Introdução a Histologia

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Histologia Histologia 
AnimalAnimal
Universidade de Caxias 
do Sul
Profa. Dra. Suelen Paesi
 
Histologia e TecidosHistologia e Tecidos
Histologia: É o ramo da anatomia que : É o ramo da anatomia que 
estuda os tecidos animais e vegetais estuda os tecidos animais e vegetais 
TecidoTecido: Grupos de células, matriz intercelular : Grupos de células, matriz intercelular 
e líquido extracelular que desempenham uma e líquido extracelular que desempenham uma 
mesma função em um organismomesma função em um organismo
 
Metodologia para Estudar os Metodologia para Estudar os 
TecidosTecidos
 FixaçãoFixação
 DesidrataçãoDesidratação
 ImpregnaçãoImpregnação
 MicrotomiaMicrotomia
 Montagem e ColoraçãoMontagem e Coloração
 MicroscopiaMicroscopia
 
http://mhttp://m
inervainerva
.ufpel..ufpel.
edu.bredu.br
 
Planos e Cortes histológicosPlanos e Cortes histológicos
 Exemplos: longitudinal, tranverso, paralelo, Exemplos: longitudinal, tranverso, paralelo, 
bilateral, basal, apical... bilateral, basal, apical... 
 
 Planos de cortePlanos de corte
HistológicoHistológico
http://minerva.ufphttp://minerva.ufp
el.edu.brel.edu.br
 
 Planos de Planos de 
cortecorte
HistológicoHistológico
 
Metodologia para Estudar os Metodologia para Estudar os 
TecidosTecidos
FixaçãoFixação:: tratamento com agentes tratamento com agentes 
químicos para retardar a decomposição e químicos para retardar a decomposição e 
manter as características do tecido. Ocorre manter as características do tecido. Ocorre 
a precipitação das proteínas. Ex. a precipitação das proteínas. Ex. Formol Formol 
tamponado.tamponado.
 
Metodologia para Estudar os Metodologia para Estudar os 
TecidosTecidos
Desidatração e ClarificaçãoDesidatração e Clarificação: : 
retirada da água com retirada da água com álcool álcool e tratado com e tratado com 
xilolxilol que é miscível com a parafina e que é miscível com a parafina e 
translúcido.translúcido.
 
Metodologia para Estudar os Metodologia para Estudar os 
TecidosTecidos
Impregnação e InclusãoImpregnação e Inclusão: A peça é : A peça é 
impregnada com impregnada com parafinaparafina que substitui o que substitui o 
xilol é então colocado em um blocoxilol é então colocado em um bloco
 
Metodologia para Estudar os Metodologia para Estudar os 
TecidosTecidos
 Microtomia: Os blocos Microtomia: Os blocos 
são cortados em fatias são cortados em fatias 
muito finas de 5 a 10muito finas de 5 a 10μμm m 
 
 Substâncias basófilas e acidófilas - HE:Substâncias basófilas e acidófilas - HE: a a 
principal técnica de coloração de tecidos para o principal técnica de coloração de tecidos para o 
estudo de Histologia básica é a técnica estudo de Histologia básica é a técnica HE HE 
(Hematoxilina-Eosina)(Hematoxilina-Eosina). . 
 Através dessa técnica, podemos diferenciar Através dessa técnica, podemos diferenciar 
porções basófilas e acidófilas do tecido porções basófilas e acidófilas do tecido 
estudado. estudado. 
 
Metodologia para Estudar os Metodologia para Estudar os 
TecidosTecidos
 Coloração: Os corantes Coloração: Os corantes 
mais usados em MO são:mais usados em MO são:
1-1- Hematoxilina: é uma Hematoxilina: é uma 
base que cora substâncias base que cora substâncias 
ácidas como RNA e ácidas como RNA e 
DNA. Sendo assim, ela DNA. Sendo assim, ela 
costuma corar de azul o costuma corar de azul o 
núcleo e outras regiões núcleo e outras regiões 
ricas em RNA.ricas em RNA.
 
ColoraçãoColoração
 2- Eosina: A eosina é um 2- Eosina: A eosina é um 
ácido, basófila, tendo ácido, basófila, tendo 
afinidade pelo afinidade pelo 
citoplasma, fibras citoplasma, fibras 
colágenas e outras colágenas e outras 
substâncias básicas das substâncias básicas das 
células como as proteínas células como as proteínas 
com radicais básicoscom radicais básicos
 
 Microscpia ópticaMicroscpia óptica Microscópio Microscópio 
ÓpticoÓptico
 
HistoquímicaHistoquímica
 Princípios da histoquímica:Princípios da histoquímica: o princípio básico da o princípio básico da 
histoquímica é a localização de determinados histoquímica é a localização de determinados 
compostos químicos a partir de técnicas de compostos químicos a partir de técnicas de 
preparação. preparação. 
 A observação da presença destes compostos nas A observação da presença destes compostos nas 
células pode auxiliar muito na determinação das células pode auxiliar muito na determinação das 
características celulares.características celulares.
 
