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1. SINONÍMIA Espermocitograma. Espermometria. Seminograma. Kruger, T. F. = morfologia estrita. O espermograma pode ter três finalidades: 1 - Espermograma para avaliação de fertilidade. 2 - Espermograma pós-vasectomia # para avaliação de esterilidade. 3 - Espermograma para identificação de agentes infecciosos (espermocultura). # Espermograma para controle de cirurgia de reversão de vasectomia é espermograma para avaliação de fertilidade. 2. APLICABILIDADE Este procedimento deve ser executado apenas por profissional devidamente habilitado em Reprodução assistida (Médico ou Biomédico embriologista). 3. APLICAÇÃO CLÍNICA Estudo das propriedades físicas e químicas do sêmen, contagem de células e de espermatozóides de preferência em câmara de Makler, estudo de sua motilidade e morfologia. Contagem dos espermatozóides. Cultura em meios apropriados, identificação do microrganismo e antibiograma, se solicitado e Contagem de leucócitos no esperma. 4. PRINCÍPIO DO TESTE ASPECTOS FÍSICO-QUÍMICOS Deixar amostra liquefazer por 60 minutos em temperatura ambiente, Verificar o pH, com a fita especifica: Pingar uma ou duas gotas na fita reagente, aguarde alguns segundos e compare a coloração obtida com o valor da escala, disponível na caixa RA- POP - 001 ELABORADO: LUCINÉIA PEREIRA DA SILVA RIO 08/04/2020 MANHÃ ÀS 07:00H ESPERMOGRAMA COMPLETO LABORATÓRIO GÊNESIS ESPERMOGRAMA das fitinhas. Valores normais: 7,2 a 8,0, Transferir o sêmen para um tudo de cônico. Verificar o aspecto se a amostra esta homogênea. Verificar o volume: Valores normais: 2,0 a 5,0 mL Valores menores que 1 mL são insuficientes para análise. Verificar a viscosidade se está em forma de “gotejamento”. Verificar a cor: Cinza claro à branco opalescente, transformando em translucido após liquefação e Verificar odor. 5. AMOSTRA PACIENTE Caso o paciente apresente dificuldade para realizar o exame é recomendável fazê-la logo pela manhã antes de urinar. Antes da coleta, higienizar as mãos e pênis. MATERIAL COLHIDO EM CASA Deverá ser entregue ao laboratório em um período de no máximo 30 (trinta) minutos. Deverá tomar todo o cuidado para não contaminar o material e com o tempo a ser entregue. MATERIAL COLHIDO NO LABORATÓRIO Deverá ser feito pela forma de masturbação manual realizada pelo próprio paciente, em sala apropriada e adequada as necessidades do mesmo. A Amostra deve ser coletada por masturbação, em frasco limpo de vidro ou plástico e de boca larga. Precisa ejacular o total dentro do pote, pois será levado em consideração de toda coleta da amostra. O PACIENTE DEVERÁ Estar em abstinência sexual de no mínimo 5 dias, podendo variar de 2 a 7 dias. Identificar a amostra e informar o horário da coleta. CRITÉRIOS DE REJEIÇÃO DA AMOSTRA Volume insuficiente da amostra, amostra incorreta, erro na identificação da amostra e recipiente quebrado ou sem tampa. ARMAZENAMENTO E ESTABILIDADE DA AMOSTRA O recipiente deve ser de vidro transparente, incolor, com abertura suficiente grande, resistente e estar rigorosamente estéril. O material deverá ser incubado em estufa a 37º c para calculo do tempo de liquefação. TIPO DE AMOSTRA Líquido seminal, esperma ou sêmen. 6. REAGENTES E MATERIAIS REAGENTES Fita reativa para determinação do pH, Reagentes para coloração de Gram, solução salina para diluição, corante Eosina para verificação da vitalidade do espermatozoide e reagentes de Leishman para o diferencial de leucócitos. MATERIAIS Tubo de ensaios e estantes; pipetas, ponteiras e peras; câmara de Neubauer, Lâminas e lamínulas; microscópio, frasco de vidro ou acrílico; espectofotômetro, banho-maria; materiais para cultura, estufa e capela. 