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relatorio bioquimica

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Introdução
Os carboidratos são as fontes mais importantes de energia do organismo. São poliidroxialdeídos ou poliidroxicetonas, ou ainda, substâncias que por hidrólise formam aqueles compostos. São classificados como monossacarídeos, oligossacarídeos e polissacarídeos.
Os monossacarídeos são açúcares simples constituídos por uma única unidade poliidroxialdeídica ou cetônica contendo 3 a 9 átomos de carbono, sendo o principal combustível para a maioria dos seres vivos. Os mais freqüentes no homem são a glicose, frutose e galactose, todos com seis átomos de carbono. Os carboidratos da dieta fornecem a maior parte das necessidades calóricas do organismo (MOTTA,2010).
A glicemia é a concentração de glicose no sangue ou mais precisamente no plasma. Em condições normais é mantida por vários mecanismos regulatórios. Assim os níveis de glicemia são regulados pela interação de diversos hormônios, sobressaindo, por sua maior atividade, a insulina produzida nas células beta das ilhotas de Langerhans, cuja ação reduz a taxa glicêmica. Por outro lado, a epinefrina , a norepinefrina, o glucagon, os glicocorticóides, o ACTH e o hormônio do crescimento atuam antagonicamente, elevando a glicemia. A atividade harmoniosa de todos esses fatores mantém as taxas fisiológicas da glicose no sangue. Após a ingestão de carboidratos, os níveis de glicose sanguínea aumentam, estimulando as células beta do pâncreas a secretar a insulina. Este hormônio aumenta a permeabilidade de certas células á glicose, provocando uma redução de glicemia. A necessidade da manutenção de equilíbrio do organismo através da interação de diversos hormônios faz com que a glicose, quando em excesso, seja estocada no fígado como glicogênio e nos tecidos periféricos. Em períodos de jejum, a glicose é mobilizada para depósitos, mantendo normais as taxas glicêmicas. Tal circunstância é essencial para o cérebro, cuja fonte principal de energia é a glicose. A glicose, um dos principais monossacarídeos da natureza, é a principal fonte de energia das células e sua dosagem anormal no sangue pode levar a constatação de variados tipos de patologias. A glicemia varia em função de nossa alimentação, quando comemos mais ela aumenta e menos ela se mantém baixa. A dosagem glicêmica normal em jejum está entre 70 mg/dL e 99 mg/dL (SBD,2018). A hiperglicemia, aumento da glicose no sangue, apresenta sua dosagem glicêmica acima de 120 mg/dL. A hipoglicemia, estado patológico em que a concentração de glicose no sangue encontra-se abaixo do normal, apresenta sua dosagem glicêmica abaixo de 70 mg/dL. A principal patologia diagnosticada pela glicemia é o Diabetes Mielitus que é uma síndrome de etiologia múltipla, decorrente da falta de insulina e / ou da incapacidade da insulina de exercer adequadamente seus efeitos. A determinação do nível de glicose sanguínea consiste no melhor teste para diagnosticar esta patologia. Em pacientes sem essa glicemia aumentada, o teste de tolerância à glicose por via oral pode ser usado para o diagnóstico. Constitui a obtenção da concentração de glicose sérica no estado de jejum e em intervalos de 30-60 minutos, por 2h ou mais, após consumo de sobrecarga de 100g de glicose. Nos portadores da diabetes, este carboidrato atinge um nível mais elevado no sangue e permanece assim por períodos de tempo mais longos. A captação de glicose por tecidos sensíveis á insulina – muscular e adiposo – é diminuída no estado diabético. O paciente ou não tem insulina ou desenvolveu uma resistência a esse hormônio nestes tecidos através de anomalia no receptor ou em etapas subseqüentes – mediadoras dos efeitos metabólicos (MOTTA,2010).
Objetivo
Determinar a concentração sérica ou plasmática de glicose. Realizar cálculos a partir dos resultados obtidos, para validação da metodologia empregada.
Material e Método
3.1 Materiais
3 tubos de ensaio
estante para tubo de ensaio
pipeta automática de 20 µL e 1000 µL
ponteiras descartáveis
béquer para descarte
água destilada
reagente de trabalho
padrão/amostra 100 mg/dL de glicose
banho Maria a 37ºC
espectrofotômetro λ 500 nm
Métodos
 Em um tubo de ensaio identificado como branco foram adicionados 2000 µL de 
 reagente de trabalho e 20 µL de água destilada. Outros dois tubos foram 
 identificados como A1 e A2 e receberam cada um 2000 µL de reagente de 
 trabalho e 20 µL de amostra/padrão.
