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Sumário Introdução 2 DESENVOLVIMENTO 3 MATERIAIS E REAGENTES 4 DADOS OBTIDOS 4 Interpretação macroscópica 4 Interpretação microscópica 5 CONSIDERAÇÕES FINAIS 6 Introdução Os microrganismos são os seres mais números e mais amplamente distribuídos pela Terra. São encontrados nos mais diferentes ambientes, das profundezas dos oceanos, desde a atmosfera até quilômetros de profundidade na crosta terrestre, no interior de outros organismos e até mesmo dentro de nossa célula. Quanto mais movimentado e populoso é o ambiente, mais rico em microrganismos se torna este. As bactérias são exemplos de microrganismos que apresentam estrutura celular. É muito importante o estudo da morfologia desta, pois, é essencial para a sua identificação. Além das formas fundamentais: esféricas, em bastão e em espiral, são também de interesse a dimensão e o modo de agrupamento das células, as bactérias podem ser consideradas os organismos mais primitivos existentes atualmente. Como é difícil observá-las ao microscópio, pela sua transparência, a utilização de corantes é extremamente em pregada na microbiologia para o estudo das mesmas. Os processos de coloração são usados para evidenciar a estrutura geral, ou alguma particularidade da estrutura dos microrganismos, auxiliando sua identificação. Entre vários métodos de coloração bacteriana, o método de Gram é mais empregado na rotina bacterioscópica, pois permite observar a forma, o tipo de agrupamento, além de prestar informações a respeito do material celular frente aos corantes básicos, com a vantagem de fácil execução. DESENVOLVIMENTO O estudo começa com a identificação das placas de Ágar Simples e Ágar Sabouraud, que são colocadas em exposição ao ar atmosférico por cerca de 30 minutos. Fechando-as e incubando as de Ágar Sabouraud à temperatura ambiente por uma semana, e as de Ágar Simples por cerca de 48 horas à temperatura de 37°C. Logo, o estudo continua através da observação da morfologia bacteriana e assim, o fornecimento das informações a respeito do seu material celular através da realização do método de coloração de Gram, que consiste em preparar esfregaços a partir de culturas puras, corá-los e observá-los ao microscópio óptico, sob imersão e identificar a morfologia destes microrganismos e sua reação frente ao método de Gram. MATERIAIS E REAGENTES Placas de petri contendo Ágar Simples e Ágar Sabouraud estéreis Contador de colônias Lâminas de microscopia Alça de platina Bico de bunsen Água destilada Suporte de coloração Solução de cristal de violeta Solução de lugol Solução de etanol Solução de fucsina Óleo de imersão Microscópio óptico DADOS OBTIDOS Interpretação macroscópica Número de colônias. Cor das colônias. Tipo de borda Regular/Irregular. Tipo de colônia Pura/Mista. Fungos 12 Preto, pardo, marrom, amarelo e branco. Regular = 7 Irregular = 5 Pura = 4 Mista = 8 Bactérias Incontáveis. Vermelho e roxo, Regular ~ 21 Irregular ~ 12 Pura ~ 14 Mista ~ 7 Interpretação microscópica Foram analisados dois esfregaços de colônias puras distintas em um obtiveram-se os seguintes resultados: Esfregaço 1: lâmina contendo bacilos e cocos Gram positivo; Esfregaço 2: lâmina contendo cocos, e estafilococos bem distribuídos, dispersos pela lâmina Gram positivo. Placa contendo bactérias Placa contendo fungos CONSIDERAÇÕES FINAIS O ar atmosférico contém matéria particulada, pó e gotículas que podem estar carregados com microrganismos. O número e o tipo de microrganismos contaminados do ar atmosférico são determinados pelas fontes de contaminação existentes no ambiente. É muito importante sabermos identificá-los a fim de poder estudar melhor o comportamento dos microrganismos existentes, além do conhecimento de sua fisiologia, metabolismo e classificação. O mecanismo da coloração de Gram refere à composição da parede celular, sendo que as Gram-positivas possuem uma espessa camada de peptideoglicano ( composto fundamental da parede celular da maioria das bactérias), fazendo com que o cristal violeta tinja especificamente essa bactéria, mesmo depois da utilização do descorante, já que essa substância, torna o processo de descoloração mais eficiente nas Gram-negativas, já que ele atua sobre a cama mais externa dessa bactéria, a membrana externa, destruindo-a deixando então a bactéria ausente da mesma. A utilização de outros corantes, irá atuar somente nas Gram-negativas, diferenciando-as assim, do outro grupo de bactéria.
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