Resumo Microbiologia Básica - Nutrição UFCSPA parte 3

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CRESCIMENTO BACTERIANO – FATORES NESCESSÁRIOS
1. O crescimento de uma população e o aumento do número de células.
2. Os fatores para o crescimento microbiano são separados em físicos e químicos.
Fatores FÍSICOS no Controle de Crescimento
1. De acordo com as faixas de temperatura preferidas, os micro-organismos são classificados como: psicrófilos, mesófilos, termófilos.
2. Faixas de temperatura em que o crescimento pode ser ótimo ou interrompido.
3. A maioria das bacterias cresce melhor em valores de pH entre 4 e 9.
OBS: varia com reações metabolicas – reaçoes tampao são realizadas nesses casos.
4. Em uma solucao hipertonica, a maioria dos micro-organismos sofre plasmólise; os halofílicos podem tolerar concentrações elevadas de sais.
Fatores QUÍMICOS no Controle de Crescimento
1. Todos os organismos requerem uma fonte de carbono; os quimio-heterotróficos utilizam uma molécula orgânica e os autotróficos em geral utilizam o dióxido de carbono.
2. O nitrogênio -> síntese de proteínas e ácidos nucleicos. Ele pode ser obtido da decomposição de proteínas ou de NH4+ ou NO3- ; Algumas bactérias são capazes de fixar nitrogenio (N2).
3. São classificados como aeróbicos obrigatórios, anaeróbicos facultativos, anaeróbicos obrigatórios, anaeróbicos, aerotolerantes e microaerofilicos.
- Aeróbicos obrigatórios (microbacterium tuberculose), 
- Anaeróbicos facultativos (Escherichia Coli), 
- Anaeróbios microaerofilos (streptococcus pneumoniae)
- Anaerobicos aerotolerantes (streptococcus pyogenes) (não utilizam 02 mas crescem no meio) e 
- Anaeróbios obrigatórios (Clostridium tetani) 
* Aerobicos, anaerobicos facultativos e anaerobicos aerotolerantes devem conter as enzimas superoxido-dismutase e catalase ou peroxidase. A distribuição destas enzimas nas celulas determina a capacidade dessas celulas existirem na presença de O2. 
4. Outros compostos quimicos requeridos para o crescimento microbiano incluem enxofre, fosforo, elementos tracos e, para alguns micro-organismos, fatores de crescimento organicos.
Biofilmes
1. Os micro-organismos aderem-se a superficies e acumulam-se na forma de biofilme nas superficies solidas em contato com a agua. Ex: dentes, nas lentes de contato e nos cateteres. Forma mais resistente do que livre.
Meio de cultura 
Qualquer material preparado para o crescimento de bacterias no laboratorio.
Ágar: agente solidificante utilizado nos meios de cultura.
Meio quimicamente definido: composição química exata e conhecida.
Meio complexo: composição química exata varia levemente de um lote para outro.
Meios e métodos para o crescimento anaeróbico: removem quimicamente o oxigenio molecular (O2), que poderia interferir com o crescimento de anaerobicos.
Ex: Placas de Petri podem ser incubadas em camaras anaerobicas
Técnicas especiais de cultura: Algumas bacterias parasitas ou fastidiosas devem ser cultivadas em animais vivos ou culturas de células.
Incubadores de CO2 ou jarras com vela sao utilizados para o crescimento de bacterias que requerem uma concentracao elevada de CO2.
Meios de cultivo seletivo e diferencial: Por inibição de micro-organismos indesejados com sais, corantes ou outros compostos quimicos, os meios seletivos permitem o crescimento somente dos micro-organismos de interesse.
Utilizados para distinguir micro-organismos diferentes.
Meio de enriquecimento: Utilizada para favorecer o crescimento de um micro-organismo especifico em uma cultura mista.
Obtenção de culturas puras: Uma colônia é uma massa visivel de células microbianas teoricamente originadas de uma celula.
Culturas puras normalmente obtidas pelo meétodo de semeadura em placa.
