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Prezado (a) Aluno(a),
Você fará agora seu TESTE DE CONHECIMENTO! Lembre-se que este exercício é opcional, mas não valerá ponto para sua avaliação. O mesmo será composto de questões de múltipla escolha.
Após responde cada questão, você terá acesso ao gabarito comentado e/ou à explicação da mesma. Aproveite para se familiarizar com este modelo de questões que será usado na sua AV e AVS.
	INTRODUÇÃO À BIOLOGIA MOLECULAR
	 
		
	
		1.
		(2012 - FUNCAB) O DNA é uma longa estrutura presente em nossas células. Para caber no núcleo, o DNA utiliza algumas estratégias, como a formação de nucleossomo. Pode-se afirmar que um nucleossomo é:
	
	
	
	uma parte do DNA que codifica uma proteína.
	
	
	 uma longa fita de DNA com diversos genes.
	
	
	uma proteína que tem a capacidade de se ligar ao DNA.
	
	
	um cromossomo no estágio final de empacotamento.
	
	
	uma estrutura com um núcleo octamérico de histonas, no qual o ADN se enrola duas vezes.
	
Explicação:
O nucleossomo é o primeiro estágio de compactação do DNA de eucariotos. Essa estrutura é formada pelo enrolamento de 146 nucleotídeos em um octâmero de proteínas (histonas)
	
	
	 
		
	
		2.
		(Pucmg 99) O DNA apresenta importantes funções celulares. Uma delas é a síntese de proteína. Numa síntese de proteína com 185 ligações peptídicas, o filamento de DNA que proporcionou essa síntese deverá ter o seguinte número total de nucleotídeos:
	
	
	
	62
	
	
	93
	
	
	558
	
	
	279
	
	
	186
	
Explicação:
Cada ligação peptídica corresponde a 3 nucleotídeos, logo 185x3 = 555 + os 3 nucleotídeos necessários para abrir a síntese. Alternativa 558
	
	
	 
		
	
		3.
		Em relação aos genomas bacterianos podemos afirmar que:
	
	
	
	eles apresentam apenas um cromossomo, uma origem de replicação e uma região de término, além de elementos móveis extracromossomais.
	
	
	eles apresentam pelo menos um cromossomo, podendo ser circular ou linear, com uma origem de replicação e uma região de término cada, regiões intergênicas, além de elementos móveis extracromossomais.
	
	
	eles apresentam pelo menos um cromossomo, podendo ser circular ou linear, com uma origem de replicação e uma região de término cada.
	
	
	eles apresentam pelo menos um cromossomo circular, com uma origem de replicação e uma região de término cada, e elementos móveis extracromossomais.
	
	
	o menor genoma tem um tamanho de 580 mil pares de bases ou 470 genes, além de elementos móveis extracromossomais.
	
Explicação:
O genoma bacteriano é constituído por um ou mais cromossomos que podem lineares ou circulares, além de apresentar genes extracromossomomiais encontrados em plasmídeos.
	
	
	ISOLAMENTO DE ÁCIDOS NUCLEICOS
	 
		
	
		4.
		(NUCEPI, 2012) A técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) é uma ferramenta que permite variações metodológicas nos laboratórios de perícia criminal. Nesse sentido, a Nested-PCR utiliza dois pares de iniciadores (primers) com o objetivo de:
	
	
	
	diminuir o consumo de nucleotídeos durante a reação.
	
	
	inibir a amplificação de produtos inespecíficos.
	
	
	aumentar a quantidade do produto amplificado.
	
	
	evitar a degradação do produto amplificado.
	
	
	diminuir o número de ciclos de amplificação.
	
Explicação:
O nested PCR é uma variação da PCR convencional utilizada no intuito de aumentar a especificidade da amplificação. Ela consiste na amplificação de um fragmento especifico utilizando mais de um par de primers, sendo um par anelado mais externamente a sequência alvo e um interno ¿pegando¿ somente a sequência alvo.  
	
	
	 
		
	
		5.
		(CESPE, 2016) No método de extração orgânica do DNA:
	
	
	
	o DNA adsorve especificamente membranas/superfícies/ /partículas de sílica em presença de certos sais e em um determinado pH.
	
	
	ocorre a ligação reversível do DNA a superfície sólida/grânulo/partícula magnética, que tenha sido revestida com anticorpo de ligação ao DNA.
	
	
	as proteínas são desnaturadas, utilizando-se proteases, e removidas com solventes orgânicos como fenol, ou com uma mistura de 1:1 de fenol e clorofórmio.
	
	
	ocorre interação específica entre fosfatos carregados negativamente do acido nucleico e moléculas carregadas positivamente na superfície do substrato sólido.
	
	
	o DNA purificado é eluído por extração com etanol.
	
Explicação:
Na extração orgânica a combinação de fenol clorofórmio é utilizada para desnaturação e remoção das proteínas contaminantes. 
	
	
	 
		
	
		6.
		(IF-Farroupilha, 2016) Analise as afirmativas abaixo, sobre a reação da polimerase em cadeia (PCR), e marque (V) para verdadeiro ou (F) para falso:
(  ) A PCR amplifica regiões específicas do DNA.
(  ) A PCR explora certas características do processo de replicação do DNA.
(  ) O molde de DNA de fita simples, utilizado na PCR, pode ser obtido pelo aquecimento de uma fita dupla de DNA a temperaturas próximas à ebulição.
(  ) O ponto inicial, para cada síntese de DNA, pode ser determinado pelo fornecimento de um oligonucleotídeo iniciador que se liga ao molde naquele ponto.
(  ) Na PCR, a DNA polimerase pode ser direcionada para sintetizar uma região específica do DNA.
A sequência correta é:
	
	
	
	V, F, F, F, V
	
	
	V, V, V, F, V
	
	
	F, F, F, F, F
	
	
	V, V, V, V, V
	
	
	V, V, V, V, F
	
Explicação:
A PCR é uma técnica que permite a amplificação de sequências especificas do DNA a partir da utilização dos primers e fita molde de DNA.
 
