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Microbiota Intestinal e Exercício Físico (Parte I) Dra. Renata Juliana da Silva Art Credit: https://ocmoneymanagers.com/putting-a-price-tag-on-your-health/ Profª. Dra. Renata Juliana da Silva Doutora e Mestre em Ciências Morfofuncionais – ICB/USP; Especialista em Fisiologia e Metabolismo Aplicados à Nutrição e Atividade Física – ICB/USP; Bacharel em Nutrição – USJT / CRN-3: 24411; Técnica em Nutrição e Dietética pela ETEC Getúlio Vargas; Coordenadora do Curso Técnico Integrado ao Ensino Médio (ETIM) em Nutrição e Dietética – ETEC Uirapuru; Docente do Centro Paula Souza (Técnico em Nutrição e Dietética; Técnico em Cozinha ênfase em Gastronomia); Docente de cursos de Pós-Graduação; Membro da Comissão Técnico Científica da APAN (2020-2023). Aula 1 – Conceitos importantes. Aula 2 – Caracterização de indivíduos fisicamente ativos e influência na microbiota intestinal em esportistas. Aula 3 – Influência na microbiota intestinal em atletas. Aula 4 – Mecanismos de ação, potenciais terapias e perspectivas futuras. Descrever conceitos importantes sobre microbiota intestinal e exercício físico. Identificar os aspectos gerais da microbiota intestinal. (funções, fatores que influenciam, interação com exercício físico) OBJETIVOS: Ø Fornece uma base para entender como o genoma humano se relaciona (saúde e doença); Ø No entanto, o número de células microbianas é 10 vezes mais do que células humanas em um ser humano!! MICROBIOMA HUMANO 1.000,000 + genes Genoma humano 23,000 genes HMP CONSORTIUM, 2012 Muitas diferenças FENOTÍPICAS DOS SERES HUMANOS podem ser decorrentes de PARTICULARIDADES DA MICROBIOTA e não do genoma humano. Obesidade: identificada em 90% das vezes quando analisado MICROBIOMA FECAL e apenas 58% quando analisado o GENOMA HUMANO!! BIOL PHILOS (2013) 28:241–259; PHYSIOL REV. 2019 Oct 1;99(4):1877-2013 NAT REV MICROBIOL. 2011 Apr;9(4):279-90; NAT REV IMMUNOL. 2014 Dec;14(12):827-35; PHYSIOL REV. 2019 Oct 1;99(4):1877-2013. 80% 70 a 75% Bacteroidetes e Firmicutes METABÓLICAS/NUTRICIONAIS: ü Produção de AGCC; ü Síntese de vitamina K e B12; IMUNOMODULADORAS: ü Ativação do sistema imune e modulação das vias inflamatórias; ü Estímulo sistema imune inato e adaptativo; ü Modulação da inflamação via TLRs. ANTIMICROBIANAS: ü Competição por sítio de adesão ou por nutrientes essenciais; ü Produção de bacteriocinas; ü Fortalecimento da barreira intestinal (espessura do muco e tight junctions); ü Equilíbrio de microrganismos patogênicos e não-patogênicos. BIOLOGICS. 2011; 5: 71–86 NEUROGASTROENTEROL MOTILITY 2013; 25:4-15 PHYSIOL REV 99: 1877–2013, 2019. Adaptado de: FRONT CELL INFECT MICROBIOL. 