As amostras foram homogeneizadas e levadas ao banho Maria a 37ºC por 10 minutos. Em seguida, o branco foi usado para zerar o espectrofotômetro e procedeu-se as leituras das amostras A1 e A2 em λ 500 nm.
Resultados e Discussão
A glicose é a principal fonte de carboidrato do organismo e sua concentração sanguínea está intimamente ligada à ação da insulina. 
Após uma refeição rica em carboidratos, a glicose que é absorvida para o sangue causa uma rápida secreção de insulina. Esta, por sua vez, provoca a captação, armazenamento e uso rápido da glicose por quase todos os tecidos corporais, porém especialmente pelos músculos, tecido adiposo e o fígado.
Valores elevados de glicose ocorrem nos vários tipos de diabetes primárias, nos estados de intolerância à glicose e nas diabetes secundárias a várias doenças (hipertireoidismo, hiperpituitarismo, hiperadrenocorticismo, etc).
Valores diminuídos de glicose ocorrem nas hipoglicemias que têm várias causas. Quando a ocorrência de sintomas de hipoglicemia é relacionada à alimentação, duas formas de hipoglicemia podem ser definidas, hipoglicemia do jejum e hipoglicemia pós-prandial.
A dosagem da glicose no sangue é empregada na avaliação do metabolismo da glicose (controle de produção, consumo e armazenamento), diagnosticando os diversos estados de hiper e hipoglicemias. 
Atualmente, a metodologia empregada quase que universalmente para dosagem quantitativa de glicose é a enzimática glicose oxidase / hexoquinase. A dosagem pode ser feita no plasma (sangue colhido com fluoreto de sódio) ou no soro. A preferência por plasma fluoretado advém do fato de que no soro a glicose pode decair com o tempo. Quando houver disponibilidade apenas de soro, o material deverá ser rapidamente armazenado a -20ºC, sendo descongelado no momento da dosagem. O limite máximo de normalidade, é de 99 mg/dL, para amostras colhidas em jejum. Evidentemente, tal consideração só é valida se a dosagem for feita em condições técnicas apropriadas, estando o paciente em jejum de oito horas. 
O princípio dessa metodologia é a determinação da glicose após oxidação enzimática. A glicose oxidase (GOD) catalisa a oxidação da glicose para ácido glicônico e peróxido de hidrogênio. Através de uma reação oxidativa de acoplamento catalisada pela peroxidase (POD), o peróxido de hidrogênio formado reage com 4-aminoantipirina e fenol, formando um complexo de cor vermelha (quinoneimina), cuja absorbância medida em 500 nm, é diretamente proporcional à concentração de glicose na amostra.
Dessa maneira, buscou-se na aula prática determinar a concentração de glicose na amostra.
A linearidade corresponde a capacidade do método de fornecer resultados diretamente proporcionais à concentração da substância em exame (analito).
Como metodologia obedece à lei de Lambert-Beer, a concentração da amostra foi calculada a partir do fator de calibração (FC). Assim:
Padrão:0,286
Absorbância: 1,275
[ ] /ABS=F
Para achar o fator
100/0,286=F
F=349,650
Para encontrar a concentração
[ ] / 1,275=349,650
[ ] =445,803
 Sabe-se que o valor de referência para glicemia de jejum está entre 70 mg/dL e 99mg/dL, e a concentração conhecida do padrão é de 100 mg/dL, estando portanto o valor obtido, dentro do esperado.
Conclusão
Através da aula prática foi possível aprender sobre os procedimentos necessários para a determinação da glicose plasmática, a partir da construção da curva de calibração e os cálculos necessários para determinação da concentração.
Referências
Resolução - RE nº 899, de 29 de maio de 2003. Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Disponível em:
<http://www.anvisa.gov.br/legis/resol/2003/re/899_03re.htm>,acesso em 30.agosto.2019.
Bula. Glicose – Método Colorimétrico Enzimático (diagnóstico in vitro). QUIBASA QUIMICA BÁSICA Ltda. Disponível em:
<Www.bioclin.com.br>, acesso em 30.Agosto.2019.
MOTTA T. V. Bioquímica Clínica: Princípios e Interpretações. Disponível em:
<http://www.labclinisul.com.br/artigos/Bioq.Clinica%20-%20Carboidratos.pdf>, acesso em 30.Agosto.2019.
Sociedade Brasileira de Diabetes. Disponível em:
<http://www.diabetes.org.br>, acesso em 31.Agosto.2019.

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