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1 DISCIPLINA: PIGMENTOS Clorofila CONCEITO Pigmento encontrado em plantas, algas e algumas bactérias que apresenta como característica mais marcante sua coloração verde. A clorofila absorve luz nos comprimentos de luz violeta, azul e vermelho e, por esse motivo, reflete a luz verde. Quimicamente, a clorofila não é uma molécula isolada, mas compreende uma família de substâncias semelhantes entre si, designadas de clorofila a, b, c e d. - A clorofila a, a mais abundante e a mais importante dessa família, corresponde a aproximadamente 75% dos pigmentos verdes encontrados nos vegetais. - A clorofila b difere da clorofila a por uma pequena variação na substituição no anel pirrólico II. As clorofilas c e d são encontradas em algas VOCÊ SABIA??? As plantas são capazes de transformar a clorofila b em clorofila a através da ação da clorofila b redutase. DEGRAÇÃO DA CLOROFILA Objetivo: aumentar a solubilidade do pigmento - A primeira etapa da degradação da clorofila é iniciada na senescência por fatores endógenos, mas pode ser influenciada por fatores externos e internos. *O processo de degradação de clorofila é muito mais visualizado em folhas do que em sementes, pois as folhas contêm maiores quantidades de clorofila do que as sementes. A clorofila é sensível ao pH, enzimas, temperatura, luz e oxigênio, os quais tem maior ou menor influência na sua degradação de acordo com a atividade de água do meio. A constituição do alimento, as condições de processamento, e o ambiente e armazenagem influenciam no curso da degradação da clorofila em alimentos processados. - pH: Ácidos presentes no material fresco ou formados durante o processamento térmico são os principais responsáveis pela reação de feofitinização, que causa uma dramática mudança de cor, de um verde-brilhante para um verde-oliva, e pode ocorrer sob muitas condições de processamento e armazenagem. 2 DISCIPLINA: PIGMENTOS Clorofila - Enzimas: Clorofila oxidase: possui atividade dependente de oxigênio e ácidos graxos insaturados. Lipoxigenase: catalisa a oxidação da clorofila acoplada a uma hidroperoxidação de ácidos graxos insaturados. Peroxidase: na presença de fenóis simples catalisa a oxidação por meio de H2O2. INATIVAÇÃO ENZIMÁTICA A atividade enzimática em alimentos processados não é desejável, pois pode causar uma série de alterações durante a armazenagem, entre elas a perda da clorofila. - Pode ser inativada por congelamento, secagem ou esterilização. * Geralmente se aceita que quando a peroxidase é destruída é muito pouco provável que outras enzimas ainda estejam ativas, pois ela é a mais resistente ao calor. - Temperatura: A degradação da clorofila durante o aquecimento é sequencial: clorofila – feofitina – pirofeofitina. *Clorofila “b” é mais termoestável que a “a”. A temperatura pode aumentar a temperatura do meio e acelerar outros processos de degradação da clorofila. - Luz: A clorofila está protegida da destruição pela luz durante a fotossíntese nas células vegetais sãs por causa dos carotenoides e lipídeos que as rodeiam. Uma vez que se perde esta proteção fica suscetível a fotodegradação. Quando prevalecem essas condições e estão presentes a luz e o oxigênio, a clorofila é descolorida irreversivelmente. - Oxidação: Anel macrocíclico Produção de formas coloridas (geralmente pardas), entre elas as clorinas e as rodinas. Anel isocíclico Formação de moléculas incolores, de estrutura química variada. - Atividade de água: na degradação da clorofila, a água disponível pode ser um agente limitante, protetor ou acelerador das reações. Propriedade antioxidante, antimutagênica e quimiopreventiva. RADICAL LIVRE ANTIOXIDANTE CÉLULA - A clorofila, feofitina e o feoforbídeo apresentam atividade pró-oxidante em óleos e gorduras comestíveis, com evidente prejuízo sobre a qualidade do óleo. *Algumas pesquisas indicam que esses pigmentos promovem e catalisam a foto- oxidação do óleo quando expostos à luz, devido às características fotossensibilizantes do anel porfirina dessas moléculas, o que facilita a formação de oxigênio singlete, dando início, assim, ao processo de autoxidação. - Tanto a clorofila natural isolada de algas, como a feofitina e o feoforbídeo apresentam atividade antimutagênica 3 DISCIPLINA: PIGMENTOS Clorofila - A clorofila, feofitina e a clorofilina cúprica são fortes inibidores da formação de adutos de substâncias carcinogênicas com o DNA, em testes in vitro. MÉTODOS DE EXTRAÇÃO Pigmentos como a clorofila, apresentam um caráter hidrofóbico e são geralmente extraídos por solventes orgânicos. - Métodos espectrofotométricos: são os mais simples, porém, há uma grande limitação devido à sobreposição do perfil de absorção de cada composto. *Por esta razão a clorofila e seus derivados são geralmente separados por cromatografia líquida de alta eficiência. - A identificação de cada pigmento é baseado no tempo de retenção na separação por CLAE e confirmada pelos espectros de absorção e de massa. O tempo de retenção dos derivados piroclorofila e pirofeofitina são maiores do que o da clorofila e o da feofitina. - A clorofila é verde porque absorve luz vermelha e azul-violeta. Os comprimentos de onda exatos de absorção máxima não são definidos facilmente, eles variam dependendo do solvente orgânico usado e da presença de traços de umidade (mais apropriado 430nm)
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