APS TECNOLOGIA GENÉTICA - PCR

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Instruções para a APS: 
A técnica de PCR (Polymerase Chain Reaction – Reação em Cadeia da Polimerase) é 
atualmente amplamente utilizada para o sequenciamento de genes e diagnóstico de 
doenças hereditárias, identificação de impressões digitais do material genético e 
detecção e diagnóstico de doenças infecciosas. Por ser um método direto de alta 
sensibilidade, a reação em cadeia de polimerase está sendo considerada uma grande 
aliada na detecção de doenças infecciosas. Sua versatilidade, que permite a aplicação 
em diversos materiais biológicos, aliada à rapidez de análise é outro diferencial da 
técnica (http://www.cjflash.com.br/cace/informe,biologia-molecular-porpcr,7.html). 
 
ATIVIDADE 3: O aluno deverá copiar as questões abaixo, colar num documento de 
preferência, e responder qual a reposta correta. 
 
1- Qual seria o fluxo em um laboratório de biologia molecular para se obter o resultado 
de um paciente que está realizando uma pesquisa de bactéria por PCR? 
a) Extração de DNA --> PCR --> Eletroforese 
b) Eletroforese --> PCR --> Extração de DNA 
c) PCR --> Eletroforese --> Extração de DNA 
d) Eletroforese --> Extração de DNA --> PCR 
e) PCR --> Extração de DNA --> Eletroforese 
 
2- A reação da PCR consiste em amplificar um fragmento (região específica) de DNA 
milhões de vezes, para que isso ocorra precisamos preparar a reação previamente. Que 
reagentes são necessários para a montagem de uma reação de PCR? 
a) água, buffer, MgCl, DNTPs, Taq polimerase, primers e DNA 
b) água, buffer, helicase, DNTPs, Taq polimerase, primers e DNA 
c) água, buffer, Mgcl, DNTPs, DNA polimerase, primers e DNA 
d) água, buffer, helicase, DNTPs, DNA polimerase, primers e DNA 
e) água, buffer, primase, DNTPs, Taq polimerase, primers e DNA 
 
3- Qual é o propósito para o qual a PCR é usada? 
a) Analisar a expressão gênica do DNA 
b) Extrair o DNA de células 
c) Amplificar em fragmento específico de DNA 
d) Fazer todo o processo de replicação igual a célula 
e) Analisar o tRNA presentes nas células 
 
4- O que acontece com o DNA quando o termociclador atinge a temperatura de 90-95 ° 
C por 30 segundos no primeiro passo da PCR? 
a) Os primers se ligam na fica única de DNA 
b) A taq polimerase sintetiza as novas fitas do DNA, utilizando os nucleotídeos 
provenientes da DNTP 
c) Ocorre a desnaturação de proteínas 
d) As fitas de DNA se separam (Desnaturação – separação da fita dupla em duas fitas 
simples). 
e) Ocorre a renaturação da molécula de DNA 
 
5- As seguintes etapas constituem a reação em cadeia da polimerase (PCR), onde 
milhões de cópias do fragmento de DNA que se quer amplificar são gerados, 
I. Desnaturação do DNA genômico (94ºC, 30s). 
II. Anelamento dos iniciadores no DNA genômico (55-65ºC, 30s). 
III. Desnaturação do DNA genômico (94ºC, 5min). 
IV. Síntese do DNA pela polimerase (72ºC, 2-5 min). 
 
A sequência correta da reação apresentada está na opção: 
a) I - II - III - IV 
b) III - II - IV- I 
c) II - I - IV- III 
d) IV - I -III-II 
e) III - I - II - IV