2012 Aug 9;2:104. MUDANÇAS NO MICROBIOMA INTESTINAL AO LONGO DO CICLO DE VIDA Firmicutes Verrucomicrobiota Actinobacteria Bacteroidetes Proteobacteria Outros Composição da Microbiota INFÂNCIA JOVEM ADULTO SAUDÁVEL ATLETA DE ELITE IDOSO SAUDÁVEL IDOSO FRÁGIL GENÉTICA NASCIMENTO ANTIBIÍTICOS NUTRIÇÃO GEOGRAFIA HIGIENE ESTRESSE MEDICAMENTOS Doença Estabilidade e complexidade do Microbioma NASCIMENTO 3 anos ADULTO IDOSO PERTURBAÇÃO PERTURBAÇÃO DOENÇAS, INFECÇÕES ACTA MEDICA 2018; 49(2): 31-37 Previsão para 2022: R$2,5 bilhões PHYSIOL REV 99: 1877–2013, 2019. CBE - LIFE SCIENCES EDUCATION Vol. 6, 260–265, Winter 2007 • Avanços nas tecnologias de sequenciamento de DNA criaram um novo campo de pesquisa!! • Examina a coleção de genomas derivados de comunidades microbianas amostradas em ambientes naturais. Testes sorológicos Morfologia da colônia Testes químicos MICROB INFORM Exp. 2012; 2: 3. Taxonomia • Somente uma pequena fração (~ <1%) da diversidade bacteriana existente na Terra pode ser cultivada em laboratório; • Não conhecemos a diversidade microbiana!! • Inexistência da avaliação da função microbiana! Por que? • As condições ideais para sua sobrevivência não é conhecida. Abordagens dependentes de cultivo Cultivo de bactérias em meio sólido MICROB INFORM Exp. 2012; 2: 3. TR EN D S G EN ET . 2 01 3 Ja n; 2 9( 1) : 5 1– 58 . O termo Metagenômica foi usado primeiramente em 1998 por Jo Handelsman (Universidade de Wiscosin – EUA) CHEM BIOL. 1998 Oct;5(10):R245-9. • Campo relativamente novo de pesquisa genética; • Permite estudos de organismos que não são facilmente cultivados em laboratório; • Bem como estudos de organismos em seu ambiente natural. MICROB INFORM Exp. 2012; 2: 3. Combina o poder da genômica, bioinformática e biologia de sistemas. Estudo dos genomas de muitos organismos simultaneamente. Conexões genômicas entre função e filogenia de organismos “não cultiváveis`` Novas hipóteses de funções microbianas!! Art Credit: Creative Commons NATURE REV. UROL. 12, 81–90 (2015) MICROBIOTA METAGENOMA MICROBIOMA Todos os microrganismos de um determinado ambiente. ex: microbiota intestinal. Conteúdo genômico de microrganismos de um determinado ambiente. O conjunto composto pelos microrganismos, seus genes e metabólitos e o ambiente/meio com o qual eles interagem. EXERCISE AND SPORT SCIENCES REVIEWS: April 2019 - Volume 47 - Issue 2 - p 75-85 MICROBIOTA METAGENOMA MICROBIOMA Geralmente usando sequenciamento do gene 16S rRNA Pode utilizar sequenciamento do gene 16S rRNA ou shotgun/ WGS Geralmente determinado por shotgun/WGS. Adaptado de: NATURE. 2010;464(7285):59–65. Maior diversidade biológica entre os representantes por categoria Maior semelhança entre os representantes por categoria Para facilitar a avaliação da diversidade pode ser realizada análise de comunidades bacterianas segundo o nível taxonômico: FILO = nível mais alto da classificação • Firmicutes (Bacilli, Clostridia) • Bacteroidetes (Bacteroides) • Actinobacteria (Bifidobacteriaceae) • Proteobacteria (Enterobacteriaceae) Classificação Taxonômica NATURE. 