hematologia e imunologia

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Análises Clínicas
Hematologia e Imunologia 
Prova Pratica 
COAGULOGRAMA: 
Triagem para alterações de coagulação. 
 - O prolongamento de qualquer um desses tempos indica a deficiência ou inibição nos fatores de coagulação. 
TP – Tempo de protrombina 
 - Mede o tempo que um coágulo de fibrina leva para se formar em uma amostra de plasma depois da adição de um reagente de tromboplastina. 
- Via extrínseca e comum. 
É utilizado para identificar anormalidades nas vias extrínseca e comum;
Em segundos 12 a 18s. 
Em atividade de protrombina > 70%
INR < 1.2 
PREPARAÇÃO
1. Reconstituir o conteúdo do frasco com o volume de água deionizada especificado em seu rótulo. 
2. Recolocar a tampa e gentilmente misturar o conteúdo do frasco até a sua completa dissolução. Deixar em repouso por 15 minutos antes do uso para assegurar sua total hidratação
PROCEDIMENTO 
Este procedimento é para a realização manual dos testes. 
1. No momento do uso, quando o reagente TP já estiver reconstituído de acordo com o ítem ‘’PREPARAÇÃO’’, pré-incubar a 37ºC por no mínimo 10 minutos. Manter a suspensão do reagente por agitação magnética ou misturando por inversão antes do uso.
2. Pipetar 100 µl do plasma a ser testado ou do plasma controle em um tubo plástico. Incubar a 37ºC por 1 minuto. 
3. Após esse tempo, pipetar 200µl do reagente TP pré-incubado, disparando simultaneamente o cronômetro.
4. Delicadamente por leve inversão registrar o tempo de coagulação do plasma em segundos
TTP – Tempo de tromboplastina parcial 
 - Mede o quão bem estão funcionando as sequências de coagulação nas vias intrínsecas e comum 
Em segundos 25 a 34s. 
PROCEDIMENTO
Este procedimento é para a realização manual dos testes. 
1. Pré-incubar o Cloreto de Cálcio (0,02M) (2) a 37ºC por no mínimo 10 minutos. 
2. Pipetar 100µl do plasma a ser testado ou do plasma controle em um tubo plástico. Incubar a 37ºC por 1 a 2 minutos. 
3. Pipetar 100µl do reagente TTPa (1) no tubo contendo o plasma após homogeneizar a suspensão do reagente por inversão. 
4. Incubar a 37ºC por 3 minutos. 
5. Após esse tempo, pipetar 100µl do Cloreto de Cálcio (0,02M) (2) pré-incubado, disparando simultaneamente o cronômetro. 
6. Delicadamente por leves movimentos de inversão do tubo, registrar o tempo de coagulação do plasma em segundos.
ELISA
Diluente + amostra – 30m incubadora 
Reagentes 
Primeiro – anticorpo conjugado – Uma gota / 30m incubadora
Lavagem – Lavar cada cubeta com 350 ul de tampão de la- Tempo de contato da solução de lavagem entre 30 vagen (5 vezes) e 60 segundos. Eliminar completamente o líquido residual das cubetas. 
Segundo – substrato (Revelador A e Revelador B) – Uma gota de cada / 30m incubadora. 
Lavagem – Lavar cada cubeta com 350 ul de tampão de la- Tempo de contato da solução de lavagem entre 30 vagen (5 vezes) e 60 segundos. Eliminar completamente o líquido residual das cubetas
Terceiro – solução de parada – Uma gota 
Resultado: 
Positivo: Alteração de cor 
Negativo: Sem alteração de cor 
Titulação 
Quando não tiver espectrofotômetro fazer o teste de titulação até parar de
dar positivo.
FLOCULAÇÃO - VDRL (sífilis) 
Positivo: floculação 
Negativo: Não floculação 
Passo a Passo 
Validação: controle + e controle - 
Amostra 50 ul 
1 gota Reagente A – agitar a placa durante 4 minutos 
Observar no microscópio com aumento de 60 a 100x. 
Positivo 
Negativo 
AGLUTINAÇÃO EM LÁTEX 
Um dos mais úteis marcadores clínicos da artrite reumatóide é o fator reumatóide (FR) no soro. Fator reumatóide é o termo usado para descrever uma variedade de anticorpos (IgM, IgG, IgA e IgE) que podem se ligar ao fragmento Fc de uma imunoglobulina G. São, portanto, uma antiimunoglobulina.
O Imuno-Látex FR é um teste bastante sensível, que utiliza partículas de látex revestidas com IgG humana altamente purificada, estabilizada e suspensa em tampão glicina pH 8,2.
Passo a passo 
Pipetar 25µl do soro do paciente em uma área do cartão-teste.
Homogeneizar a suspensão de látex (1) e pipetar 25µl na mesma área da amostra.
Misturar muito bem o soro com o látex, espalhando-se cuidadosamente com uma vareta plástica.
Através de movimentos suaves de rotação, sob uma boa fonte de luz, observar durante 2 minutos a formação de uma eventual aglutinação
LÂMINAS