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1 CONCEPÇÃO I EMBRIOLOGIA LETICIA LEÃO 30/03/2021 Fecundação Gameta feminino: Características gerais do oócito secundário (gameta) Células do cummulus oophorus: corona radiata - Secretam matriz extracelular em abundância rica em ácido hialurônico Zona pelúcida - Material glicoproteico; antes do espermatozoide liberar as enzimas, precisa se ligar. Zona pelúcida garante especificidade (humanos com humanos) Gameta masculino: Transporte do oócito feminino: Na ovulação, as extremidades fimbriadas da tuba uterina se aproximam do ovário Sai do ovário para o infundíbulo e a fertilização deve ocorrer preferencialmente na ampola para onde ele vai devido à peristalse. A peristalse conduz em direção ao útero Viabilidade do gameta feminino: 24h depois de ser liberado Se fertilizado: 3 a 4 dias sofrendo mitose e se deslocando pela tuba Transporte do espermatozoide: A ejaculação reflexa é dividida em: emissão e ejaculação Emissão: o sêmen é enviado para a porção prostática da uretra pelos ductos ejaculatórios por peristalse dos ductos deferentes; a emissão é uma resposta autônoma simpática. Ejaculação: o sêmen é expelido pela uretra pelo óstio uretral externo devido ao fechamento do esfíncter vesical no colo da bexiga, da contração do músculo uretral e da contração dos músculos bulboesponjosos Os espermatozoides são transportados do epidídimo para a uretra por peristalse dos ductos deferentes. As glândulas sexuais (seminais, próstata e bulbouretrais) produzem secreções que são adicionadas ao fluido espermático no ducto deferente e na uretra. Os espermatozoides passam pelo colo uterino graças a cauda Enzima vesiculase - produzida pelas glândulas seminais forma um tampão (coagula o sêmen ejaculado) e impede o retorno do sêmen para a vagina Na ovulação, o muco também ajuda o deslocamento dos espermatozoides. Prostaglandina- estimulam a motilidade uterina no momento da relação sexual e auxiliam no transporte dos espermatozoides até o local de fecundação na ampola uterina. A frutose secretada pelas glândulas seminais é fonte de energia para os espermatozoides no sêmen Maturação dos espermatozoides: Os espermatozoides recém ejaculados não conseguem penetrar o oócito, por isso, passam por transformações (capacitação) que duram cerca de 7h Durante a capacitação, glicoproteínas e proteínas seminais são removidas da cabeça do acrossomo Essas mudanças não alteram o espermatozoide morfologicamente, mas o tornam mais ativo 2 CONCEPÇÃO I EMBRIOLOGIA LETICIA LEÃO 30/03/2021 A capacitação ocorre na tuba uterina ou no útero devido a substancias secretadas nessas regiões Acrossoma de um espermatozoide capacitado entra em contato com glicoproteína ZP3 da zona pelúcida. Membrana plasmática+ íons cálcio+ prostaglandinas+ progesterona tem papeis importantes na reação acrossomica A reação acaba antes do espermatozoide se fundir ao oócito Quando entram em contato com a corona radiata sofrem alterações que resultam em perfurações no acrossoma As mudanças produzidas na reação acrossomica estão ligadas a liberação de enzimas da vesícula acrossomica que facilitam a fecundação. Ex: hialuronidase e acrosina Viabilidade dos gametas: Oócitos são fecundados dentro de 12h após a ovulação. Após 24h não podem mais ser fecundados pois se degeneram rapidamente Espermatozoides não sobrevivem (maioria) mais de 48h no trato genital feminino. Após a ejaculação, os espermatozoides passam pelo colo uterino e chegam ao interior do útero Alguns ficam armazenados nas pregas da mucosa e são liberados gradativamente Atravessam o útero e entram nas tubas uterinas O curto armazenamento de espermatozoides no colo aumenta esse armazenamento para liberação gradual, aumentando as chances de fecundação Obs: espermatozoides e óvulos podem ficar congelados por muitos anos para fertilização in vitro, nesse tipo de fertilização a capacitação do espermatozoide é induzida pela incubação desses em um meio especifico por várias horas. Fertilidade masculina: Análise do sêmen Espermatozoide= menos de 10% do sêmen Infertilidade resulta de uma baixa contagem de espermatozoides, da pouca motilidade dos espermatozoides, do uso de medicamentos ou drogas, alterações endócrinas, obstrução de um ducto genital... Vasectomia: Método mais eficaz de contracepção permanente masculina Remoção cirurgia de todo ou um segmento dos ductos deferentes. Após a vasectomia não existem espermatozoides no sêmen, mas o volume ejaculado permanece A reversão do procedimento é tecnicamente possível por meio de técnicas microcirúrgicas mas a taxa de sucesso varia. Dispermia e tripoidia: Dois espermatozoides participando da