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EXAMES CITOLÓGICOS - Estudo das células, sem necessidade de uso dos tecidos, importante para diagnóstico de neoplasias malignas (como câncer de colo de útero) e para detecção de agentes infecciosos e parasitários. - O material de estudo é obtido por raspagem de pele ou mucosas, secreções, líquidos (urina, líquido amniótico, etc), imprint ou punção aspirativa. EXAMES ANATOMOPATOLÓGICOS . BIÓPSIA . - É a remoção de um fragmento de tecido vivo para estudo das alterações presentes, confirma ou corrige um diagnóstico, melhora o conhecimento de processos patológicos, auxilia o ensino. - Pode ser: INCISIONAL: retira apenas parte da lesão. EXCISIONAL: retira toda a lesão. - Para ser realizada é necessário: bisturi, laser, punch e agulhas grossas; após a amostragem é feito a fixação e o condicionamento do material. . AUTÓPSIA . - Também conhecida como necropsia, é um exame feito após a porte, para confirmar ou corrigir um diagnóstico clínico e definir a causa da morte. Usado para interesse médico-legal (em casos de mortes violentas) e clínico- patológico. - Utilizado no atestado de óbito: Causa mortis, imediata ou terminal Causas consequenciais Causa básica ou principal Causas contribuintes . PEÇAS CIRÚRGICAS . - A partir de tratamentos cirúrgicos, podem ser: - SIMPLES: retirada de um órgão. - COMPOSTAS: além de ser retirar o órgão, são retirados seus tecidos e outros componentes adjacentes. . PREPARO DO MATERIAL . - Ficha completa: Dados do paciente e do profissional História clínica Hipótese diagnóstica - No laboratório: Preparo da lâmina Colorações Descrições macro e microscópicas . HISTOQUÍMICA . - Baseado em reações químicas (íons, ácidos nucleicos, proteínas, poli e oligossacarídeos). - Revolução industrial – tecidos. . IMUNOHISTOQUÍMICA . - Baseada em reações imunes humorais Ag-Ac, onde o Ac identifica Ag (plasmócitos-linfócitos B). - Importante para: Alterações morfológicas imperceptíveis Patógenos que não coram bem em HE Classificação de neoplasias Micrometástase em linfonodos Doenças infecciosas - Precisa que o Ac seja marcado ou por substâncias fluorescentes (imunofluorescência) ou por enzimas (imunoenzimática). Ambas podem ocorrer de forma direta ou indireta. A forma indireta ocorre com a marcação do AcII, sendo que vários AcII se ligarão a um AcI, que então se ligará ao Ag, aumentando o efeito da técnica. Vantagens Desvantagens - fácil realização - ausência de arquitetura tecidual - baixo custo - resultado rápido - menos quantidade da amostra - pode ser repetido -simples na estrutura e materiais necessários - capacitação - pouca invasividade e baixo risco Odontologia - UNESP / ICT Patologia Geral (BOGLIOLO) – MÉTODOS DE ESTUDO Estudos tradicionais Estudos especiais - Na imunoenzimática o Ac é marcado por peroxidase, adiciona-se o substrato DAB (cromogênico), e adquire uma coloração castanha. Biotina, fibronectina. . CULTURA CELULAR . - Manutenção e multiplicação de células in vitro, usando um meio favorável para cultura. - Cultura primária (doador) é multiplicada até o limite. - Células estabelecidas = modificadas para multiplicar infinitamente (mutação de telômeros). - Importância: Análise de metabolismo e comportamento celular (fisiologia, farmacologia, bioquímica, etc) Substitui animais em testes Diagnóstico Ac monoclonais/específicos Análise citogênica Estudos in vitro X in vivo . MORFOMETRIA . - “Medição”, podem ser análises: Qualitativas Semiquantitativas (escores: leve, moderada, severa) Quantitativas (células por µm², software correto) PESQUISA . BIOLOGIA MOLECULAR . - Estudo em nível molecular, com foco especial no estudo do material genético (DNA, RNA, proteína, etc). Importante para: Diagnósticos precoces e precisos Valor diagnóstico, prognóstico e preditivo, pois identifica mutações (precursores das neoplasias) antes que possam se ver os sintomas - Métodos de realização: HIBRIDAÇÃO MOLECULAR: sondas de DNA se ligam a um DNA molde e identificam sequências genômicas (de bases nitrogenadas) por fluorescência ou por enzimas. Há desnaturação para as fitas de DNA se ligarem às sondas (hibridação in sitio). POLIMERASE EM CADEIA: reação de amplificação de sequências específicas de DNA e RNA, usada para diagnóstico de doenças infecciosas, genéticas e neoplasias.