Resumo - Cromatografia Líquida

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Resumo - Cromatografia Líquida 
 Processo que pode ser dividido em: Cromatografia Líquida Clássica e Cromatografia 
 Líquida de Alta Eficiência (CLAE) . 
 A cromatografia líquida clássica é realizada por meio de colunas de vidro, utilizando a 
 pressão atmosférica. O fluxo da fase móvel ocorre devido à força da gravidade. A 
 cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) é realizada por meio de colunas metálicas. 
 As pressões elevadas da fase móvel (empurram a fase móvel com maior pressão). 
 Processos realizados: Cromatografia líquida de alta pressão, cromatografia líquida de alta 
 velocidade, high perfomance liquid chromarography (HPLC) e cromatrografia líquida de alta 
 eficiência (CLAE). 
 O cromatograma indica a presença dos diferentes solutos no eluente em função do tempo 
 (ou volume). 
 A eficiência da purificação pode ser avaliada pelo grau de separação das moléculas: 
 Resolução cromatográfica 
 𝑅 
 𝑆 
=
 𝑡 
 𝑟 
· 𝐵 − 𝑡 
 𝑟 
· 𝐴 
 1 
 2 ( )·( 𝑊 𝑏𝐴 − 𝑊 𝑏𝐵 )
 Se, 
 R s < 1: Moléculas não estão separadas 
 R s = 1: Curvas se tocam nas bases (A e B) 
 R s > 1: Moléculas estão separadas (B e C) 
 A eficiência no isolamento de uma molécula (número de pratos teóricos (N)) 
 𝑁 = 5 , 54 ·
 𝑡 
 𝑟 
· 𝐵 
 𝑊 
 1/2 
( ) 2 
 Quanto maior o valor de N, maior será a resolução do processo realizado. A comparação 
 entre diferentes colunas e diferentes condições de cromatografia, na separação de uma 
 determinada molécula, pode ser avaliada pelo valor de N . 
 A eluição isocrática é o processo em que se utiliza apenas uma fase móvel e a eluição 
 por gradiente , é o processo em que se utilizam muitas fases móveis. A especificação da 
 coluna é fundamental no desenvolvimento de um método. As colunas que suportam mais 
 material por injeção são as com maior capacidade e o custo das colunas aumentam com o 
 tamanho delas. Os detectores também são muito importantes para realização do processo, 
 possuem alto valor de mercado e mede de forma contínua alguma propriedade física ou 
 físico-química da amostra e envia um sinal para registro (proporcional à concentração do 
 componente), podem ser destrutivos ou não destrutivos. Os detectores podem ser 
 baseados na fluorescência, espalhamento de luz, índice de refração, espectro de massas 
 (possui alta eficiência, mas destrói a amostra).