	
	
	AMPLIFICAÇÃO IN VITRO DE DNA
	 
		
	
		7.
		Diego está iniciando sua vida profissional como técnico de laboratório em um laboratório molecular. Sua chefe, a biomédica Lais, solicitou que ele corresse um gel para que juntos pudessem analisar o resultado da PCR. Para realizar essa metodologia Diego confeccionou:
	
	
	
	um gel de agarose que servirá de matriz para corrida dos fragmentos de diferentes tamanhos de acordo com tamanho e carga. Estes fragmentos são fluorescentes e podem ser visualizados no microscópio após a corrida.
	
	
	um gel de gelatina onde ocorrerá a separação de fragmentos genômicos de acordo com o tamanho e a velocidade de migração em direção ao polo negativo. Os fragmentos podem ser visualizados em luz UV após a adição do brometo de etidio no gel.
	
	
	um gel de gelatina para fazer transferência do DNA para uma membrana de nitrocelulose onde ocorrerá a separação de fragmentos genômicos de acordo com a velocidade e carga.
	
	
	Uma membrana de nitrocelulose onde ocorrerá a corrida dos fragmentos de acordo com a carga e tamanho. A visualização dos fragmentos se dá em luz UV após a associação com intercalante de DNA.
	
	
	um gel de agarose onde ocorrerá a separação de fragmentos genômicos de acordo com com tamanho e carga. Os fragmentos podem ser  visualizados em luz UV após a adição do brometo de etidio no gel.
	
Explicação:
A eletroforese é uma etapa pós PCR necessária para visualização da amplificação dos fragmentos alvos. Para que ela ocorra é necessário que a amostra seja adicionada a uma matriz (gel agarose), onde os fragmentos serão separados por uma corrente elétrica de acordo com seu tamanho e carga. Após a corrida é adicionado ao gel um intercalante de DNA para que os fragmentos possam ser visualizados ao receberem luz UV.
	
	
	SEQUENCIAMENTO, CLONAGEM E TÉCNICAS DE HIBRIDIZAÇÃO
	 
		
	
		8.
		Sequenciamento de nova geração, conhecido também como NGS ou sequenciamento profundo de ácidos nucleicos, é um termo geral utilizado para descrever uma série de tecnologias modernas de sequenciamento. Sobre esta tecnologia é correto afirmar que:
	
	
	
	Apesar dos inúmeros avanços gerados pelas técnicas de sequenciamento de nova geração, ainda é tecnicamente impossível utilizá-las para analisar os genes que estão sendo expressos em um determinado tecido ou condição.
	
	
	Illumina (Solexa), 454 (Roche) e Ion Torrent (Próton/PGM) são sequenciadores de nova geração que realizam o sequenciamento diretotanto de DNA quanto de RNA.
	
	
	Uma das maiores vantagens das tecnologias de sequenciamento de nova geração é o fato de que as sequências obtidas geralmente são longas, contendo, ao menos, 1 kilobases.
	
	
	As tecnologias recentes de sequenciamento de ácidos nucleicos permitem sequenciar tanto DNA como RNA de forma mais rápida e barata do que anteriormente era conseguido com o sequenciamento de Sanger e, por conta disto, estão revolucionando os estudos de genomas e a biologia molecular.
	
	
	Uma das restrições ao uso do sequenciamento de nova geração é a necessidade de serem utilizadas amostras grandes com alta concentração de ácidos nucleicos.
	
Explicação:
Os novos sequenciadores como ilumina e RNAseq permitem o sequenciamento rápido, barato e de longas sequências de DNA e RNA, respectivamente.
	
	
	 
		
	
		9.
		(INPI - 2006) Considerando os princípios da clonagem molecular, assinale a opção correta.
	
	
	
	Bactérias selvagens são aquelas que receberam o DNA recombinante, portanto possuem um genoma diferente da bactéria parental.
	
	
	As técnicas de clonagem molecular envolvem a introdução de DNA exógeno em um organismo hospedeiro.
	
	
	Nos experimentos de clonagem molecular, são utilizadas enzimas de restrição capazes de restaurar a estrutura linear dos plasmídeos.
	
	
	O plasmídeo é um tipo de vetor capaz de se comportar como um cromossomo de levedura.
	
	
	Nos experimentos de clonagem molecular, são utilizadas enzimas de restrição capazes de restaurar a estrutura anelar de plasmídeos.
	
Explicação:
A clonagem é uma técnica na qual o DNA exógeno é inserido em um vetor e incorporado em uma bactéria ou célula eucariota para replicação.
	
	
	 
		
	
		10.
		Juliana, é biomédica e ingressou no mestrado para trabalhar com biologia molecular. Seu projeto engloba a identificação de sequências específicas do genoma bacteriano correlacionado com mecanismos de virulência. Para detectar estas sequências ela deve recorrer a técnicas moleculares de hibridização. Que técnica que você sugeriria para ela?
	
	
	
	Southern Blotting
	
	
	Nothern Blotting
	
	
	Western Blotting  
	
	
	Clonagem molecular
	
	
	PCR
	
Explicação:
Southern Blotting é uma técnica molecular que serve para verificar se uma determinada sequência de DNA está ou não presente em uma amostra analisada.

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