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BIOQUÍMICA BÁSICA Moisés Maia Neto Farmacêutico UNIDADE II: PROTEÍNAS Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO CONCEITO UNIDADE II: PROTEÍNAS As proteínas são BIOMACROMOLÉCULAS (ou seja, moléculas de alto peso molecular que desempenham funções biológicas), formadas por uma ou mais subunidades protéicas (cadeia peptídica ou “fitas”). Cada subunidade é uma seqüência contínua de AMINOÁCIDOS (unidade monomérica fundamental das proteínas) ligados entre si através de LIGAÇÕES PEPTÍDICAS. C H F T P Alanina Glicina Valina Leucina Ligação Peptídica Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO FUNÇÃO UNIDADE II: PROTEÍNAS AS PROTEÍNAS SÃO CONSTITUINTES ESSENCIAIS DE ORGANISMOS VIVOS E DESEMPENHAM DIVERSAS FUNÇÕES: 1. Estrutural (Sustentação): Colágeno, Elastina,Tubulina... 2. Enzimática (Catálise): Hidrolases, Transferases, Liases... 3. De Transporte: Hemoglobina, Albumina, Glicoproteína P... 4. Receptora: Colinérgico (Ni e M1-3), Adrenérgico (α1-2 e β1-3), Opióide (μ, δ, κ) , Dopaminérgico (D1-5), Gabaérgico(GABAA-B), Serotoninérgico (5-HT1-7)... 5. Sinalização: Insulina, Leptina, FSH, IL-1, Neuropeptídio Y... 6. Contração: Actina, Miosina, Troponina, Tropomiosina... 7. Proteção (Imunidade): Imunoglobulinas (IgG, IgA, IgM, IgE) 8. Outras: Citocromos, Histonas, Angiotensinogênio... Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO Estrutura Geral: UNIDADE II: PROTEÍNAS Estereoquímica: AMINOÁCIDOS Cadeia Lateral Grupo AMINO Grupo ÁCIDO Carboxílico Levo (Esquerda) Dextro (Direita) Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO Classificação: UNIDADE II: PROTEÍNASAMINOÁCIDOS Cadeia Lateral Apolar Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Classificação: AMINOÁCIDOS Cadeia Polar Não Ionizada Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Classificação: AMINOÁCIDOS Cadeia Polar Básica (Positiva) Cadeia Polar Ácida (Negativa) Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Classificação: AMINOÁCIDOS Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Classificação: AMINOÁCIDOS AMINOÁCIDOS NÃO-PROTÉICOS: Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Cetogênicos Classificação: AMINOÁCIDOS Glicogênicos Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO A IONIZAÇÃO UNIDADE II: PROTEÍNAS ANFOTÉRICO E ISOELÉTRICO: ÁCIDO BASE Forma NÃO-IONIZADA Forma IONIZADA (Zwitteriônica) AMINOÁCIDOS Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO Zonas de Tamponamento Ionização de aminoácidos UNIDADE II: PROTEÍNAS AA de Cadeia Apolar Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Ionização de aminoácidos AA de Cadeia Polar Ácida Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Ionização de aminoácidos AA de Cadeia Polar Básica Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Ionização de aminoácidos Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Ionização de aminoácidos Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO A Ligação Peptídica UNIDADE II: PROTEÍNAS Ligação Peptídica Resíduo N-terminal Resíduo C-terminal PEPTÍDEOS E PROTEÍNAS Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Dipeptídeo Oligopeptídeos Polipeptídeos (MM >10.000) PROTEÍNAS PEPTÍDEOS E PROTEÍNAS Classificação: Pentapeptídio 1 ou mais Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO Peptídeos e Proteínas UNIDADE II: PROTEÍNAS EXEMPLOS Decapeptídio Octapeptídio Estrutura e Função Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS PEPTÍDEOS E PROTEÍNAS EXEMPLOS Ocitocina Vasopressina ou ADH Pontes Dissulfeto Estrutura e Função Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS PEPTÍDEOS E PROTEÍNAS EXEMPLOS α-Queratina Colágeno Estrutura e Função Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO Peptídeos e Proteínas UNIDADE II: PROTEÍNAS EXEMPLOSTamanho Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO Peptídeos e Proteínas UNIDADE II: PROTEÍNAS Determinação da Massa Molar Eletroforese Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO Peptídeos e Proteínas UNIDADE II: PROTEÍNAS FibrilaresGlobulares CLASSIFICAÇÃO DE PROTEÍNAS Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO Peptídeos e Proteínas UNIDADE II: PROTEÍNAS CLASSIFICAÇÃO DE PROTEÍNAS Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO Estrutura das Proteínas UNIDADE II: PROTEÍNAS Polimorfismos 20 – 30 % Estrutura 3D Função Única Desnaturação Primária Secundária Terciária Quaternária Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNASEstrutura das Proteínas α Hélice Folha β Pregueada Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNASEstrutura das Proteínas EXEMPLOS Álcool-Desidrogenase Etanol Ácd. AcéticoALC Acetaldeído ALD Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Mioglobina Hemoglobina Vírus da Poliomielite Vírus do Mosaico do Fumo Estrutura das