7. PROCEDIMENTO /TÉCNICA ASPECTOS MICROSCÓPICOS Teste Hiposmotico (verifica a integridade celular da membrana da cauda do espermatozoide). *Pipetar 0,5 mL de solução hipoosmotica em um eppendorff, acrescentar 1 gota de sêmen e incubar a 37°C por 15 minutos. *Após passar os 15 minutos, pipetar 10 µL da solução, colocar em uma lamina e cobrir com uma lamínula e contar 100 espermatozoides, anotando a proporção de caudas retas e enroladas. *Teste de vitalidade (espermatozoides vivos não coram e mortos por terem sua membrana lesada coram-se de rosa). *Pipetar 0,5mL de eosina em um enppendorff, acrescentar uma gota de sêmen e incubar a 37ºC por 15 minutos. *Após os 15 minutos, pipetar 10 µL da solução, colocar em uma lâmina e cobrir com uma lamínula e contar 100 espermatozóides na objetiva 40x e verificar quantas estão coradas de rosa e quantas não estão coradas (utilizar o contador de células). 8. VALORES DE REFERÊNCIA PARAMETROS SEMINAIS EDIÇÃO (ANO DE PUBLICAÇÃO) 1º (1980) 2º (1987) 3º (1992) 4º (1999) 5º (2010) 1 Volume (mL) ---- ≥ 2,0 ≥ 2,0 ≥ 2,0 ≥ 1,5 Concentração (x10 6 POR mL) 20 -200 ≥ 20 ≥ 20 ≥ 20 15 Concentração Total ---- ≥ 40 ≥ 40 ≥ 40 39 Motilidade Total (%) ≥ 60 ≥ 50 ≥ 50 ≥ 50 40 Motilidade Progressiva 2 ≥ 2 3 ≥ 25% ≥ 25% (Grau A) ≥ 25% (Grau A) 32% (A+B) Vitalidade (% vivos) ---- ≥ 50 ≥ 75 ≥ 75 58 Morfologia (% normais) 80,5 ≥ 50 ≥ 30 4 ≥ 14 5 4 6 Leucócitos < 4,7 < 1,0 < 1,0 < 1,0 < 1,0 (x10 6 por mL) OBS. 1 Valores de referência correspondentes ao percentil 5, obtidos pela distribuição dos dados dos espermogramas de homens que engravidaram suas esposas num intervalo ≤ 12 meses; 2 grau a = motilidade progressiva rápida (> 25 µm por s); grau b = motilidade progressiva lenta (5 a 25 µm por s); 3 progressão para frente (escala 0 a 3); 4 valor arbitrário; 5 valor não definido, porém sugerido levando-se em consideração o critério estrito; 6 critério estrito de Tygerberg. (Adaptado de Esteves SC et al. Critical Appraisal of World Health Organization’s New Reference Values for Human Semen Characteristics and Effect on Diagnosis and Treatment of Subfertile Men. Urology. 2012;79(1):16-22.) 9. MODELO DO LAUDO PACIENTE: Mario Maia IDADE: 39 anos MÉDICO SOLICITANTE: Arthur Pereira MATERIAL COLETADO: Líquido Seminal DIA DA COLETA: 08/04/2020 HORÁRIO DA COLETA: 08:30h ESPERMOGRAMA MATERIAL: Líquido Seminal ABSTINÊNCIA SEXUAL: 7 dias VALORES DE REFERÊNCIA: 2 a 7 dias MACROSCOPIA VALORES DE REFERÊNCIA AMOSTRA VOLUME 2,0 -5,0 mL 2,5 mL ASPECTO APÓS LIQUEFAÇÃO Homogêneo Homogêneo CHEIRO “sui generis” “sui generis” COR opalescente opalescente VISCOSIDADE ≤ 1,0 cm 0,8 cm COAGULAÇÃO 5 a 30 min. 15 min. LIQUEFAÇÃO COMPLETA ≤ 30 min. 10 min. MICROSCOPIA VALORES DE REFERÊNCIA AMOSTRA CONCENTRAÇÃO DE SPTZ ≥ 20 X 106 sptz/ mL 100 X 106 sptz/ mL CONTAGEM TOTAL 800 X 106 sptz/ mL 880 X 106 sptz/ mL LEUCÓCITOS ≤ 1000/mm3 ≤ 500/mm3 HEMÁCIAS ≤ 1000/mm3 ≤ 300/mm3 CÉLULAS DA ESPERMATOGÊNESE ≤ 10% em 100 sptz 6,0 % VITALIDADE ≥ 60% 68% ESPERMATOZOIDES MÓVEIS ≥ 50 % 65% ESPERMATOZOIDES VIVOS ≥ 50 % 82% *PARECER FINAL: O material analisado não apresentou nenhuma alteração relevante. RESPONSÁVEL TÉCNICO: Lucinéia Pereira da Silva Rio de Janeiro, 08 de Abril de 2020. 10. BIBLIOGRAFIA androfert.com.br HTTP://biolider.com.br/meidas/imagens/00003037_ESPERMOGRAMA.pdf HTTPS://www.tuasaude.com/ www.docsity.com/pt/ dicionário.sensagent.com http://biolider.com.br/meidas/imagens/00003037_ESPERMOGRAMA.pdf https://www.tuasaude.com/ http://www.docsity.com/pt/
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