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Microbiologia Geral 1 1 Microbiologia é um ramo da Biologia que estuda os seres microscópicos nos seus mais variados aspectos morfologia, fisiologia, reprodução, genética, taxonomia e sua interação com outros seres e o ambiente. A microbiologia abrange ainda o estudo das aplicações industriais dos microrganismos – BIOTECNOLOGIA. 2 3 Importância das bactérias. Formas das células Arranjo das células Estrutura das células Características condicionadas por gene Plasmídios. Agentes causadoras e doenças Biotecnologia (industria, controlo microbiológico) Transformações na natureza Avanço da Bioquímica e Biologia Molecular 4 1 2 3 4 Microbiologia Geral 2 Formas e arranjos das células bacterianas 5 espiriloespirilo 6 7 Estrutura da célula bacteriana I – Apêndices Flagelo • Número variável • Facultativo • Composição química – flagelina (PTN) • Função – mobilidade Pili ou fimbrias • Geralmente nas Gram negativas • Numerosos • Podem estar ou não presentes • Pili sexual – 1 a 3 / cel. (maiores) Pili somático – menor e mais finos • Composição química – pilina (PTN) • Função – Somático – aderência • Sexual – Grande importância no transporte de genes 8 5 6 7 8 Microbiologia Geral 3 II – Envoltório celular Cápsula • Envoltório mais externo (nem todas as bactérias possuem) • Composição química – polissacarídica (homo ou heteropolissacarídica), polipeptídica... • Função – retenção de água, • material de reserva, • proteção contra fagocitose (aumenta a virulência), • aderência. 9 III – PAREDE BACTERIANA 10 Composição Gram negativa Gram positiva peptidioglicana - + Lipopolissacarideo + - Ác. Teicoico - + Lipídios + - Proteínas + - Sensibilidade a penicilina _ + 11 MEMBRANA CITOPLASMÁTICA Dupla camada de lipídios – fosfolipídios Existem apenas PTNs periféricas Composição química – PTN, lipídio e carboidratos Procariótica não possui esterol. A Eucariótica possui Função • Transporte • Respiração • Responsável pela replicação de DNA e RNA 12 9 10 11 12 Microbiologia Geral 4 ESTRUTURAS INTERNAS • Invaginações formadas a partir do citoplasma. • Mais encontradas nas G+ (bacillus) • Composição química – PTNs e Lipídios • Funções: Mesossomos • Orienta o DNA na divisão celular • Segregação dos cromossomos Mesossomas septais • Segregação de enzimas hidrolíticas e de PTNs envolvidas com os ribossomos. • Envolvido na formação dos esporos. Mesossomas laterais 13 INCLUSÕES CITOPLASMATICAS Grânulos de Lipídios – aparecem na célula como grãos que não se coram Grânulos de polissacarídeos Grânulos de polimetafosfato – serve como reserva de fósforo para a biossíntese e elementos que servem de fosfato) Grânulos de enxofre (S) – Bactérias sulfurosas (produção de energia) VII- ESPOROS São ovais ou esféricos Forma-se sob condições adversas (principalmente com o esgotamento de compostos C e N) Core: DNA, ribossomo, enzimas, dipicolinato de cálcio (esse não aparece em células vegetativas), 3P glicerato (fornece energia para o esporo). Membrana: Lipoptn Córtex: peptidioglicana Capa: PTN, muito rica em cistina e pontes S-S tornado a capa altamente rígida e impermeável. Exospório: PTN, Lipídio, açúcares (nem todo esporo possui Exospório) Função: resistência em condições ambientais adversas 15 1. Core 2. Membrana 3. Córtex 4. Capa Material genético 16 DNA extra cromossômico Circular, fita dupla. Número variado de cópias. Replicação semi-conservativa Unidirecional ou bilateral. Plasmídios de gde tnho. –1 a 2 cópias / cél. Plasmídios de pque tnho – 10 a 30 cópias / cél. 13 14 15 16 Microbiologia Geral 5 Características fenotípicas condicionadas por genes plasmídicos Fertilidade Produção de antibióticos Resistência a íons de metais pesados Resistência a U.V Resistência a drogas Produção de enterotoxinas – Ex: E. coli Utilização de carboidratos Degradação de hidrocarbonetos 17 18 NutriçãoNutrição 19 20 Macronutrientes base de todas as moléculas orgânicas compõem proteínas, ácidos nucléicos e peptideoglicano importante na composição de ácidos