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Estrutura do DNA- primaria, secundaria, terciaria; pareamento de bases; Regras de Chargaff; pareamento de bases DNA é uma molécula de dupla-fita que armazena a informação genética em todas as células. nucleotídeo consiste em uma base nitrogenada, um açúcar pentose e um grupo fosfato. -pentose (açúcar de cinco carbonos), denominada desoxirribose ou ribose, -grupo fosfato (ácido fosfórico). -bases nitrogenadas=adenina (A), timina (T), citosina (C), guanina (G) e uracila (U). Os nucleotídeos são denominados de acordo com sua base nitrogenada. Portanto, um nucleotídeo contendo timina é um nucleotídeo timina termo nucleosídeo se refere a uma combinação de purina ou pirimidina mais um açúcar pentose; ele não contém um grupo fosfato. Como os nucleotídeos estão ligados? Sua interação ocorre por ligações fosfodiéster, formando pontes de fosfato entre si. O grupo hidroxila do carbono-3 da pentose do primeiro nucleotídeo se une ao grupo fosfato ligado à hidroxila do carbono-5 da pentose do segundo nucleotídeo através da ligação fosfodiéster. Desta forma, os nucleotídeos se unem, constituindo uma fita de ácido desoxirribonucleico. Estrutura primaria= Sequência de Nucleotídeos A e G são estruturas de anel duplo, chamadas de purinas, ao passo que T, C e U são estruturas que apresentam um único anel, denominas pirimidinas Observe que a purina A é sempre pareada com a pirimidina T, e que a purina G é sempre pareada com a pirimidina C. Purinas e pirimidinas são compostos fracamente básicos; pirimidinas são moléculas planas, purinas como consequência do arranjo de seus orbitais são quase planas Estrutura secundária= Dupla hélice: estrutura de dupla hélice, e é resultado de ligações de hidrogênio. As duas fitas de DNA estão em direção opostas, isto significa que são anti-paralelas. O termo anti-paralelas deve-se ao fato de que uma das fitas tem a direção exata da sua síntese (5ʹ—3ʹ) enquanto que a outra está invertida (3ʹ—5ʹ). Pirimidina+pirimidina= muito estreito Purina+purina= muito largo Pirimidina+purina= compativel ==> o que cria isso? Ela é uma intereção fraco, uma ponte de hidrogenio Pareamento de bases: As bases têm os seus pares específicos para se parear As bases são mantidas juntas por ligações de hidrogênio; A e T são unidas por duas ligações de hidrogênio, e G e C são unidas por três. A dupla hélice é mantida unida por duas forças principais forças: a) Por pontes de hidrogênio formadas pelas bases complementares b) Por interações hidrofóbicas, que forçam as bases a se “esconderem” dentro da dupla hélice Como as pontes de hidrogênio não são ligações covalentes, podem ser quebradas e reunidas com relativa facilidade. A ligação de hidrogênio promove a forma e a estabilidade do DNA para proteger o código genético, mas também prevê a fácil ruptura(força mecânica ou altas temperaturas) das ligações (“Unzip”) através da ação de enzimas para a replicação do DNA. Como resultado desta complementariedade, toda a informação contida numa das cadeias de ADN está também contida na outra, o que é fundamental para a replicação do ADN. Estrutura Terciária: Compactação dos 2 filamentos de DNA junto das proteínas histonas= cromossomo enrolamento se faz em torno das histonas. O DNA pode formar superenrolamento para a direita (negativo) ou para a esquerda (positivo). O superenrolamento negativo comunica um “stress” torcional ao DNA que favorece separação das cadeias Sulcos as duas cadeias de nucleotídeos giram uma sobre a outra e acabam por formar sulcos entre as cadeias de fosfato, deixando expostas as faces das bases nitrogenadas que não estão unidas por pontes de hidrogênio com a base complementar. Há dois tipos de sulcos na superfície da dupla hélice: um com 22 Å denominado sulco maior e um com 12 Å designado de sulco menor. Função= sulcos do ADN é fornecer a informação acerca das bases que se encontram ligadas numa determinada região da dupla cadeia sem necessidade de abertura. O sulco maior oferece maior acessibilidade para ligação com proteínas do que o sulco menor. -Regras de Chargaff A----T G----C Regra da paridade 1 numa molécula de DNA: Percentual de A é sempre igual ao de T e de G igual a C Regra da paridade 2 numa fita da molécula de DNA: A é aproximadamente igual a T e G aproximadamente a C Cromatina: associação de histona(proteína) com DNA que formam o cromossomo= 46 cromossomos ou 23 pares= humanos · Eucromatina, que consiste em DNA ativo, ou seja, que pode-se expressar como proteínas e enzimas. · Heterocromatina, que consiste em DNA inativo e que parece ter funções estruturais durante o ciclo celular. Podem ainda distinguir-se dois tipos de heterocromatina: · Heterocromatina constitutiva, que nunca se expressa como proteínas e que se encontra localizada à volta do centrómero (contem geralmente sequências repetitivas); · Heterocromatina facultativa, que, por vezes, é transcrita em outros tipos celulares, consequentemente a sua quantidade varia dependendo da atividade transcricional da célula. Apresenta condensada na interfase. Aula prática (extração DNA da banana) 1. Qual é a função do detergente? 2. Qual é a função do sal? 3. Qual a importância da temperatura? 4. Qual é a função do liquidificador? 5. Para que filtrar o extrato? 6. Qual a função do álcool etílico?
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