Diagnóstico histoquímicoDiagnóstico histoquímico
 Miopatia mitocondrialMiopatia mitocondrial
 
Localização de lipídios:Localização de lipídios:
 Para a localização de lipídios, são utilizados Para a localização de lipídios, são utilizados 
corantes que possuem alto grau de dissolução corantes que possuem alto grau de dissolução 
em gorduras. em gorduras. 
 Os principais exemplos de corantes específicos Os principais exemplos de corantes específicos 
para lipídios são o para lipídios são o Sudan IV e o Sudan NegroSudan IV e o Sudan Negro 
 
Tecido adiposo de mamífero Tecido adiposo de mamífero 
Sudan IVSudan IV
 
Sudan NegroSudan Negro
Gotículas de gordura em fígado de Gotículas de gordura em fígado de 
peixepeixe
 
Localização de ácidos nucléicosLocalização de ácidos nucléicos
 A localização dos ácido nucléicos baseia-se no método A localização dos ácido nucléicos baseia-se no método 
de Feulgen.de Feulgen.
 Neste método, o DNA reage com uma solução de Neste método, o DNA reage com uma solução de 
ácido clorídrico, que retira as bases púricas e forma ácido clorídrico, que retira as bases púricas e forma 
grupamentos aldeídos na desoxirribose. grupamentos aldeídos na desoxirribose. 
 Então, é adicionado Então, é adicionado o reativo de Schiffo reativo de Schiff (fucsina básica (fucsina básica 
descorada pelo anidrido sulfuroso) que se combina com descorada pelo anidrido sulfuroso) que se combina com 
os radicais aldeído para formar um composto insolúvel os radicais aldeído para formar um composto insolúvel 
e vermelho.e vermelho.
 Esse método possui uma proporcionalidade entre a intensidade da coloração Esse método possui uma proporcionalidade entre a intensidade da coloração 
e o teor de DNA, de modo que zonas mais coradas possuem maior teor de e o teor de DNA, de modo que zonas mais coradas possuem maior teor de 
DNA DNA 
 
Coloração por FeulgenColoração por Feulgen
 Hemácias de aveHemácias de ave
 
Localização de polissacarídeos:Localização de polissacarídeos:
 A presença de polissacarídeos pode ser A presença de polissacarídeos pode ser 
determinada pela técnica do determinada pela técnica do PAS (Periodic PAS (Periodic 
Acid-Schiff).Acid-Schiff). O ácido periódico oxida os O ácido periódico oxida os 
grupamentos 1-2 glicol, produzindo aldeídos. grupamentos 1-2 glicol, produzindo aldeídos. 
 utilizada nos tecidos com utilizada nos tecidos com acúmulos de acúmulos de 
glicogênioglicogênio, , camada de revestimento de camada de revestimento de 
mucopolissacarídeos, glicosaminoglicanasmucopolissacarídeos, glicosaminoglicanas..
 
PAS (Periodic Acid-Schiff)PAS (Periodic Acid-Schiff)
 Células caliciformes no epitélio intestinalCélulas caliciformes no epitélio intestinal
 
Localização de enzimasLocalização de enzimas
 Fosfatase alcalinaFosfatase alcalina
 DesidrogenasesDesidrogenases
 PeroxidasesPeroxidases
 
ImunohistoquímicaImunohistoquímica
 É a tecnica que usa anticorpos marcados para a É a tecnica que usa anticorpos marcados para a 
localização de estruturas ou moléclas no tecido.localização de estruturas ou moléclas no tecido.
 EX .: Identificaçãode m.o. por ImunohistoquímicaEX .: Identificação de m.o. por Imunohistoquímica
 
Tipos de MicroscopiaTipos de Microscopia
 Microscopia Microscopia confocalconfocal : Usa raio laser : Usa raio laser
 Microscopia Microscopia PolarizadaPolarizada: Usa luz polarizada : Usa luz polarizada (após (após 
passar por um filtro vibra numa única direção).passar por um filtro vibra numa única direção).
 Microscopia de Microscopia de FluorecênciaFluorecência: Com ≠s : Com ≠s 
comprimentos de onda.comprimentos de onda.
 Microscopia Microscopia EletrônicaEletrônica: Usa um feixe de : Usa um feixe de 
elétrons. elétrons. As substâncias eletrodensas desviam mais o feixe que as demaisAs substâncias eletrodensas desviam mais o feixe que as demais..
 
Laboratório de Laboratório de 
Histologia AnimalHistologia Animal
 
Coleta do material histológicoColeta do material histológico
 
Aparelho reprodutor e excretor de Aparelho reprodutor e excretor de 
ratorato
 
Equipe do LHA 2007Equipe do LHA 2007
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