nucléicos e fosfolipídeos O2: Aceptor de elétrons da cadeia de transporte e regulador do metabolismo ativador de várias enzimas, tais como aquelas envolvidas na tradução estabilização de ribossomos, membranas e ácidos nucléicos e para o funcionamento de diferentes enzimas como aquelas envolvidas na transferência de fosfato tem papel na estabilização da parede celular e de termorresistência nos esporos, atividade enzimática microrganismos marinhos e certas archaea halófilas . Organismos marinhos – reflexo do habitat componente de proteínas e ácidos nucléicos, além de vitaminas e outros compostos celulares 17 18 19 20 Microbiologia Geral 6 21 •O processo de divisão celular envolve um conjunto de proteínas conhecidas como Fts (Filamentous temperature Sensitive) (Todos os Procaríotos e Archae, organelas - mitocondrias e cloroplastos). Tempo de geração Fatores genéticos Fatores Nutricionais Crescimento Bacteriano e Duplicação Celular 22 •Qual o problema de comer comida no self service • Pq a comida mantida fora do refrigerador estraga mais rápido Cada 30 min. tem mais 1 célula Cada 30 min. tem mais 2048 célula Crescimento Microbiano 23 •Tempo de geração: •Depende das condições do meio de cultura, pH, temperatura, oxigênio, etc •Em média 0.5-6h. Há casos que é menos de 20min e mais de uma semana Crescimento Exponencial 24 Ciclo de crescimento microbiano Populacional •Curva de crescimento de uma cultura em batelada (cultura em um sistema fechado) – estes conceitos de fase só se aplicam a populações de células e não a células individuais Quantidade de células capazes de se reproduzir 21 22 23 24 Microbiologia Geral 7 25 •Tempo pode ser curto ou longo depende: •Da origem do inóculo (as células tem “memória”) •As condições do meio de cultura atual •Exemplo: • Inóculo na fase exponencial não tem fase lag • Inóculo na fase estacionária tem fase lag Fase lag – Fase de adaptação 26 •Fase exponencial • Condições mais saudáveis • Neste estágio que se faz ensaios enzimáticos, expressão gênica e etc. •Fase estacionária • Taxa de crescimento é zero • Limitações dos nutrientes • Acumulo de produtos excretados pelos microrganismos – inibe o crescimento • Pode ocorrer divisão celular quando uma célula morre - Crescimento críptico • Metabolismo e processos biossintéticos podem estar ativos •Fase de Morte • Morte celular • Lise celular • Segue uma curva exponencial mais lenta que a de crescimento Fase exponencial e estacionária 27 Fatores que afetam o Crescimento microbiano • Estado Químico e Físico do Ambiente • Temperatura: psicrófilas, termófilas e mesófilas • pH • Quantidade de água • Oxigênio: bactérias aeróbias: estritas, microaerófilas, aerotolerantes e facultativas; bactérias aneróbias. • Outros fatores • Pressão • Radiação 28 Taxonomia bacteriana: • Algumas espécies estão relacionadas com outras. • Como escrever: • Gênero (1º letra maiúscula) • Espécie (minúscula) • Escrito em itálico ou sublinhado • EX.: Escherichia coli 25 26 27 28 Microbiologia Geral 8 ANTIBACTERIANOS DEFINIÇÕES E CARACTERÍSTICAS 29 Definições e características: Substância produzida por várias espécies de micro- organismos ( bactérias, fungos, actinomicetes) que impedem o crescimento de outros micro- organismos. Exceção: sintéticos, sulfonamidas e quinolonas. O conhecimento dos processos moleculares de replicações bacterianas permitiu o desenvolvimento racional de compostos que interferem no seu ciclo vital. 30 Mecanismo de ação: Inibem síntese da parede celular (bacteriostáticos): penicilinas, cefalosporinas, cicloserina, bacitracina, vancomicina (bacteriostáticos). Alteram permeabilidade da parede (bactericidas) : polimixina, nistatina, anfotericina B Afetam a síntese protéica (bacteriostáticos): : cloranfenicol, tetraciclina, eritromicina e clindamicina (bacteriostáticos). 31 Mecanismo de ação: Alteramsíntese protéica levando a morte celular(bactericidas).aminoglicosídeos Afetam o metabolismo dos ácidos nucleicos ( bactericidas ) : rifampicina e quinolonas. Bloqueiam enzimas essenciais do metabolismo dos folatos ( bactericidas ) : trimetoprim e sulfonamidas. 