Aplicação da fotometria e espectrofotometria

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Aplicação da fotometria e espectrofotometria para compreensão das alterações metabólicas desencadeadas por alguma patologia
Vitória, Layne, José e Simone
Princípio da técnica
Estuda as características dos diferentes elementos químicos
E tem como função absorver a radiação eletromagnética específica de cada elemento, de forma que seja possível obter o valor da concentração da solução alvo.
 O rastreamento pode obter a concentração de uma solução medindo a absorção de luz em um determinado comprimento de onda.
Princípio da técnica 
Um espectrofotômetro é um instrumento que pode comparar a radiação absorvida ou transmitida por uma solução contendo uma quantidade desconhecida de soluto e uma quantidade conhecida da mesma substância.
As substâncias podem absorver energia radiante, até mesmo o vidro que parece completamente transparente absorve os comprimentos de onda pertencentes ao espectro visível.
A água é fortemente absorvida na região do infravermelho. A absorção do ultravioleta, visível e infravermelho depende da estrutura da molécula e é uma característica de cada substância química. 
Princípio da técnica
Quando a luz passa por uma substância, parte da energia é absorvida.
Se a energia radiante não for absorvida, ela não terá nenhum efeito.
 
A cor das substâncias é causada pela absorção (transmitância) da luz branca de certos comprimentos de onda específicos que incide sobre elas, e apenas os comprimentos de onda que não são absorvidos podem ser transmitidos aos nossos olhos.
Princípio da técnica
Fotômetros utilizam filtros para isolar a faixa espectral de interesse.
Usam chama de baixa temperatura - Instrumentos relativamente simples.
Usados na determinação de Na, K, Li, Ca e Mg. 
Espectrofotômetro utilizam prisma ou rede de difração para isolar a faixa espectral de interesse.
Usam chama com temperaturas mais altas.
Instrumentos mais complexos.
Determinação de mais de 60 elementos.
Aplicação laboratorial
O espectrofotômetro é instrumento de análise utilizado em laboratórios de pesquisas, capaz de medir e comparar a quantidade de luz absorvida, transmitida ou refletida por uma determinada amostra, seja ela solução, sólido transparente ou sólido opaco
É aplicada nas áreas de química, física, biologia, bioquímica, engenharia química, aplicações clínicas e industriais
Aplicação laboratorial
Preparação de uma curva padrão (ou calibração);
Preparação das amostras;
Leitura no espectrofotômetro;
Cálculos das concentrações através da curva padrão. 
COMO O ESPECTROFOTÔMETRO FUNCIONA?
Uma amostra é colocada dentro do espectrofotômetro.
O espectrofotômetro precisa produzir uma luz monocromática, com um único comprimento de onda, e necessita ser capaz de detectar de forma sensível à quantidade de luz absorvida nesse comprimento de onda;
O comprimento de onda da luz atinge a amostra, que está localizada em um pequeno recipiente chamado cubeta;
A luz passa através da amostra e é lida pelo detector.
Componentes essenciais
Fonte de luz
Monocromador
Detector
Amostra
Cubeta
Leis da espectofotometria
As leis de Lambert-Beer, se consiste na junção do que Lambert observou e no que Beer observou também , assim uma completando a outra.
Lambert observou a relação entre a transmissão de luz e a espessura da camada do meio absorvente.
Beer observou a relação existente entre a transmissão e a concentração do meio onde passa o feixe de luz.
Leis da espectofotometria
Na lei de Lambert é relacionado com a seguinte frase : “A intensidade da luz emitida decresce exponencialmente à medida que a espessura do meio absorvente aumenta aritmeticamente.”
Na lei de beer: “A intensidade de um feixe de luz monocromático decresce exponencialmente à medida que a concentração da substância absorvente aumenta aritmeticamente.”
Sendo assim as leis de Lambert-beer são o fundamento da espectrofotometria.
Leis da espectofotometria
São simultaneamente, processo no qual a quantidade de luz absorvida ou transmitida por uma determinada solução depende da concentração do soluto e da espessura da solução.
I = Io . 10-x1 esta equação é a que representa a lei de Lambert 
I = Io . 10-kc Esta é a equação da lei de Beer 
LEI DE LAMBERT BEER
A luz é absorvida por uma amostra, a energia radiante do feixe de luz diminui.
Transmitância  é a fração de radiação incidente transmitida pelo meio
T = P / P0 e %T = 100 T 
Absorvância  depende do número de centros absorventes (concentração)  
A = log10 P0 / P e A = 2 - log10 %T 
LEI DE LAMBERT BEER CURVA PADRÃO	
relação gráfica entre os valores de absorbância e os de concentração
linearidade da reação
maior a concentração da substância | maior absorbância
Ex: Valor de absorbância e suas concentrações determinadas:
	Mg%	Abs
	0	0
	0,75	0,02
	1,5	0,04
	2,25	0,07
	3	0,09
	4,5	0,14
Curva padrão 
Através dos dados obtidos, é possível confeccionar um gráfico da curva de calibração
Referencias 
https://www.ufrgs.br/leo/site_espec/conceito.html
https://www.ufjf.br/quimica/files/2016/08/Espectrometria-UV-vis.pdf
https://www.researchgate.net/publication/303712888