fecundação= dispermia Resulta em um zigoto com conjunto extra de cromossomos Concepções triploides são cerca de 20% das anomalias de abortos espontâneos Embriões triploides podem parecer normais mas quase sempre são abortados ou morrem logo após o nascimento A fecundação: Local = ampola uterina Se não for fecundado na ampola, passa lentamente pela tuba até o corpo do útero, onde degenera Ela pode ocorrer em outras partes da tuba, mas não no corpo do útero 3 CONCEPÇÃO I EMBRIOLOGIA LETICIA LEÃO 30/03/2021 Sinais químicos dos oócitos (liberados pelas células foliculares) guiam os espermatozoides capacitados (quimiotaxia) A fecundação se inicia com o contato entre espermatozoide e oócito e encerra com a mistura de cromossomos maternos e paternos na metáfase da primeira divisão mitódica do zigoto Alterações na sequência desses eventos podem causar a morte do zigoto. Leva aproximadamente 24h Fases da fecundação: 1. Passagem de um espermatozoide através da corona radiata: haluronidase- enzima liberada pela vesícula acrossomica do espermatozoide, enzimas da tuba uterina e a cauda do espermatozoide são importantes para essa penetração 2. Penetração da zona pelúcida: resultado da ação de enzimas acrossomicas como esterase, acrosina e neuraminidase que causam lise (dissolução) da zona pelúcida e abre passagem para o espermatozoide. 3. Reação zonal: após a penetração de um espermatozoide, a zona pelúcida muda sua composição para impedir a penetração de outros espermatozoides. Isso ocorre por meio da reação de enzimas lisossomais liberadas por grânulos corticais próximos a membrana plasmática do oócito. 4. Fusão das membranas plasmáticas do oócito e do espermatozoide: se rompem na região da fusão para ela ocorrer. A cabeça e a causa do espermatozoide entram na membrana do oócito, enquanto as mitocôndrias e a membrana celular espermática não. 5. Término da segunda divisão meiótica do oócito e formação do pronúcleo feminino. Quando o espermatozoide penetra o oóvito, ele é ativado a completar sua segunda divisão meiótica para formar oócito maduro. A partir disso, cromossomos maternos se condensam no núcleo e formam o pronúcleo feminino. 6. Formação do pronúcleo masculino: já no citoplasma do oócito, o núcleo do espermatozoide aumenta de tamanho para formar o pronúcleo masculino e a causa se degenera. Morfologicamente, os pronucleos feminino e masculino são indistinguíveis. O oócito que contém os dois pronucleos é chamado de oótide 7. Logo que os pronúcleos se fundem em um único agregado diploide, a oótide se transforma em zigoto. Então, os cromossomos no zigoto se organizampara o início das clivagens 8. O zigoto é geneticamente único, pois, metade dos cromossomos é materna e outra paterna. Ele contém uma combinação diferente dos pais, garantindo a variabilidade genética da espécie humana e sendo a base da herança biparental. A meiose na fase da gametogênese possibilita a relocação aleatória dos segmentos. O sexo cromossômico do embrião é determinado na fecundação. Ele depende se o espermatozoide carrega um cromossomo X ou Y. Resumão da fecundação Estimula o oócito a acabar a segunda divisão meiótica Volta a um número diploide Resulta na variabilidade genética da espécie Determina o sexo cromossômico Causa a ativação da oótide para iniciar a clivagem do zigoto. Obs: pré-seleção do sexo do embrião: São Técnicas microscópicas desenvolvida para separar os espermatozoides X e Y com base em: velocidade de migração em campo elétrico; capacidade natatória; forma; diferença no DNA (2,8% a mais no X) Técnicas de reprodução assistida: Fertilização in vitro (FIV): 1. Os folículos ovarianos são estimulados a se desenvolverem e amadurecerem a partir da administração de citrato de clomifeno e gonadotrofinas, causando superovulação 2. Oócitos maduros são aspirados por laparoscopia. Também podem ser recolhidos por uma agulha guiada por ultrassonografia inserida através da vagina 3. Os oócitos são colocados na placa de petri que tem meio de cultura especial e espermatozoides capacitados 4. A fertilização é monitorada e a clivagem dos zigotos entre 3 e 5 dias 5. Dependendo dos fatores da mulher como idade, são transferidos de 1 a 3 embriões formados e são transferidos para o interior do 4 CONCEPÇÃO I EMBRIOLOGIA LETICIA LEÃO 30/03/2021 útero ou cateter da vagina para o colo uterino (os embriões remanescentes são armazenados em nitrogênio líquido e podem ser usados posteriormente) 6. A paciente permanece em posição supina (face para cima) por várias horas. Após a FIV, as chances de gravidez múltipla são maiores, assim como as de aborto espontâneo.
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