relatorio agar muller hilton e manitol docx

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Introdução:
 
Ágar Muller Hilton: é um meio de cultura recomendado para a realização de
antibiograma (teste de sensibilidade), pela técnica de difusão de discos segundo o CLSI.
Ágar Sal Manitol: é um meio de cultura, muito usado para o isolamento e identificação
de estafilococos, principalmente, de Staphylococcus aureus presentes em amostras
biológicas.
● Coloração de Gram: é uma técnica de coloração para diferenciação de microrganismos
através das cores, para serem observados em microscópio óptico.
● Catalase: consiste na detecção de catalase em bactérias, servindo essencialmente para
a distinção entre estafilococos e estreptococos. A catalase é uma enzima produzida por
quase todos os organismos vivos e é responsável pela decomposição do peróxido de
hidrogênio.
● Coagulase: é utilizada para distinguir espécies patogênicas de Staphylococcus de
espécies não patogênicas, sendo um bom indicador da patogenicidade do S.aureus. As
coagulases são enzimas com capacidade para coagular o plasma sanguíneo através de
um mecanismo similar ao da coagulação normal.
Objetivo: Relatar as técnicas hematológicas utilizadas na aula prática.
Material: 
Ágar Muller Hilton: Água deionizda, Ágar Muller Hilton, balão de fundo chato, balança,
autoclave, barbante, papel craft, placa de petri,
Ágar Sal Manitol: Água deionizada, Ágar sal Manitol, balão de fundo chato, balança,
autoclave, barbante, papel craft, placa de petri, bico de bunsen, estufa, geladeira, alça
de platina, lâmina
● Coloração de Gram: Lâmina, bico de Bunsen, pinça, amostras, cristal violeta,
álcool-acetona, fuccina, alça de platina, Lugol, caneta para retroprojetor, microscópio e
óleo mineral.
● Catalase: Lâmina, peróxido de hidrogénio (água oxigenada), amostra, alça de platina e
bico de Bunsen.
● Coagulase:
Amostra:
Ágar Muller Hilton:
Ágar Sal Manitol:
Técnica:
Ágar Muller Hilton: Pesar 9,5 g de Ágar Muller Hilton e colocar em um balão de fundo
chato. Dissolver com 250 ml de água deionizada. Fazer autoclavagem dessa solução por
15 minutos, na temperatura de 121° C a 1 atm de pressão.
Ágar Sal Manitol: Pesar de Ágar Sal Manitol e colocar em um balão de fundo chato.
Dissolver em 250 ml de água deionizada. Fazer autoclavagem dessa solução por 15
minutos, na temperatura de 121° C a 1 atm de pressão. Resfriar o líquido a 50 °C. Com
o bico de Bunsen ligado, dispor o Ágar Sal Manitol e as placas de Petri a serem
utilizadas na área estéril em volta do bico de Bunsen. Esterilizar a parte superior do
balão de fundo chato e despejar o liquido na placa de Petri, flambar a tampa da placa e
fechá-la. Aguardar ate que o material esfrie e solidifique.
● Coloração de Gram: Com a caneta para retroprojetor identificar a lâmina com o nome e
espaços para as amostras. Fazer um esfregaço, utilizando a seguinte técnica: Esterilizar
a alça de platina no bico de Bunsen, e colocar dentro do tubo de ensaio com a amostra.
Colocar a gota da amostra da alça de platina sobre a lâmina e deixar secar. Após repetir
esse processo com a amostra dois, flambamos o fundo da lâmina. Em uma pia,
colocamos a lâmina preparada sobre um suporte, onde cobrimos o material com cristal
violeta e deixamos por 1 minuto. Descartamos o excesso e cobrimos o material com
Lugol, deixamos por 30 segundos, desprezamos e em seguida, colocamos
álcool-acetona para lavar os resíduos do cristal violeta. Cobrimos o material com
fucsina e deixamos 1 minuto. Lavamos a lâmina e deixamos secar. Colocamos sobre a
lâmina óleo mineral, focalizamos o microscópio e na lente objetiva de 100x
observamos o material.
● Catalase: Fazer um esfregaço, utilizando a seguinte técnica: Esterilizar a alça de platina
no bico de Bunsen, e colocar dentro do tubo de ensaio com a amostra. Colocar a gota
da amostra da alça de platina sobre a lâmina, espalhar e deixar secar. Utilizar a pipeta
de 20ul e pipetar sobre a lâmina peróxido de hidrogénio. Se aparecem bolhas, o
organismo é catalase-positivo (estafilococos), se não é catalase-negativo
(estreptococos).
● Coagulase: A prova da coagulase em tubo consiste em juntar num tubo de ensaio
contendo plasma (obtido de sangue a que se juntou um anticoagulante, por exemplo
oxalato, citrato, heparina) ou plasma de coelho, a uma suspensão de microrganismos
(caldo de cultura) ou colônias provenientes de um meio sólido e incubar a 37º C. A
formação de coágulos às 2 h, às 6 h ou às 24 h de incubação é interpretada como uma
prova positiva. A ausência de coagulação após 24 horas de incubação é uma prova
negativa.