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FASB – Faculdade do Sul da Bahia Relatório de Aula Prática – Contagem de Hemácias Teixeira de Freitas 2014 Islan Damascena Gomes; Relatório de Aula Prática – Contagem de hemácias Trabalho apresentado à disciplina de Hematologia Clínica, do curso de Biomedicina da Faculdade do Sul da Bahia, sob a orientação do Professor Weslei G. Corrêa. Teixeira de Freitas 2014 Sumário 1 – Introdução ---------------------------------------------------------------------------------- 04 2 – Objetivos ----------------------------------------------------------------------------------- 04 3 – Materiais ------------------------------------------------------------------------------------ 05 4 – Procedimento ----------------------------------------------------------------------------- 05 5 – Observações e discussão ------------------------------------------------------------- 06 7 – Referências Bibliográficas ------------------------------------------------------------- 07 Objetivos Efetuar a contagem do n° de células eritrocitárias em Câmara de Neubauer Introdução A Câmara de Neubauer é usada para determinar a quantidade de células e outras estruturas em amostras, como sangue e urina. Possui uma lâmina grossa de vidro, com dimensões: 30 x 70 mm e 4 mm de espessura, sendo composta por duas câmaras (independentes), uma superior e uma inferior. Cada uma possui uma grade no centro, onde a contagem celular é realizada. A grade de contagem tem 3 mm x 3 mm de tamanho e é subdividida em nove quadrantes de 1 mm x 1mm. No caso de contagem hematológica, os leucócitos são contados nos quatro quadrantes laterais e as hemácias no quadrante central. Na uroanálise, são utilizados os quatro quadrantes laterais, para contar leucócitos, hemácias e células epiteliais, além da análise qualitativa de cristais, bactérias e outras estruturas que porventura possam aparecer. Materiais Seringa, agulha, tubo para coleta com EDTA, garrote (ou torniquete), algodão, álcool 70%, caixa para descarte perfuro cortante, etc.) Solução diluidora para hemácias (soro fisiológico) Pipetas de 5ml Peras Pipetas automáticas de 20μL e ponteiras Câmaras de Neubauer Microscópios Procedimento - Em um tubo, foram pipetados 4ml de líquido diluidor e, posteriormente, pipetou-se 20μL de sangue (colhido com EDTA), transferindo para o tubo contendo líquido diluidor e lavando com este a pipeta. Logo após, esperou-se 5 minutos e homogeneizou. - Posteriormente, com o auxílio de uma pipeta automática, encheu os retículos da câmara de Neubauer, tendo o cuidado de homogeneizar antes da pipetagem, evitando o excesso de líquido e a formação de bolhas de ar. - Logo após, levou-se a câmara de Neubauer ao microscópio para efetuar a contagem com o aumento de 40x usando o retículo central da câmara. Leu os retículos numerados de 1 a 5 e somou-se as parcelas. Observações e discussão Após realizada a diluição de 1:200, foram feitas as análises e contagem de hemácias pelo método hemocitômetro (5 retículos), obtendo-se os seguintes resultados: 1° retículo: 78 hemácias 2° retículo: 117 hemácias 3° retículo: 96 hemácias 4° retículo: 84 hemácias 5° retículo: 115 hemácias Total: 490 x 10.000 = 4.900.000 p/mm3 Neste caso portanto, percebe-se que o quantitativo médio de hemácias se encontra dentro da normalidade, considerando-se os valores de referência de eritrócitos: 3.800.000 a 5.200.000 p/mm3. Porém é interessante destacar que a contagem em câmara de Neubauer oferece grande variabilidade de erro e dispêndio de tempo, portanto sempre que possível é preferível a contagem em aparelhos automatizados. Porque o fator de conversão é de 10.000? R: Este fator de diluição é utilizado pois: 1 ml = 1 cc, sendo referente a profundidade da câmara. Referências Bibliográficas - Aula prática no laboratório; - Material fornecido pelo professor; - Página de web: Conhecendo a Câmara de Neubauer: <http://www.biomedicinapadrao.com/2013/10/conhecendo-camara-de-neubauer.html< Acesso em: 24 abr. 2014 - Livro: - Failace,Renato et al. Hemograma manual de interpretação. 5° edição. Porto Alegre: Artmed, 2009.