Agar citrato Simmons

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Microbiologia 
Animal Geral
Profª MV MARGARETE DEL 
BIANCHI
Agar Citrato Simmons
Jheniffer Sarti
Rebeca Salles
Agar Citrato Simmons
Willis Simmons
Reinhold Koser
1923
Meio de cultura liquido 
Sais inorgânicos Sal amônio era fonte de nitrogênio e 
o citrato era única fonte de carbono 
Escherichia coli e Enterobacter aenogenes. 
1926
Ágar a 1,5% e Azul de bromotinol
Metaboliza todo citrato possível.
Finalidade
O ágar citrato é utilizado na identificação de
bactérias, principalmente as enterobactérias,
que o utilizam como fonte de carbono.
Princípio da Ação 
Quando as bactérias metabolizam o citrato,
alcalinizam o meio. O pH básico faz com que
o meio, antes verde, fique azul, devido ao
indicador azul de bromotimol.
NEGATIVO
POSITIVO
COMPOSIÇÃO G/L
Fosfato de amónio
fonte de azoto
1,0 g/L 
Hidrogenofosfato de potássico
agente tamponante do pH
1,0 g/L 
Cloreto de Sódio 
balanço osmótico
5,0 g/L 
Citrato de Sódio 
fonte de carbono
2,5 g/L
Sulfato de Magnésio 
cofactor para uma variedade de reações metabólicas
0,2 g/L 
Azul de Bromotimol 
indicador de pH
0,08 g/L 
Ágar 
agente gelificante
15,0 g/L
Água Destilada q.s.p. (Quantidade Suficiente Para)
pH final 6,8 ± 0,2 á 25ºC
Descarte
• Não descartar em esgotos ou lixos domésticos. O produto deve ser tratado
conforme as regulações oficiais administrativas. Soluções em excesso e não
recicláveis destinar para empresa responsável. As embalagens contaminadas
devem ser eliminadas como produto não utilizado.
• Registro ANVISA: Produto não passível de registro e/ou cadastro.
Estes resíduos não podem deixar a
unidade geradora sem tratamento prévio.
Devem ser inicialmente acondicionados
de maneira compatível com o processo
de tratamento a ser utilizado.
MODO DE PREPARO
• Materiais utilizados
1. Agar Citrato 
Simmons
2. Erlenmeyer
3. Proveta
4. Becker 
5. Espátula
6. Tubo de ensaio
7. Copinho 
descartável
1
2
34
5
6
7
MODO DE PREPARO
Suspenda 24,3 g 100 ml água destilada Misture e aqueça e agite para
homogenizar
Dispense nos tubos de ensaio autoclave a 121°C por 15 minutos.Embalar os tubos e colocar
Fita de autoclave
Após a autoclave, deixe o meio solidificar
em uma posição inclinada.
Meio já solidificado .
INOCULAÇÃO
• Com o auxílio de um fio bacteriológico, inocular na superfície a colônia, não
furar a base
• Incubada a seguir a 35ºC por 18-24h.
• Terminada a incubação, é realizada a leitura do tubo.
INTERPRETAÇÃO
Cor original do meio: verde
Positivo: cor azul ou crescimento no local do inóculo.
Negativo: não há crescimento e a cor permanece inalterada.
Se houver crescimento visual na área do inóculo sem mudança de cor, o teste pode ser
considerado positivo,
reincubar de 24 até 72 horas, a incubação poderá mudar a cor do meio para alcalino (azul)
Leitura inicial com 24 horas: Se resultado positivo: encerrar o teste. 
Se resultado negativo ou houver dúvida: reincubar por mais 24/48 horas. 
MICROORGANIS
MO
ATCC CRESCIMENTO REAÇÕES
Escherichia coli 25922 INIBIDO -
Enterobacter
aerogenes
13048 CRESCIMENTO BOM AZUL
Salmonella 
typhimuriums
14028 CRESCIMENTO BOM AZUL
Salmonella typhi 6539 CRESCIMENTO BOM VERDE
Shigella flexneri 12022 INIBIÇÃO PARCIAL A TOTAL VERDE
CONTROLE E QUALIDADE
INTERPRETAÇÃO
Escherichia coli são citrato negativo.(-)
Enterobacter aerogenes são citrato positivo(+)
1. Contole
2. Escherichia coli
3. Enterobacter aerogenes
4. Salmonella Typhimuriums
5. Salmonella Typhi
6. Salmonella Enteretidis
OBRIGADO!
Os benefícios da ciência não são para os 
cientistas, e sim para humanidade!
Louis Pasteur
https://www.pensador.com/autor/louis_pasteur/