Sequenciamento Genético

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Suyane Baldan
Amanda Silva
SEQUENCIAMENTO GÊNICO
Professora Crislene Barbosa
SUMÁRIO
Introdução...................................................................................................................................... 01 
Método de Sanger.......................................................................................................................... 02
DNA................................................................................................................................................ 03
Passa a passo................................................................................................................................ 04
Importância do sequenciamento gênico nos dias atuais................................................................ 07
Referências......................................................................................................................................08
INTRODUÇÃO
O primeiro método de sequenciamento de DNA surgiu em meados dos anos 70 e ficou conhecido como método químico ou Maxan-Gilbert. 
Alguns anos depois, em 1977, Frederick Sanger propõe um método diferente e mais eficiente chamado de método enzimático ou de Sanger. Esse método logo se tornou altamente replicável e é utilizado até nos dias de hoje
Técnica de sequenciamento Maxam-Gilbert os fragmentos de DNA clivados são corridos em eletroforese em gel e separados de acordo com seu tamanho. Os fragmentos de maior peso permanecem na parte superior do gel, enquanto os de menor peso se localizam na parte inferior. A leitura é feita de baixo para cima. 
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Método de Sanger
Frederick Sanger (1918-2013) foi um bioquímico inglês presentes na lista das únicas 5 pessoas agraciadas com dois prêmios. Seus dois prêmios foram em química, o segundo prêmio em 1980 foi vencido ao sequenciamento do genoma completo de um bacteriófago em 1977. 
A técnica desenvolvida por Sanger alterou para sempre a tecnologia de sequenciamento de DNA. Conhecida por técnica de terminação de cadeia ou didesoxi de Sanger, essa metodologia utiliza ddNTPs, análogos químicos dos desoxirribonucleotídeos (dNTPs), os monômeros das cadeias de DNA, misturando-os em uma reação de PCR
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DNA
O DNA (Ácido Desoxirribonucleico) é uma molécula presente no núcleo das células de todos os seres vivos e que carrega toda a informação genética de um organismo.
É formado por uma fita dupla em forma de espiral (dupla hélice), composta por nucleotídeos.
 
A molécula de DNA é constituída por três substâncias químicas:
Bases Nitrogenadas – Adenina (A), Timina (T), Citosina (C) e Guanina (G);
Pentose – Um açúcar que apresenta moléculas formadas por cinco átomos de carbono;
Fosfato – um radical de ácido fosfórico.
Os dois filamentos que constituem o DNA enrolam-se um sobre o outro e unem-se através de pontes de hidrogênio, que se formam entre as 4 bases nitrogenadas dos nucleotídeos:
A - Adenina;
T - Timina;
C - Citosina;
G - Guanina.
As pontes de hidrogênio são formadas entre os pares de bases: A-T e C-G. Adenina com Timina e Citosina com Guanina.
Todas as formas de vida do planeta, com exceção de alguns vírus, têm suas informações genéticas codificadas na sequência das bases nitrogenadas do DNA.
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Passo a passo do método de Sanger
Para sequenciar o DNA pelo método de Sanger, o DNA deve ser obtido em forma de cadeia simples.
Uma mistura contendo a fita simples de DNA, DNA polimerase, os 4 desoxirribonucleosídeos (A,T,C,G) e um curto e único primer é preparada 
O primer contém uma sequência de nucleotídeo que é complementar ao final da região 3’ a ser copiada e é requerido para que o DNA polimerase possa iniciar a replicação do DNA.
Quantidades idênticas dessa mistura de reação são colocadas em 4 tubos e um didesoxirribonucleosídeo é adicionado a cada tubo.
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Quando um desoxirribonucleosídeo é inserido na cadeia de crescimento, a replicação continua.
No entanto, quando um didesoxirribonucleosídeo é inserido, a síntese é terminada.
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Os produtos da reação em tubos são transferidos para 4 faixas de eletroforese gel e os oligonucleotídeos são separados por tamanho e por tipo de nucleotídeo.
Os oligonucleotídeos mais curtos movem- se mais para baixo no gel. A leitura debaixo para cima e de uma base por vez providencia o sequenciamento correto do dna.
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Importância do sequenciamento gênico nos dias atuais 
Hoje é possível, portanto, determinar mais rapidamente uma sequência completa de um genoma humano, diferente do período inicial do Projeto Genoma. Os pesquisadores agora são capazes de comparar grandes extensões de DNA (1 milhão de bases ou mais) de indivíduos diferentes, com mais agilidade.
Essas comparações podem gerar uma enorme quantidade de informações sobre o papel da herança na suscetibilidade a doenças e em resposta a influências ambientais. Abrem-se assim novas perspectivas para a medicina baseada nas características genéticas de cada indivíduo, criando um vasto potencial para diagnósticos e terapias.
Da mesma forma, é possível determinar todo o conjunto de microrganismos presente em um ambiente (microbioma) a partir do sequenciamento de todo o DNA ali encontrado
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Referências
 
Referencias
https://profissaobiotec.com.br/historia-do-sequenciamento-de-dna-ao-infinito-e-alem/
https://www.passeidireto.com/arquivo/28400809/metodo-de-sanger 
https://www.todamateria.com.br/dna/ 
https://www.biometrix.com.br/sequenciamento-dna-desvendando-codigo-da-vida/ 
https://medinireland.ie/irish-medtech-firm-altratech-secures-e5-2m-funding/stock-scientist-dna-app/
https://www.thetimes.co.uk/article/frederick-sanger-zvddn7zpnmv
 Imagens
https://epocanegocios.globo.com/Empresa/noticia/2020/09/epoca-negocios-usp-conclui-maior-sequenciamento-genetico-e-acha-2-milhoes-de-variantes.html
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