Proteínas Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNASEstrutura das Proteínas Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas PATOLOGIAS ENVOLVIDAS COM O DOBRAMENTO INADEQUADO DE PROTEÍNAS Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Amiloidoses Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Alzheimer Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Alzheimer Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Alzheimer Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Doença do Príon Encefalopatias Espongiformes transmissíveis (TSEs) • Encefalopatia espongiforme bovina (BSE), Doença da vaca louca • Encefalopatia espongiforme felina (FSE) • Doença de Creutzfeldt-Jakob (CJD – Hereditária, esporádica e Transmissível) ou Kuru • Síndrome de Gerstmann-Sträussler-Scheinker (GSS) • Insônia familiar fatal (FFI) Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Doença do Príon Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Doença do Príon Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias α1 β1 β2 α2 Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO + 4O2 - 4O2 UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias Estado T - Tenso Desoxiemoglobina (Menor Afinidade por O2) Estado R - Relaxado Oxiemoglobina (Maior Afinidade por O2) Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias Anemia Falciforme Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias Anemia Falciforme Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias Anemia Falciforme Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias Anemia Falciforme Moisés Maia Neto -2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias Anemia Falciforme Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias Anemia Falciforme Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias Anemia Falciforme SINTOMAS: • EPISÓDIOS DOLOROSOS (CRISES) DURANTE TODA A VIDA; • ANEMIA HEMOLÍTICA CRÔNICA; • AUMENTO DA SUSCETIBILIDADE A INFECÇÕES; • SÍNDROME AGUDA DO PEITO; • AVC; • DISFUNÇÃO ESPLÊNICA E RENAL • VIDA MÉDIA DO ERITRÓCITO COM HbS É DE 20 DIAS; TRATAMENTO: • HIDRATAÇÃO, ANALGÉSICOS, ANTIBIÓTICOS, TRANSFUSÕES E HIDROXIURÉIA. Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias Anemia Falciforme VARIÁVEIS QUE AUMENTAM A INDUÇÃO DE HbS: • REDUÇÃO DA PRESSÃO DE O2 (ALTITUDE, VOO); • AUMENTO DA PRESSÃO DE CO2; • REDUÇÃO DO pH; • AUMENTO DA CONCENTRAÇÃO DE 2,3-BPG; Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias Hemoglobina C ANEMIA HEMOLÍTICA CRÔNICA SEM CRISES DE INFARTO E SEM NECESSIDADE DE TERAPIA Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias METEMOGLOBINEMIA Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias TALASSEMIA Cromossomo 16: 4 genes para α 1α : Portador silencioso; 2 α : Traço α-talassemia; 3 α : Doença da Hb H (4β) e de Bart (4γ); 4 α : Hidropsia fetal e Morte (HbF não formada); Cromossomo 11: 2 genes para β 1β : Talassemia Menor; 2 β : Talassemia Maior; Normais no Nascimento; Transfusões geram Hemossiderose Morte entre 15 e 25 anos Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Hemoglobinopatias TALASSEMIA Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNASPatologias das Proteínas Hemoglobinopatias Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Doenças do colágeno Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Doenças do colágeno Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Doenças do colágeno Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Patologias das Proteínas Doenças do colágeno Escorbuto Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Vamos exercitar? QUESTÃO 2: A respeito do aminoácido triptofano (estrutura ao lado) marque a(s) alternativa(s) corretas: a) Trata-se de um aminoácido de cadeia lateral polar não ionizável; b) É o aminoácido precursor do neurotransmissor serotonina; c) Está presente no chocolate e por ser precursor da Dopamina consideramos que pode levar a uma melhora do ânimo; d) Será encontrada no interior das proteínas visto tratar-se de AA com cadeia lateral hidrofóbica; e) Sabendo que seus valores de pKa são 2,4 e 9,4 podemos afirmar que ao fazer parte de uma enzima atuante no estômago (pH 2) estará na forma Zwiteriônica positiva e no pH fisiológico na forma isoelétrica; QUESTÃO 1: Podemos considerar como exemplo de uma unidade monomérica básica constituinte de proteínas: a) Adenina; b) Taurina; c) Xilose; d) Tiramina; e) Cisteína; Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Vamos exercitar? QUESTÃO 4: De acordo com a tabela de aminoácidos essenciais (slide 7) e o esquema representativo do ciclo do ácido cítrico (slide 9) podemos identificar como aminoácidos essenciais e que são, nesta ordem, exclusivamente glicogênico e exclusivamente cetogênico: a) Triptofano e Fenilalanina; b) Metionina e Glicina; c) Treonina e Isoleucina; d) Histidina