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z Transcrição z Em procariotos, os processos de transcrição e tradução são acoplados e ocorrem no mesmo local, o citoplasma. Em eucariotos, a transcrição ocorre no núcleo da célula. O dogma central da biologia molecular (DNA->RNA->PTN) não é mais estritamente valido, pois sabe-se que algumas sequências de RNA não-virão funcionam como molde para a síntese de DNA celular. Somente uma pequena porção do DNA é transcrito, isso porque: (1) grande parte dos RNA não são do tipo mensageiro; (2) os transcritos primários sofrem redução em seu tamanho durante o processamento - retirada de introns; e (3) apenas a parte central do mRNA maduro é traduzida. Um filamento de DNA de um gene é usado como molde para sintetizar um filamento complementar de RNA - transcrito primário, que ira virar transcrito gênico. Em procariotos -> apenas uma RNA polimerase faz a transcrição Subunidade/fator sigma está envolvido apenas no inicio da transcrição RNA polimerase desenrola continuamente a dupla hélice de DNA a sua frente e re-enrola os filamentos atras do sítio de polimerização. O termino ocorre quando a RNA polimerase encontra um sinal de termino e o complexo de transcrição se dissocia. Em eucariotos -> DNA fita dupla é desenrolado e forma a bolha de transcrição Uma das fitas (fita molde/anti-senso/3'5') de DNA é usada como molde para a síntese de RNA, que ocorre no sentido 5' -> 3' Fita que serve como molde forma com a cadeia crescente de RNA um híbrido transitório RNA-DNA O alongamento da cadeia é feito pela adição de nucleotídeos A, G, C e U ao grupamento hidroxila 3' da cadeia crescente de RNA São necessárias 3 moléculas diferentes de RNA polimerase para sintetizar os vários tipos de RNA. h RNA polimerase I - sintetiza o rRNA h RNA polimerase II - sintetiza mRNA e a maioria dos genes snRNA h RNA polimerase III - sintetiza tRNA e snRNA Fatores de transcrição São divididos em cis-atuantes e trans-atuantes. Os primeiros são responsáveis por atuar como sinais de reconhecimento para que os segundos possam se ligar ao DNA para guiar e ativar a RNA polimerase. Os fatores cis-atuantes ficam agrupados a montante a sequência codificadora de um gene, constituindo a região promotora. h GC Box h TATA Box - mutação em TATA desloca o ponto de inicio da transcrição h CAAT Box - maior determinante da eficiência do promotor h Acentuadores - potencializam a transcrição h Silenciadores - inibem a transcrição A RNA polimerase II é capaz de mover-se através dos nucleossomos com a ajuda do complexo proteico FACT. Pontas 3' são produzidas por clivagem endonucleotídica dos transcritos primários. z Processamento z Série de reações sofridas pelo transcrito, fazendo com que ele fique maduro. t Capeamento -> Adiciona-se um nucleosídeo metilado ao primeiro nucleotídeo 5' transcrito, para assim facilitar o encadeamento, facilitar o transporte do núcleo para o citoplasma, proteger o transcrito do ataque de exonucleases 5'->3' e auxiliar no encaixe da subunidade 40S do ribossomo ao mRNA. t Poliadenilação -> Formação da cauda poli(A) pela adição de resíduos de adenina pela enzima poli(A)-polimerase, para assim facilitar o transporte de mRNA para o citoplasma, a molécula dura mais e, também, facilitar a tradução. t Encadeamento (splicing) -> excisão de íntrons e fusão de éxons. O encadeamento (união dos éxons) ocorre pelo seguinte mecanismo: clivagem na junção de cadeia 5', ataque ao nucleotídeo e clivagem na junção 3'.
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