado de C a D. Teorias: ABIOGÊNESE X BIOGÊNESE Teoria da abiogênese: seres surgiam de objetos inanimados Teoria da biogênese: Seres surgiam de seres semelhantes a eles Louis Pasteur: Defendia a biogênese Preparou um experimento com frascos de colo longo e curvado (semelhante a um pescoço de cisne) onde o ar passava livremente, mais os MO ficavam retidos na parte mais baixa e o caldo de carne não deteriorava Louis Pasteur em seu laboratório Frasco em pescoço de cisne de Pasteur que foi utilizado nos experimentos para refutar a teoria da geração espontânea. As partículas de poeira sedimentavam na região encurvada inferior do pescoço do frasco, assim os microrganismos não contaminavam o caldo no frasco. Este frasco está preservado no museu Pasteur. TEORIA DA FERMENTAÇÃO: (Louis Pasteur) – Transformação do suco da uva em vinho, feita por microrganismos Açúcar da Uva (Suco) MO (reações bioquímicas) Vinho Alguns produtos antigos fermentados: saquê, soyu, leite fermentado, etc Louis Pasteur verificou que: Vinhos bons e ruins tinham MO diferentes (MO produtores de vinho e MO deterioradores do vinho); Ele aqueceu o suco de uva destruindo os MO já existentes (bons ou ruins) Depois colocou o vinho bom neste suco previamente aquecido. RESULTADO: o vinho ficou bom. E para conservar: Ele aqueceu o vinho à 50oC – 60oC por alguns minutos - o produto não se alterou (pasteurização) TEORIA MICROBIANA DA DOENÇA: Pasteur e col. descobriram vários agentes etiológicos de doenças Antes acreditava-se que as doenças eram causadas por sangue ou ar ruim Koch: descobriu o MO que causa o carbúnculo: – Inoculou em camundongos a bactéria e neles se desenvolveu o carbúnculo (as bactérias eram idênticas) Koch ainda: Demonstrou que esporos bacterianos sobreviviam por muito mais tempo em produtos contaminados; Provou que um tipo específico de MO causa uma determinada doença Descobriu bactérias causadoras da cólera e tuberculose (bacilo de Koch) Robert Koch (1843 – 1910) observando uma espécime em um microscópio. Koch e seus assistentes contribuíram com vários procedimentos laboratoriais de significado fundamental que são usados até os dias atuais Pasteur descobriu a imunização através de um experimento em galinhas e a bactéria da cólera aviária. Denominou as culturas avirulentas de vacina. Descobriu as vacinas contra a varíola e a raiva. O princípio da imunização demonstrado por Pasteur: Inicialmente Pasteur inoculou as galinhas com uma cultura velha de bactérias que causam a cólera aviária; essas galinhas permaneceram sadias. Várias semanas mais tarde, ele inoculou as mesmas galinhas com uma cultura jovem das bactérias. Esta cultura virulenta foi inócua às galinhas previamente inoculadas, mais foi fatal para as galinhas não inoculadas. Esse experimento mostrou que as culturas velhas de bactérias da cólera aviária, embora incapazes de produzir doença, eram capazes de produzir substâncias protetoras no sangue, denominadas “anticorpos”. Micologia: Mykes-cogumelo + logos-estudo; Eucariotos; Ubíquos; Unicelulares e/ou pluricelulares; Heterotróficos – nutrição absortiva Quimiorganotróficos Fungos Características Gerais Reprodução: sexuada e assexuada; Dispersão: disseminação dos propágulos água, animais, homem, sementes, insetos e pelo ar.; Aeróbios ou anaeróbios facultativos; Crescem bem à temperatura ambiente e em meios ácidos. Fungos Características Gerais - Não sintetizam clorofila - Não têm celulose (exceto alguns aquáticos) - Não armazenam amido (subst. de reserva) ≠ Plantas = Animais - Presença de quitina - Armazenam glicogênio A partir de 1969 – Reino Fungi Fungos Importância dos fungos Penicilina Penicillium chrysogenum (ou P. notatum). Ela foi descoberta pelo médico e bacteriologista escocês Alexander Fleming e está disponível como fármaco desde 1941, sendo o primeiro antibiótico a ser utilizado com sucesso Cefalosporina Cephalosporium acremonium (Acremonium chrysogenum). Isolada por Giuseppe Brotzu, em 1948. Relações Ecológicas Saprófitas Parasitas Simbiontes Saprófitas Decompõem resíduos em formas mais simples (ciclagem); Fungos utilizados em processos fermentativos, decomposição de poluentes (pesticidas), produção de alimentos; Degradação de materiais (couro, madeira, tintas, combustíveis, alimentos); Importância das enzimas extracelulares Simbiontes Micorrizas Líquens Fungo entomopatogênico Parasitas Candida albicans : Candidíase Fungos endofíticos Micologia Clínica Membros da microbiota normal (comensais) Agentes de infecções: micoses (relação de parasitismo) Agentes de intoxicações: micetismo e micotoxicose Responsáveis por reações de hipersensibilidade: Alergia Sítios de interação bactéria-fungos de importância clínica (Peleg AY et al., 2010. Nat. Rev. Microbiol. 