Preservação de culturas bacterianas: Os micro-organismos podem ser preservados durante longos periodos por congelamento em baixa temperatura ou liofilizacao (congelamento- dessecacao).
Crescimento de culturas bacterianas
Divisão bacteriana 
Método normal de reprodução -> fissão binária (uma célula se divide dando origem a duas celulas idênticas).
Fissão Binária - Elongação: ate atingir o dobro do comprimento - Formação de macro e micromoléculas - Formação de septo - Separação em duas células independentes
Crescimento balanceado: Aumento proporcional dos constituintes celulares;
PROTEÍNAS FTS: 
Filamentos termossensíveis: Forma divisomo
Formam o sépto: Anel- plano de divisão celular *(conecta o anel a membrana citoplasmatica)
Obs: Antes do divisomo a célula ja se encontra no processo de elongação e o DNA replicado.
PROTEÍNAS MIN: *(ORGANIZADORA)
*(Móveis: correm de um polo a outro dentro do citoplasma)
Garantem a forma do divisomo somente no centro celular e não nos polos.
Proporciona o desenvolvimento de novos farmacos: etapa específica de crescimento
MIN “E” faz com que “C” e “D” fiquem nos polos
Algumas bacterias se reproduzem por brotamento, formacao de esporos aereos ou fragmentacao.
Tempo de geração: O tempo requerido para uma célula se dividir ou uma população duplicar de tamanho. (Quando 1 célula forma duas – tempo variavel)
Representação logarítmica das populações bacterianas A divisao bacteriana ocorre conforme uma progressao logaritmica (duas celulas, quatro celulas, oito celulas, etc.).
Fases do crescimento *(Essas fazes não se aplicam a uma única célula e sim a pupulações)
Quando algumas bacterias sao inoculadas em um meio liquido de crescimento e a populacao e contada em intervalos regulares, e possivel representar graficamente a curva de crescimento bacteriano,
Fase lag, ocorre pouca ou nenhuma alteração no numero de celulas, mas a tividade metabolica e intensa.
OBS: Demora para começar o crescimento pois vem de uma cultura e fase estacionária. Cada bacteria tem um tempo para inicar o crescimento (fase de adaptação ao meio)
- Ocorre em células que sofreram algum tipo de dano térmico por radiação ou compostos químicos tóxicos.
- Esta fase não ocorrera quando a cultura em crescimento exponencial é transferida para o mesmo meio.
Fase log, as bactérias se multiplicam em alta velocidade, considerado as condicoes fornecidas pelo meio.
Fase estacionaria, ha um equilibrio entre a divisao e a morte celular.
OBS: Para de crescer; O consumo de nutrientes acaba; A própria bactéria libera subst que inibem o seu crescimento 
Fase de morte celular, o numero de mortes excede o numero de novas celulas formadas.
OBS: Esporos não chegam a essa curva
Medida direta do crescimento microbiano
O metodo-padrao de contagem em placas reflete o numero de micro--organismos viaveis e assume que cada bacteria se desenvolve em uma colonia; as contagens em placas sao expressas como os numeros de unidades formadoras de colonias (UFCs).
Uma contagem em placas pode ser feita pelos metodos de incorporacao em placa ou espalhamento em placa.
Na filtracao, bacterias sao retidas na superficie de uma membrana filtrante e posteriormente transferidas para um meio de cultura para crescimento e contagem.
O metodo do numero mais provavel (MNP) pode ser utilizado para micro-organismos que crescem em meio liquido; e uma determinacao estatistica. 
Na contagem microscopica direta, os micro-organismos em um determinado volume de uma suspensao bacteriana sao contados com a utilizacao de uma lamina especialmente desenvolvida. 
Determinação do número de bactérias por métodos
indiretos 
Um espectrofotometro e utilizado na determinacao da turbidez pela medida da quantidade de luz que atravessa uma suspensao de celulas.
Uma maneira indireta de estimar o numero de bacterias e a medida da atividade metabolica da populacao (p. ex., a producao de acido ou o consumo de oxigenio).
Para organismos filamentosos, como fungos, a medida do peso seco e um metodo conveniente de determinacao do crescimento.