Coloração de Ziehl-Neelsen

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Coloração de Ziehl-Neelsen (Coloração de BAAR) 
 
PRINCÍPIO 
A coloração para bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR) é utilizada basicamente para 
micobactérias, que são bactérias que possuem uma parede celular constituída de ácidos 
micólicos resistentes à descoloração por álcool-ácido. Essa coloração é o método mais rápido 
para a detecção de micobactérias em amostras clínicas. 
 
AMOSTRA 
Amostras do trato respiratório inferior, biópsias, tecidos, líquidos em geral, fezes e linfa de lóbulo 
de orelha. 
 
PROCEDIMENTO 
1. Preparo do esfregaço 
Amostras de escarro: 
 Selecionar a parte mais purulenta da amostra e espalhar em ¾ da lâmina. 
 Deixar secar dentro da cabine de segurança e fixar no calor antes de corar. 
Amostras de líquidos orgânicos, lavado brônquico e lavado gástrico: 
 Centrifugar a amostra em centrífuga refrigerada a 5.000 rpm por 15 minutos. 
 Desprezar o sobrenadante e homogeneizar, e com alça bacteriológica depositar uma gota 
do sedimento na lâmina. 
 Deixar secar dentro da cabine de segurança e fixar no calor antes de corar. 
Biópsias e tecidos 
 Transferir a amostra para um gral estéril e macerar com auxílio de pistilo. Se necessário, 
adicionar algumas gotas de solução fisiológica estéril. 
 Retirar com o auxílio de uma alça bacteriológica uma amostra do macerado e espalhar em 
¾ da lâmina. 
 Deixar secar dentro da cabine de segurança e fixar no calor antes de corar. 
Amostras de urina 
 Centrifugar todo o volume da amostra em centrífuga refrigerada a 5.000 rpm por 15 
minutos. 
 Desprezar o sobrenadante e homogeneizar, e com alça bacteriológica depositar uma gota 
do sedimento na lâmina. 
 Deixar secar dentro da cabine de segurança e fixar no calor antes de corar. 
 
 
Amostras de fezes 
 Colocar uma gota de solução fisiológica em uma lâmina e emulsionar uma pequena 
amostra de fezes sobre a gota. 
 Deixar secar dentro da cabine de segurança e fixar no calor antes de corar. 
 
2. Coloração 
1. Cobrir o esfregaço com fucsina de Ziehl; 
2. Aquecer a parte inferior da lâmina com a chama do bico de Bunsen até observar a emissão 
de vapores e deixar 5 minutos; 
3. Lavar com água corrente; 
4. Cobrir o esfregaço com álcool-ácido e deixar por 1 minuto; 
5. Lavar com água corrente; 
6. Cobrir o esfregaço com azul de metileno e deixar por 2 minutos; 
7. Lavar com água corrente; 
8. Deixar secar ao ar. 
 
COMO REPORTAR O RESULTADO 
Resultado negativo – não foram observados bacilos álcool-ácido resistentes na amostra 
analisada. 
Resultado positivo – ver tabela abaixo. 
BAAR (OBJETIVA DE 100X) RESULTADO 
0 bacilos/campo Negativo 
1 a 2 bacilos/300 campos Confeccionar nova lâmina* 
1 a 9 bacilos/100 campos 1+ 
1 a 9 bacilos/10 campos 2+ 
1 a 9 bacilos/campo 3+ 
>9 bacilos/campo 4+ 
* Se o resultado persistir, pedir nova amostra para confirmar o resultado.