32 29 30 31 32 Microbiologia Geral 9 33 USO IRRACIONAL DE ANTIBIÓTICOS • infecções virais ( sarampo, catapora e 90% das infecções do trato respiratório superior ) • tratamento de estados febris de origem desconhecida, • dosagem ou frequência incorretas, • necessidade de outras condutas simultâneas, (ex. drenagens, remoções, etc.) , • falta de conhecimentos bacteriológicos. 34 SUSCEPTIBILIDADE / RESISTÊNCIA AOS ANTIBIÓTICOS Concentração do antibiótico no local da infecção deve ser suficiente para inibir o crescimento do micro- organismo agressor, e não ser tóxica ao hospedeiro. Quando as defesas do hospedeiro estão OK utiliza-se agentes bacteriostáticos. Defesas do hospedeiro diminuídas, requerem agentes bactericidas. Resistência Bacteriana: • Natural: todas as amostras da espécie são resistentes a uma determina classe de antibióticos. • Adquirida: ocorre por mecanismos genéticos diversos, tais como: produção de enzimas inativadoras, interferência com a entrada e acúmulo de droga na bactéria, alteração do receptor para ação da droga, via metabólica alternativa. 35 Principais micro-organismos de interesse médico Gram + e Gram - 36 33 34 35 36 Microbiologia Geral 10 Staphylococcus aureus • Cocos Gram-positivo, anaeróbios facultativos, sem flagelo, fermentadores de glicose, crescem bem a 37ºC. • Frequentemente encontrada na pele e nas fossas nasais de pessoas saudáveis 37 38 Doenças - Infecções cutâneas - Foliculite - Terçol - Furúnculos - Infecções de Feridas - Bacteremia - Endocardite aguda - Pneumonia - Osteomielite e Artrite Séptica - Intoxicação alimentar 39 Staphylococcus - teste da coagulase Coagulase + = S. aureus Coagulase - = outros Staphylococcus + - Prova da coagulase: Streptococcus pyogenes • Gram-positivas com morfologia de coco. • Elas causam uma variedade de doenças, desde uma faringite bacteriana comum até doenças mais graves como a escarlatina. 40 37 38 39 40 Microbiologia Geral 11 Doenças associadas: • Faringite: dos casos ocasionados por bactérias, 90% são devido às da espécie Streptococcus pyogenes. Após 2-4 dias de incubação, aparece subitamente febre, dores de garganta, mal-estar e dores de cabeça (cefaléia). • Escarlatina é uma complicação da faringite. Após 1-2 dias do aparecimento da faringite surgem eritemas (vermelhidão) no peito que se espalha mas não afeta a boca e as palmas das mãos. A língua é inicialmente amarela e depois vermelha-viva. • Fascite necrosante: mais conhecida como doença da "bactéria devoradora de carne" ("flesh eating bacteria"). Uma infecção profunda espalha-se a nível das fascias dos músculos esqueléticos. O tratamento não pode depender do antibiótico e é de emergência com cirurgia. A mortalidade ainda é de 50%. 41 Doenças associadas: • Celulite: infecção do tecido conjuntivo frouxo, profundamente ao tecido subcutâneo, com inflamação. • Erisipelas: infecção da pele com bolhas, vermelhidão e calor (eritema). • Impetigo ou pioderma: inflamação supurativa (com pus) com formação de pústulas, que se rompem deixando exposta a tela infradérmica e tornando a região suscetível a infecções secundárias. • Síndrome de choque tóxico: devida à disseminação no sangue, com febre, mal-estar e outros sintomas inespecíficos seguidos de hipotensão, choque séptico e insuficiência de múltiplos órgãos. A taxa de mortalidade é alta (chegando a até 50%). 42 Complicações: • Febre reumática: é uma doença autoimune desencadeada em raros casos de infecção por S.pyogenes. Após resolução da doença infecciosa, há inflamação asséptica (sem micro-organismos) do coração (pancardite), articulações (artrite). Julga-se que a causa é a semelhança de alguns antígenos do S.pyogenes com moléculas presentes no coração e articulações. Após a resposta vigorosa contra a infecção pelo micro-organismo, o sistema imunitário ataca as próprias estruturas similares do individuo. Sendo importante o uso de antibióticos para resolver a situação inicial. • Glomerulonefrite pós-estreptocócica: danos renais causados pelos complexos de antígenos do S.pyogenes com anticorpos. 