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Biologia Molecular - 20211.B AV2 As enzimas de restrição podem ser aplicadas em diferentes técnicas da engenharia genética, como a criação de moléculas de DNA recombinante. Em relação a utilização das enzimas de restrição no DNA recombinante, é correto o que se afirma em: I - Nessa técnica, as DNA ligases quebram os fragmentos gerados a partir das ligações fosfodiéster entre os fragmentos de DNA II - As enzimas de restrição nessa técnica são utilizadas em conjunto com outras enzimas, chamadas de DNA ligase. III - As enzimas de restrição clivam sequências alvo em locais aleatórios. Resposta: apenas na II O RNA trata-se de uma molécula mais instável de fita simples, que possui como pentose uma ribose, e ao contrário do DNA (que possui a base timina), tem como uma de suas bases a uracila. Essa molécula muitas vezes é alvo de modificações pós transicionais, que vão variar de acordo com o tipo de RNA. Em relação aos diferentes tipos de RNA, quais são eles? Resposta: RNAm, RNAt, RNAr. A maioria dos polimorfismos está localizada em regiões não codificadoras do DNA e, geralmente, não tem uma função definida. Porém, quando um polimorfismo influencia na função de um gene, ele é chamado de: Resposta: Polimorfismo funcional A eletroforese é uma técnica da biologia molecular que tira proveito da carga líquida presente em moléculas biológicas para separá-las de acordo com essa e outras propriedades moleculares, sendo uma etapa necessária a diversas técnicas de genotipagem, de sequenciamento e de análise de sequências específicas, por exemplo. Você precisa preparar uma eletroforese no laboratório em que trabalha, mas para isso você precisará separa todo o material que será utilizado. Das alternativas abaixo, qual delas não se utiliza para fazer uma eletroforese? Resposta: Borel A Reação em Cadeia da Polímerase (PCR) baseia-se na síntese de milhares de cópias de uma sequência de interesse de DNA, por meio de uma reação in vitro, e ocorre pela incubação da enzima DNA Polimerase e com os substratos para a síntese. A técnica é sensível e permite a amplificação de fragmentos apartir de em uma pequena amostra. Em relação a PCR, assinale a alternativa incorreta: Resposta: Na PCR convencional, são aplicados marcadores fluorescentes e a avaliação poderá ser realizada ao longo dos ciclos. O método de sequenciamento em Sanger, foi desenvolvido por Frederick Sanger e tem o princípio de que a DNA Polimerase necessita de uma extremidade 3' livre em uma fita iniciadora para estender uma fita de DNA complementar. Qual alternativa indica as todas as moléculas utilizadas na reação? Resposta: A enzima DNA Polimerase, um DNA alvo, um oligonucleotídeo iniciador, dNTPs e dNTPs marcados por radioisótopos. Os microarray ou microarranjos são compostos por um número de moléculas de DNA de uma sequência conhecida, o que permite a composição de uma matriz de fragmentos genéticos diferentes, com sua disposição definida previamente. Oferece vantagens relacionadas ao custo-benefício, o tempo curto de realização e por propiciar um amplo espectro de estudo da expressão gênica. A técnica consiste na utilização de chips de DNA que dispõem, de forma organizada de grupos de milhares de moléculas. Quanto a técnica de microarrays e sua metodologia, assinale a afirmativa correta. Resposta: A tecnologia de microarranjos é constituída por quatro processos básicos: seleção e extração das amostras, identificação das amostras, hibridização das amostras e quantificação da expressão gênica. A Genética Forense se refere ao uso dos conhecimentos de genética e hereditariedade para a resolução de questões relativas ao Direito, principalmente quanto à investigação de crimes. Sobre o conceito de vestígios, assinale a alternativa correta. Resposta: São todas as amostras coletadas pelos peritos em uma cena de crime. Essas amostras são coletadas, pois se acredita que tenham uma relação direta com a ocorrência, mas precisam ser analisadas para confirmar essa correlação. Um analista clínico precisa realizar uma confirmação molecular de um paciente com suspeita de infecção pelo HIV. Sabendo que este vírus apresenta material genético de RNA, qual metodologia pode ser aplicada para a confirmação do diagnóstico? Resposta: RT-PCR e Qpcr A eletroforese é uma técnica de separação que se baseia no princípio de migração de íons em um campo elétrico. Alguns fatores influenciam a mobilidade eletroforética. São eles: Resposta: Velocidade, carga e resistência friccional
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