e Asparagina; e) Valina e Lisina; QUESTÃO 3: Podemos considerar que o colágeno e a Amilase Pancreática desempenham, respectivamente, as funções protéicas relacionadas a: a) Sustentação e Armazenamento; b) Proteção e Transporte; c) Energética e de Imunidade; d) Estrutural e Enzimática; e) Contração e Energética; Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Vamos exercitar? QUESTÃO 6: Qual das alternativas descreve a gênese da Anemia Falciforme? a) A deficiência do ácido ascórbico impede a hidroxilação de resíduos prolina e lisina no filamento de colágeno reduzindo as ligações cruzadas e sua resistência; b) A troca de bases nitrogenadas leva a transcrição do aminoácido Valina em substituição ao ácido glutâmico mudando a estrutura terciária da proteína que forma filamentos intracelulares levando a hemácia ao formato de foice; c) Uma mutação do Cromossomo 11 leva a produção reduzida da subunidade β da Hemoglobina o que causará um desequilíbrio com a forma α e gera hemólise; d) Uma célula imune inicia a produção de cadeias leves de anticorpos defeituosa as quais se polimerizam levando a formação de filamentos insolúveis; e) A ação enzimática em uma proteína transmembrana neuronal irá gerar peptídios βA que se acumulam em placas que acabam levando a morte celular; QUESTÃO 5: Podemos citar com exemplo de uma Encefalopatia Espongiforme Transmissível (EET) e sua respectiva etiologia: a) Anemia Falciforme; b) Síndrome de Creuzfeldt-Jacob; c) Amiloidose; d) Talassemia; e) Alzheimer; Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Vamos exercitar? QUESTÃO 7: As patologias descritas nas outras quatro opções não marcadas na questão anterior correspondem a: ( ) ( ) ( ) ( ) QUESTÃO 8: Descreva de forma sucinta a importância fisiológica/ação dos peptídios/proteínas citados abaixo: a) Angiotensina II; b) Vasopressina ou ADH; c) Ocitocina; d) Actina; e) Interleucinas; f) Imunoglobulinas; g) TSH; a) Glicoproteína P; b) Leptina; c) Insulina; d) Prolactina; e) Anidrase Carbônica; f) beta-Endorfina; g) Fibrina Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Vamos exercitar? QUESTÃO 9: Podemos citar como fatores que induzem a formação de Hemoglobina S, exceto: a) Viagens aéreas não pressurizadas; b) Escalada de Picos de grande altitude; c) Acidose Respiratória e Acidose Metabólica; d) Elevação dos níveis de Bicarbonato sanguíneo; e) Aumento da concentração de 2,3-BPG; QUESTÃO 10: Dada ao lado a estrutura do adoçante Aspartame como podemos identificar que trata-se de um dipeptídeo esterificado: QUESTÃO 11: Explique, com base na estrutura primária, o resultado apresentado na eletroforese para as hemoglobinas do tipo: HbA, HbS e HbC. Faça a correspondência no desenho ao lado. + - Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Vamos exercitar? QUESTÃO 12: Dada a imagem ao lado, que corresponde ao exame por eletroforese das hemoglobinas coletadas em 5 pacientes, responda: a) Quais pacientes apresentaram resultado considerado compatível com a proporção normal de hemoglobinas? Explique. b) Algum paciente pode tratar-se de um neonato? Explique. c) Algum paciente apresentou resultado compatível com Diabetes Mellitus? Explique. d) Qual o Paciente com traço Falcêmico? Explique. e) Qual Paciente deve apresentar sintomas de Anemia Falciforme? Qual a alteração da hemoglobina e o mecanismo fisiopatológico envolvido? f) Qual paciente apresentaria resistência a infecção por Plasmodium Falciparum? Explique. g) Qual paciente apresenta o tipo de Hemoglobina que está relacionada a metemoglobinemia? Como ela é gerada? Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Vamos exercitar? QUESTÃO 13: Dê uma explicação para a prevalência seletiva da Anemia Falciforme apresentada no gráfico ao lado: QUESTÃO 14: O aparecimento da Hemoblobina H junto com a Hemoglobina de Bart será mais comum em qual tipo de Talassemia? Explique com base na constituição destas hemoblobinas. Moisés Maia Neto - 2014 Bioquímica– FAMETRO UNIDADE II: PROTEÍNAS Vamos exercitar? QUESTÃO 15:Com base no gráfico de saturação de O2 por pressão parcial de O2 fornecido ao lado, responda os itens que se seguem: a) A quais curvas poderíamos relacionar a afinidade da HbA, HbA na ausência de 2,3-BPG, HbM, Mioglobina e HbCO? Explique. b) O que ocorreria com a curva sigmóide B se a concentração de 2,3-BPG fosse elevada ao dobro do normal ou se o pH sanguíneo fosse reduzido para 7,2? Explique. c) Qual o estado predominante da Hb nos tecidos e Pulmões? Quais as diferenças de afinidade pelo O2 nestes estados? d) Cite dois aspectos que podem elevar a afinidade da Hb pelo O2 e dois que podem reduzi-la. e) A oxigenioterapia seria útil no tratamento da HbM? Explique. f) Nos tecidos ou nos Pulmões teríamos maior formação de HbS com consequente alteração da hemácia para a forma de foice? Explique.