8(5)340-349 Micologia Clínica - Fungos Patógenos primários: possuem fatores de virulência que lhes permitem romper ativamente as defesas do hospedeiro. Blastomyces dermatitidis (América do Norte), Coccidioides immitis (Estados Unidos e México), Histoplasma capsulatum (Estados Unidos) e Paracoccidioides brasiliensis (Brasil e América do Sul) Patógenos oportunistas: somente causam infecção quando ocorrem quebras nas barreias protetoras da pele e membranas mucosas ou quando existe falhas no sistema imune do hospedeiro. Candida, Cryptococcus spp. e Aspergillus spp. Micologia Clínica Micoses Candida albicans : Candidíase Candidíase gastrointestinal (GI) Candidíase vulvovaginal Micologia Clínica Micoses Tinea corporis: Dermatofitose Malassezia spp: Pitiríase Tinea unguinum: Onicomicose Micologia Clínica Micotoxicoses Aspergillus flavus : Aflatoxina Penicillium e Aspergillus : Ocratoxina A contaminados com Intoxicação causada pela ingestão de alimentos micotoxinas produzidas por fungos filamentosos. Exposição humana às micotoxinas Direta Ingestão de alimentos contaminados Aflatoxina – amendoim/milho Patulina – suco demaçã Ocratoxina – café Indireta Consumo de alimentos originados de animais previamente expostos às micotoxinas presentes em rações Micologia Clínica - Micetismo Micetismo ou envenenamento por cogumelos é a intoxicação causada pela ingestão de fungos macroscópicos toxígenos; Cogumelos com efeitos alucinógenos; A toxicidade pode se manifestar quando se ingere as toxinas no fungo in natura (toxinas termolábeis) ou quando submetidos à ebulição (termorresistentes)“Chá”. Amanita gemmata Amanita muscaria Lepiota helveola Fungos de importância clínica Alergênicos Aproximadamente 300 espécies de fungos já foram descritas alérgenos. A alergia a como fungos manifesta-se, principalmente, com sintomas clínicos de asma brônquica e rinite. Fungos Leveduras Filamentosos Fungos filamentosos - Bolores Multicelulares e filamentosos Hifas: estruturas tubulares e ramificadas. Conjunto de hifas - massas filamentosas enoveladas - micélio Micélio vegetativo é a parte correspondente a sustentação e absorção de nutrientes, se desenvolvendo no interior ou sobre o substrato; O micélio que se projeta na superfície e cresce acima do meio de cultivo é o micélio aéreo; Quando o micélio aéreo se diferencia para sustentar os propágulos de reprodução ou os corpos de frutificação, constitui o micélio reprodutivo. Micélio Leveduras Unicelulares Esféricas, ovais ou elipsóides Algumas formam pseudo-micélio Fungos Dimórficos Paracoccidioides brasiliensis 37 oC 23 oC Fungos Dimórficos Candida albicans – fator de virulência Morfologia dos Fungos Macromorfologia: características macroscópicas (coloniais) Micromorfologia: características microscópicas Fungos Filamentosos - Bolores Colônias de aspecto seco, aveludadas, algodonosas, pulverulentas. Macromorfologia Fungos Filamentosos - Micromorfologia Características microscópicas: . Multicelulares e filamentosos; . Hifas: Estruturas tubulares e ramificadas; . Conjunto de hifas massas filamentosas enoveladas. MICÉLIO Fungos Filamentosos - Micromorfologia Hifa Micélio Fungos Filamentosos - Micromorfologia Tipos morfológicos de hifas Apocítica (Septada) Cenocítica ( Asseptada) Apocítica (Septada) Cenocítica ( Asseptada) Hifas muitas vezes possuem um grau de organização que resulta na formação de estruturas especializadas. Estromas: estruturas somáticas compactas sobre os quais os corpos de frutificação se formam; Rizomorfos: são aglomerados de hifas formando um denso filamento semelhante às raízes; Haustório: hifas especializadas que auxiliam na adesão e penetração ao hospedeiro; Apressório: hifas com função de adesão ao hospedeiro estroma - Ascostroma Rizóide Micélio Reprodutivo Fungos unicelulares - leveduras Colônias de aspecto úmido, cremosa ou pastosa. Macromorfologia Fungos – Aspectos coloniais Leveduras - Micromorfologia Unicelulares Esféricas, ovais ou elipsóides Algumas formam pseudo-hifa Leveduras A célula fúngica Célula Fúngica Membrana celular e parede celular Manoproteínas Β-(1,6) glucano Β-(1,3) glucano Quitina Bicamada fosfolipídica Ergosterol Membrana e Parede celular Forma do fungo – força mecânica Proteção osmótica – evita o choque osmótico Composição química Manoproteina, glucanas e quitina (Leveduras – restrita a área de formação do blstoconídio) Quitina , glucanas (fungos filamentosos) Alguns lipídios e pigmentos (melanina – demáceos) Parede celular da célula fúngica às células do Barreira semipermeável Porção hidrofóbica e outra hidrofílica Esteróis – ergosterol Glicolipídeos - importantes na aderência hospedeiro Membrana celular ergosterol Modelo de Mosaico Fluido Membrana celular A célula fúngica Núcleo Citoplasma Parede celular Cromossomo Membrana citoplasmática Membrana nuclear Complexo de golgi Membrana citoplasmática Mitocondria Contém o genoma fúngico Cromossomos lineares DNA dupla fita em hélice Histonas associadas ao DNA cromossomal Núcleolo – corpúsculo esférico contendo DNA, RNA e proteínas Núcleo Estruturas circulares de DNA dupla fita; Localização extra cromossômica; Capacidade de autoduplicação de modo independente dos cromossomos; Raramente evidenciados em leveduras. Síntese proteica Ocorrem no citoplasma da célula Compostos por RNA e proteínas 80S – duas subunidades 60S e 40S Plasmídeos Ribossomos Vacúolo Hifas de crescimento ativo numerosos e de pequeno volume (matriz amorfa) Hifas “velhas” vacúolos grandes, podendo preencher completamente a hifa Acúmulo de nutrientes ou de enzimas hidrolíticas que promoverão a lise celular e reciclagem dos nutrientes. Facultativa Mucopolissacarídeos Fator de virulência - resistência à fagocitose (algumas leveduras) Ex: Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii Cápsula
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