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exame parasitológico de fezes Diagnóstico Laboratorial Aplicado 9 * EPF: tem como objetivo diagnosticar os parasitos intestinais, por meio da pesquisa das diferentes formas parasitárias que são eliminadas nas fezes. Comparado com outros métodos, é barato, de fácil execução, não-invasivo, constituindo-se diagnóstico de certeza, o encontro de uma das formas do parasito nas fezes. Em contrapartida, o desempenho do microscopista e a escolha do(s) método(s) de exame de fezes executado(s) têm relação direta com a eficiência do exame. * Exame Macroscópico: avalia consistência das fezes, odor, presença de elementos anormais (como muco ou sangue), presença de vermes adultos ou partes deles (como proglotes de tenias). * Exame Microscópico: permite visualização dos ovos ou larvas de helmintos, cistos, trofozoítos ou oocistos de protozoários. · Método Quantitativo: pouco utilizados, sendo os mais conhecidos o de Stoll-Hausheer e o de Kato-Katz, sendo este o mais empregado. · Métodos Qualitativos: mais utilizados, demonstrando a presença de formas parasitárias, sem quantificá-las. * Processos de Enriquecimento da Amostra: utilizadas para concentrar as formas parasitárias eliminadas com as fezes, visto que muitas vezes o número de formas eliminadas é pequeno, além de eliminar detritos fecais a fim de facilitar a identificação morfológica. · Sedimentação Espontânea: método de Hoffman, Pons e Janer (ou Método de Lutz), permite o encontro de ovos e larvas de helmintos e de cistos de protozoários. · Sedimentação por Centrifugação: método de Blagg (ou de MIFC), método de Ritchie, Coprotest; usados na pesquisa de ovos e larvas de helmintos, cistos e alguns oocistos de protozoários. · Flutuação Espontânea: método de Willis, indicado para a pesquisa de ovos leves (principalmente de ancilostomídeos). · Centrífugo-Flutuação: método de Faust; usado na pesquisa de cistos e alguns oocistos de protozoários, permitindo também o encontro de ovos leves. · Concentração de Larvas de Helmintos por Migração Ativa, devido ao Hidrotropismo e Termotropismo Positivos: método de Baermann-Moraes e método de Rugai; indicados para a pesquisa de larvas de Strongyloides stercoralis. · Filtração em Tela Metálica ou de Náilon: método de Kato-Katz, concentra ovos de helmintos através da filtração por tela, que retém os detritos maiores e permite a passagem dos detritos menores e ovos, cuja visualização é facilitada pelo emprego de uma solução de verde malaquita. A preparação obtida não permite a visualização de cistos de protozoários, apesar destes passarem através da tela. * A fim de obter mais qualidade no EFP, deve-se ter em mente que: · Algumas espécies de parasitos só são evidenciadas por técnicas especiais; · Um exame isolado, onde o resultado é negativo, não deve ser conclusivo, sendo recomendável a sua repetição com outra amostra; · Produção de cistos, ovos ou larvas não é uniforme ao longo do dia ou do ciclo do parasito; · Solicitação correta contribui significativamente para a eficiência do EPF no diagnóstico das parasitoses intestinais. * Não existe um método capaz de diagnosticar, ao mesmo tempo, todas as formas parasitárias. · Recomenda-se minimamente a realização de um método mais geral (HPJ, por exemplo) e um método específico para pesquisa de larvas (Rugai, por exemplo). * Método de Graham (ou da Fita Adesiva): apesar de não ser uma técnica de EPF, é empregado no diagnóstico de E. vermicularis e Taenia sp, cujos ovos são encontrados frequentemente na região perianal e mais raramente nas fezes. coleta e conservação das fezes * Evacuação deve ser feita em recipiente limpo e seco e parte das fezes transferida para um frasco próprio, de boca larga, bem fechado e identificado. A identificação deve conter o nome do paciente, idade, data e, se possível, a hora da coleta. No caso de fezes frescas (sem conservador) a remessa para o laboratório deve ser imediata. * Quando solicitada pela clínica médica poderá ser feita a coleta de amostras múltiplas. O mais recomendado é a coleta de três amostras em dias alternados. Para isso o paciente recebe um frasco com o conservador, onde ele irá colocar, a cada dia, uma porção de fezes, homogeneizando-as. Finda a coleta, o frasco é enviado ao laboratório para a realização do EPF. * Quando não há possibilidade de remeter as fezes frescas rapidamente ao laboratório ou então examiná-las logo que cheguem, estas deverão ser mantidas