relatório Diluição seriada

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IBMR
BIOMEDICINA
ANÁLISES CLÍNICAS 1
TATIANE BARBOSA DE SANTANA
RELATÓRIO 1
 RIO DE JANEIRO
 2020
TATIANE BARBOSA DE SANTANA
RELATÓRIO 1
Relatório da aula de análises clínicas 1 no dia 03 de março de 2020.
RIO DE JANEIRO
2020
Diluição seriada
Resumo
A diluição seriada é a técnica que permite a contagem do número de microrganismos de amostras com concentrações muito elevadas. Considerando-se que cada colônia de bactérias formada sobre um meio de cultivo se origine de uma unidade formadora de colônia (cadeia ou grumo de bactéria), quando a concentração de microrganismos inoculados é muito grande, haverá o crescimento de colônias de maneira sobreposta impossibilitando a contagem.
 A amostra deve então ser diluída seriadamente para que a concentração de microrganismos diminua, dando origem a colônias suficientemente separadas, possibilitando assim a contagem. Para a determinação do número de microrganismos da amostra original multiplica-se o número de colônias formadas a partir da amostra diluída, pelo volume de diluição.
Sumário
· Introdução...........................................................................................................5	
· Calculo.................................................................................................................6
· Materiais e Pop....................................................................................................7
· Resultados e Discussão.....................................................................................8
· Resultados...........................................................................................................8
· Discussão............................................................................................................	9
· Conclusão............................................................................................................9
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1 Introdução
Uma diluição seriada é uma técnica na qual se realizam várias diluições progressivas. Inicia com a solução mais concentrada chegando a soluções menos concentradas, amplificando o fator de diluição rapidamente.
Diluições em série são usadas para criar com precisão soluções extremamente diluídas, bem como soluções para experimentos que exigem uma curva de concentração com uma escala exponencial ou logarítmica.
A técnica é útil quando há escassez do volume do concentrado ou do diluente, havendo necessidade de minimizar seu uso, ou quando há necessidade de diversas diluições, por exemplo, na determinação de um título ou na contagem de microrganismos.
EXEMPLO:
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Estrutura
Soluto estoque: 1 ug/ml
 Curva:
 100 ng/ml
50 ng/ml
25 ng/ml
12,5 ng/ml
Volume final: 2 ml
Formula:
 CI.VI = CF.VF
 CI= 1000 ng/ml
VI=?
CF=100ng/ml
VF=2 ml
1000.VI=100.2
VI=200/1000= 0,2ng/ml
0, 2.1000= 200 mililitros de permanganato.
VF= 2ml = 2000 mililitros
2000-200=1800 de H2O.
O primeiro tubo irá zerar com está quantidade dobramos a concentração e no final descartamos 2 ml ou 2000 mililitros. /
Então ficamos com:
400 mililitros de permanganato
3600 mililitros de H2O no primeiro tubo.
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Materiais e Pop
Materiais
H2O
Permanganato
Tubo
Becker
Pipeta
Ponteira
POP
Fazer uma diluição seriada com a solução estoque 1ug/ml.
Curva:
100ng/ml
50ng/ml
25ng/ml
12,5ng/ml
6,25ng/ml
1- Adicionar 3600 mililitros de água em um primeiro tubo e 2000 mililitros de água em outros 4 tubos.
2- Adicionar no primeiro tubo 400 mililitros de permanganato de potássio
3- Homogeneizar a solução.
4- Utilizando o primeiro tubo, deve-se pipetar 2000 mililitros da solução em um novo tubo com 2000 mililitros de H2O.
5- Homogeneizar a solução.
6- Utilizando o tubo anterior, deve-se pipetar 2000 mililitros de solução em um novo tubo com 2000 mililitros de H2O.
7- Homogeneizar a solução.
8- Utilizando o tubo anterior, deve-se pipetar 2000 mililitros de solução em um novo tubo com 2000 mililitros de H2O.
9- Homogeneizar a solução.
10- Utilizando o tubo anterior, deve-se pipetar 2000 mililitros de solução em um novo tubo com 2000 mililitros de H2O.
11- Homogeneizar a solução.
12- No último tubo deve-se pipetar 2000 mililitros da solução e despreza-lo.
13- Assim todos os tubos ficam com 2 ml ou 2000 mililitros.
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Resultados e Discussão
Resultados
Na imagem é possível observar o degrade de cores.
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Discussão
Por ter o degrade nas soluções é possível afirmar que a precisão nas soluções extremamente diluídas, bem como soluções para experimentos que exigem uma curva de concentração com uma escala exponencial ou logaritmo.
Conclusão
A realização da pratica mostrou que é fundamental a compreensão dos conceitos de concentração e a realização de cálculos para preparação das soluções, a preparação dos tubos que no final fico com 2 ml cada e concentrações diferentes pode-se observar o degrade de cores.