2010;464(7285):59–65. Adaptado de: PEDIATR INTEGRAL 2015; XIX (5): 337-354 FILO FIRMICUTES BACTEROIDETES BACTEROIDETES ACTINOBACTERIA CLASSE Clostridios Bacteroidia Bacteroidetes Actinobacteria ORDEM Clostridiales Bacteroidales Bacteroidales Bifidobacteriales FAMÍLIA Ruminococcaceae Bacteroidaceae Prevotellaceae Bifidobacteriaceae GÊNERO Ruminococcus Bacteroides Prevotella Bifidobacterium ANAERÓBIO/ AERÓBIO Anaerobios Anaerobios (Aerotolerantes) Anaerobios Anaerobios GRAM Positivo Negativo Negativo Positivo OUTRAS CARACTERÍSTICAS A esta espécie pertencem os: Lactobacillus: casei, paracasei, rhamnosus (aerotolerantes) Associados a dieta rica em gordura e proteínas. B. faecis, B. fragilis (envolvido na resistência a antibióticos), B. intestinalis, etc. Associados a dieta rica em vegetais e carboidratos, com pouca proteína e gordura B. bifidum, B. breve, B.infantis, B. lactis, B. longum, B. minimum, B. suis, B. thermacidophilum, B. thermophilum OBS.: MCGs aerotolerantes não utilizam o oxigênio para o crescimento, mas toleram sua presença. Identificaram 3 enterótipos: Bacteroides, Prevotella e Ruminococcus Clusters de bactérias da microbiota intestinal humana NATURE. 2011 May 12;473(7346):174-80. Adaptado de: PNAS 2005; Future Microbiol 2012 Magros Obesos População bacteriana entre indivíduos magros e obesos Obese individuals Lean individuals Firmicutes Firmicutes Bacteroidetes Bacteroidetes Actinobacteria Firmicutes Firmicutes Firmicutes Firmicutes Actinobacteria Proteobacteria Spirochaetes Euryarchaeota Bacteroidetes Firmicutes FILOS Proporção relativa entre magros e obesos. OBESOS MAGROS COMENSAIS SIMBIONTES PATOBIONTES SAÚDE COMENSAIS INFLAMAÇÃO NAT REV IMMUNOL. 2009May;9(5):313-23 Localização geográfica Genética EXERCÍCIO FÍSICO Estresse Antibióticos Idade Motilidade Gástrica Secreção Gástrica Dieta Nascimento (procedimento) Peptídeos antimicrobianos e IgA PHARMACOL REV 71:198–224, April 2019 Adaptado de: NUTRIENTS. 2015 APR 14;7(4):2839-49; FRONT PHYSIOL. 2017 MAY 19;8:319; JOURNAL OF SPORT AND HEALTH SCIENCE 6 (2017) 179–197 ↑↓ Atividade neural ↔ Fluxo sanguíneo ↑ Distribuição sanguínea ↕ Metabolismo Acetato Butirato Propionato ↑↑↑ Ventilação e trocas gasosas ↑↑↑ Fluxo sanguíneo ↑ Distribuição sanguínea? ↓ Apetite ↑ POMC ↓ AgRP ↑↑↑ Débito cardíaco ↑↑↑ Fluxo sanguíneo coronariano ↑↑↑ Consumo de oxigênio ↑ Distribuição sanguínea? ↑ Hematoconcentração ↑ Conteúdo de oxigênio ↔/↑ Substratos energéticos ↑↑↑ Dilatação arterial ↑↑ Pressão capilar e ↑↑ Troca de substrato energético ↑ Distribuição sanguínea ↑ Vasoconstrição ↑↑↑ Metabolismo e fluxo sanguíneo ↑↑↑ Extração e consumo de oxigênio ↑ Estresse oxidativo ↑ Biogênese mitocondrial (AMPK e PGC-1α), oxidação de AG ↑ Sensibilidade à insulina ↑ Lesão muscular ↑/↔ Fluxo sanguíneo ↑↑ Tensão mecânica ↑↑ Liberação de células-tronco ↑ Inflamação sistêmica e resposta imunológica PÂNCREAS, INTESTINO E RINS: ↓ Fluxo sanguíneo? ↑ Metabolismo? ↑ Permeabilidade intestinal ↑ GLP-1 e PYY ↑ Camada de muco intestinal FÍGADO: ↓ Fluxo sanguíneo ↑ Metabolismo? ↑ Gliconeogênese e oxidação de AG ↓ Síntese de colesterol TAB ↑/↔/↓ Fluxo sanguíneo ↑↑ Metabolismo ↑ Liberação de AG ↑ Leptina ↑ Produção de calor e desidratação ↑/↔/↓ Fluxo sanguíneo Metabolismo? TAM ↑ Oxidação de AG e síntese de leptina ↓ Lipogênese Controle eixo HPA Controle da resposta inflamatória ↑ TREG e IL-10 ↑ IgAs IMMUNOLOGY AND CELL BIOLOGY (2015) 00, 1–7.
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