a baixas temperaturas (5º a 10º C), para evitar a putrefação, devendo ser examinadas o mais rapidamente possível ou no máximo dois a três dias após a emissão. * As fezes poderão, também ser mantidas em conservadores, permitindo que o exame seja realizado semanas após a coleta. O ideal é que as fezes sejam colocadas no conservador logo após a evacuação. Para tanto, o paciente deve receber, do laboratório, o frasco contendo o conservador. Qualquer conservador deve ser usado na proporção de três partes deste para uma parte de fezes, sendo estas bem homogeneizadas. · Formol 10%: conserva por mais de um mês os ovos ou larvas de helmintos e os cistos e oocistos de protozoários. · MIF: mertiolato, iodo e formol. · SAF: fixador usado para conservar cistos e trofozoítos, sendo útil para fezes formadas e diarreicas. Trofozoítos de amebas e Giardia não são conservados pelos outros dois conservantes. métodos de análise do epf * Apesar da diversidade de métodos de EPF, os mais empregados são aqueles que permitem o diagnóstico de vários parasitos intestinais, são de fácil execução e pouco onerosos. exame direto a fresco * Baixa sensibilidade pois não utiliza um processo para a concentração das formas parasitárias, a quantidade de fezes empregada é muito pequena e o excesso de detritos pode mascarar as formas parasitárias. * Útil para a pesquisa de trofozoítos de protozoários em fezes diarreicas recém-emitidas (no máximo 30 minutos após). E aconselhável examinar, no mínimo, três lâminas de cada amostra. · Trofozoítos e Cistos são indistinguíveis * Lâmina + Solução Salina + Fezes + Lamínula Avaliação em objetivas de 10X e 40X. métodos de hoffman, pons e janer ou Método de lutz * Sedimentação espontânea, o que favorece a deposição das formas parasitárias. * Consiste basicamente na mistura das fezes com água, onde será filtrada por uma gaze cirúrgica e deixado em repouso, formando uma consistente sedimentação. método de faust e Método de willis * Centrifugo-flutuação, empregam reagentes de densidade mais alta que ovos, oocistos e cistos, que por sua vez flutuam na superfície das soluções. · Cloreto de sódio (1,13 g/mL) · Método de Willis · Sacarose (1,20 g/mL) · Sulfato de zinco (1,18 g/mL): Material deve ser examinado imediatamente, pois o contato com a solução de sulfato de zinco pode deformar as formas parasitárias, especialmente os cistos de protozoários. · Método de Faust · Sulfato de magnésio método de baermann-moraes * Baseia-se no termotropismo e no hidrotropismo positivo de larvas de nematódeos. * Ideal é que as fezes sejam colhidas no dia do exame, pois a refrigeração diminui a viabilidade das larvas. Fezes diarreicas ou colhidas em conservador não se prestam para estes métodos. método de rugai * Ideal é que as fezes sejam colhidas no dia do exame, pois a refrigeração diminui a viabilidade das larvas. Fezes diarreicas ou colhidas em conservador não se prestam para estes métodos. método de kato-katz * Indicado para ovos de S. mansoni, A. lumbncoides, T. trichiura e Ancylostomatidae (para este último as lâminas deverão ser examinadas no máximo até uma hora depois de sua preparação, pois após esse período os ovos ficam irreconhecíveis). * Não é possível a execução do método com fezes diarreicas. * Cistos de protozoários, apesar de passarem pela tela, não são visualizados nessa preparação. * Permite a quantificação da carga parasitária. * Carga Parasitária: Nº de Ovos do Parasito Encontrado X 24 = Nº de Parasitos/g defezes coloração * Útil para diferenciação de cistos, trofozoítos e larvas. * Ovos podem ser identificados sem corantes. apresentação dos resultados * Na apresentação dos resultados do EPF, devem constar os seguintes dados: · Identificação do paciente · Data · Nome do médico · Consistência das fezes e aspectos macroscópicos das fezes · Formas parasitárias e nome específico do parasito encontrado · Método executado · Observação sobre o número de amostras colhidas * Todos os parasitos encontrados no EPF deverão ser relatados, sejam eles patogênicos ou não. · Encontro de enterocomensais é um bom indicador das condições sócio-sanitárias de uma determinada região, indicando a possibilidade de infecção com parasitos patogênicos, uma vez que o mecanismo de infecção é o mesmo. * Observações sobre o número de amostras colhidas devem ser relatadas. * Coleta para controle de cura pode ser feita de 1 a 2 semanas após o tratamento.
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