Aula Prática 01 - Espectrofotometria_2018

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE SERGIPE
CAMPUS PROF. ANTÔNIO GARCIA FILHO 
DEPARTAMENTO DE FARMÁCIA DE LAGARTO – DFAL
ANÁLISE LABORATORIAL I
PROF. DR. JOSÉ MELQUIADES DE REZENDE NETO
RELATÓRIO 01
FUNDAMENTOS DE FOTOMETRIA E ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORÇÃO
BRUNA SOUZA HORA
CRISLAINE FERREIRA DO NASCIMENTO SANTOS
GEOVAN DE OLIVEIRA JUNIOR
SANDY MARIA DOS SANTOS SOUZA VIEIRA
LAGARTO – SE
2019
INTRODUÇÃO
O termo espectro foi utilizado inicialmente por Newton, quando este descobriu que a luz branca, ao atravessar um prisma, é dividida em várias cores. Atualmente, sabe-se que o espectro visível é apenas uma pequena parte do espectro eletromagnético. A luz é, portanto, definida como uma forma de energia eletromagnética, formada por ondas que apresentam comprimentos diferentes. O comprimento de onda (λ) é medido em nm onde 1,0nm equivale a 10-9 m. A tabela abaixo mostra as regiões do espectro em relação ao comprimento de onda:
A cor dos objetos é devida a duas causas: reflexão e absorção. Assim, um papel transparente, vermelho, recebe todos os λ da luz branca, mas reflete e transmite somente o vermelho, sendo o restante absorvido. Quando um objeto é da cor branca, todos os λ são refletidos, se é negro, é porque, praticamente, todos os λ são absorvidos. No entanto, existe uma cor (ou λ) que é mais absorvida, a qual corresponde à chamada cor complementar. Se uma solução absorve na faixa de 435-480nm, que corresponde à radiação azul, a sua cor (cor complementar) será o amarelo; a sensação visual do amarelo será dada pelo conjunto de todos os outros componentes da luz branca, que não foram absorvidos.
2. Parte Experimental - Materiais utilizados 
 	O procedimento foi realizado utilizando-se 2 mL da solução azul de metileno a 0,01%, sendo feita a sua diluição em 10 tubos, onde 9 tubos continham em cada um 2mL de água purificada. Com o auxílio de uma pipeta, avolumou-se 4 mL da solução estoque e foi colocado no primeiro tubo, em seguida foi transferida 2mL para o tubo 2, logo após foi transferido 2 mL do tubo 2 para o tubo 3 e assim sucessivamente, até a chegada ao tubo 10, que teve 2 mL da sua solução desprezada para que todos ficassem com um volume final de 2 mL. 2mL
2mL
2mL
2mL
2mL
2mL
2mL
2mL
2mL
2mL
Descarte
 
Dando continuidade, no espectro foi ajustando-se o comprimento de onda de 400 a 700nm com intervalos a cada 50nm, onde o comprimento com a maior absorbância da solução padrão foi utilizada para analisar os 10 tubos e suas respectivas diluições. A água foi utilizada como branco para avaliação da absorbância das soluções diluídas. Os respectivos valores que foram obtidos serão necessários para a construção do gráfico de correlação entre a concentração e a absorbância, e o cálculo da equação da reta.
Resultados e Discussão
	Comprimento de onda
	Puro
	400
	0,13
	450
	0,113
	500
	0,14
	550
	0,502
	600
	0,92
	650
	1,41
	700
	0,264
	X
	Y
	Concentração mg/dL
	Absorbancia
	20
	1,41
	10
	0,702
	5
	0,353
	2,5
	0,18
	1,25
	0,085
	0,625
	0,05
	0,312
	0,023
	0,156
	0,014
	0,078
	0,009
	0,039
	0,005
	0,019
	0,002
	Tubo
	Concentração (mg/dL)
	Absorbância
	Branco
	0
	0
	Teste 1
	50
	0,1
	Teste 1
	50
	0,105
	Teste 1
	50
	0,089
	Teste 2 
	100
	0,193
	Teste 2
	100
	0,205
	Teste 3
	100
	0,2
	Teste 4
	200
	0,4
	Teste 4
	200
	0,39
	Teste 4
	200
	0,411
	Paciente X
	151,22
	0,301
	Paciente Y
	111,53
	0,222