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FCNAUP Licenciatura em Ciências da Nutrição Teste bioquímico de Voges-Proskauer Microbiologia Básica Fundamentos da prova O teste de Voges-Proskauer (VP) deteta a via fermentativa butanodióica, fermentando a glicose para produzir acetilmetilcarbinol (acetoína), butilenoglicol e ácidos carboxílicos em pequenas quantidades. A prova é realizada no meio MR-VP (Methyl Red, Voges-Proskauer). Glicose Ácido pirúvico Fermentação via Butilenoglicólica Acetoína + KHO + O2 Diacetil + alfa-naftolAnel vermelho NOTA: A presença de um anel vermelho é indicativo de teste positivo, isto é, ocorre fermentação para produzir acetoína. Procedimentos laboratoriais Recorrer a técnica asséptica para inocular bactérias num tubo de caldo estéril de MRVP; Incubar na estufa a 37℃ (24 horas); Juntar às preparações o reagente 10 gotas de reagente A de Barritt (solução de hidróxido de potássio – KHO – a 40%) e noutro adicionar 10 gotas de reagente B de Barritt (alfa-naftol). Resultados do teste: VP Positivo (A): cor avermelhada na superfície do tubo (indica presença de acetoína) Com a adição de KHO na presença do O2 atmosférico, a acetoína converte-se em diacetil. O ácido pirúvico é metabolizado em acetoína. Esta, na presença de 40% de KHO e O2 atmosférico é convertida em diacetil, que quando misturado com alfa-naftol origina a cor avermelhada. VP Negativo (B): cor amarelada na superfície do tubo O ácido pirúvico não é metabolizado pela via de fermentação com 2,3-butaediol. Aplicações práticas Ajuda a diferenciar géneros VP Positivo (+) VP Negativo (-) Klebsiella pneumoniae subsp. Pneumoniae e Enterobacter aerogenes E. Coli Staphylococcus Micrococcus Ajuda a diferenciar espécies Klebsiella pneumoniae subsp. Pneumoniae e Enterobacter K. Pneumoniae subsp. Ozaenae K. subsp rhinoscleromatis pneumoniae Aeromonas hydrophilia e Aeromonas salmonicida subsp. Masoucida, Aeromonas veronii Outras Aeromonas spp. (-) Proteus vulgaris O teste de Voges-Proskauer (VP) permite determinar a capacidade de microrganismos oxidarem a glicose com produção e estabilização de altas concentrações de produtos finais ácidos. Na tabela que se segue estão indicados os géneros e as espécies de microrganismos VP positivo e VP negativo. Teste bioquímico de Voges-Proskauer Microbiologia Básica Barritt, M. M. (1936). The intensification of the Voges-Proskauer reaction by the addition of α-naphthol. The Journal of Pathology and Bacteriology, 42(2), 441-454. McDevitt, Sylvia. "Methyl Red and Voges-Proskauer Test Protocols." American Society for Mirobiology (2009).
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