43 Streptococcus pneumoniae • Informalmente Pneumococo é uma espécie de bactérias Gram- positivas, pertencentes ao género Streptococcus, com forma de cocos que são uma das principais causas de pneumoniae meningite em adultos, e causam outras doenças no ser humano. 44 41 42 43 44 Microbiologia Geral 12 Doenças associadas: • Pneumonia: pneumonia lobar e broncopneumonia. Febres altas (39-41 °C), com tosse e expectoração amarela purulenta. Ocorre frequentemente após doença respiratória viral. A mortalidade é de 5%. • Meningite: infecção das meninges do cérebro que é uma emergência potencialmente fatal. O pneumococo é a principal causa de meningite em adultos. Inicio súbito de dores de cabeça, vômitos, sensibilidade à luz. O tratamento com antibióticos tem de ser instituído pouco depois do inicio dos sintomas ou a morte torna-se inevitável. • Septicemia: invasão e multiplicação no sangue. Mortalidade muito elevada. Normalmente ocorre após multiplicação num órgão específico sem limitação efetiva. • Sinusite • Otite media • Osteomielite • Úlcera corneal • Artrite séptica • Endocardite • Abcessos cerebrais 45 Streptococcus agalactiae • Podem colonizar o trato genital feminino. É um cocos Gram-positivo, anaeróbio facultativo. 46 Doenças associadas: • Endometrite • Choque séptico • Febre Puerperal • Infecções no recém nascido, adquirida no útero, septicemia e meningite. • Infecções tardias depois que o recém-nascido sai do hospital. 47 Clostridium ssp • Clostridium é um gênero de bactérias Gram-positivas, têm a forma de bastonetes, as espécies de Clostridium são anaeróbios estritos e aerotolerantes. • Mais importantes espécies do gênero: • Clostridium tetani - tétano • Clostridium botulinum - botulismo • Clostridium perfringens - gangrena gasosa e intoxicação alimentar. 48 45 46 47 48 Microbiologia Geral 13 Mycobacterium ssp • Mycobacterium ou micobactéria é um gênero de actinobactérias bacilares, aeróbicas obrigatórias, imóveis e altamente patogênicas, que causam diversas doenças. • Microorganismo intracelulares, que infectam e proliferam-se dentro de macrófagos. • Espécies mais prevalentes: • Mycobacterium tuberculosis: Tuberculose humana • Mycobacterium bovis: Tuberculose humana/bovina • Mycobacterium leprae: Hanseníase 49 Neisseria meningitidis • Meningococo são bactérias cocos Gram-negativo, imóveis e aeróbias que se agrupam aos pares, formando diplococos. São de grande importância clínica pois causam meningite meningocócica, uma grave inflamação das membranas que envolvem o cérebro. 50 Neisseria gonorrhoeae • Gonococo é um diplococo gram-negativo, não flagelado, não formador de esporos, aeróbio ou facultativamente anaeróbio que habita o trato geniturinário do homem, sendo responsável pela gonorreia – doença sexualmente transmissível. 51 Salmonella ssp • Salmonella é um gênero de bactérias, vulgarmente chamadas salmonelas, pertencente à família Enterobacteriaceae, sendo conhecida há mais de um século. Tem, em seu nome, uma referência ao cientista estadunidense chamado Daniel Elmer Salmon, que associou a doença à bactéria pela primeira vez. • São bactérias gram-negativas, em forma de bacilo, na sua maioria móveis (com flagelos), não esporuladas e não capsuladas. • Destacam-se a Salmonella typhi e Salmonella Typhimurium. 52 49 50 51 52 Microbiologia Geral 14 Escherichia coli • Escherichia coli, é uma bactéria bacilar Gram-negativa que se encontra normalmente no trato gastrointestinal inferior dos organismos de sangue quente. • Pode estar envolvida em infecções humanas e intoxicações alimentares. 53 Vibrio cholerae • O Vibrio cholerae, também conhecido comovibrião colérico, é o agente causador da cólera. Esta bactéria é membro do gênero Vibrio, da família Vibrionaceae. Foi descoberto em 1883 por Robert Koch, e deve seu nome à sua aparência quando observado ao microscópio óptico. 54 53 54
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