Diálise- Questões

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Universidade Federal do Amazonas
Instituto de Ciências Biológicas
Departamento de Ciências Fisiológicas
Purificação de Moléculas
BEATRIZ MAGNANI BALZANA - 21853984
1)Explique o princípio da diálise!
2) Quais as aplicações possíveis para esta técnica?	
3) Diálise pode ser considerada uma técnica de purificação ou apenas de tratamento da amostra?
4) Observando as etapas de purificação na figura abaixo, em quais dela você sugere que podemos aplicar a diálise?
5) Considere que você possui uma mistura de 5 proteínas com diferentes massas moleculares. Proteína A (40 kDa), Proteína B (60 kDa), Proteína C (30 kDa), Proteína E (90 kDa) e Proteina F (30 kDa). Utilizando tubos de diálise, responda:
a) Se você deseja recuperar as proteínas A e B, qual o cutoff do tubo de diálise você consideraria para realizar a separação?
b) Como você separaria apenas a proteína E?
c) Como você separaria as proteínas B e E juntas?
d) Como você separaria apenas a proteína F?
6) Explique como ocorreu o experimento de diálise na aula prática que utilizou as moléculas glicose, iodo, amido. (Peça explicação aos colegas presentes).
7) Seria prático utilizar diálise na indústria que trabalha com volumes muito grande de amostras? Por quê?
8) Faça um comparativo entre a técnica de diálise e diafiltração (ultrafiltração)para dessalinização de amostras.
9) A sua amostra de proteína (40 kDa) está em um tampão com 500 mM de NaCl e você deseja fazer a dessalinização da amostras a partir da troca de tampão utilizando diálise contra água. No laboratório há disponível tubo de diálise de 35.000 u para realizar o experimento. Você faria o procedimento? Por quê?
10) Imagine que você conseguiu u preparado protéico puro e deseja concentrar lançando mão da técnica de diálise, como você poderia proceder?
RESPOSTAS