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Técnicas laboratoriais de diagnóstico bacteriológico Cultura → isolar a bactéria em meio ideal Importante primeiro realizar a coleta para depois iniciar a antibioticoterapia Hemocultura ✓ Isolar e identificar microrganismos patogênicos na circulação ✓ Bacteremia ou fungemia ✓ Espera-se até 7 dias para o crescimento = adaptação ao meio (se no 7º dia não cresceu, é negativo) ✓ Para o meio de cultura anaeróbio é necessário explicitar no pedido do exame, se não o fizer, será em meio aeróbio VOLUME: 10ml de sangue (10% do volume do meio de cultura) MATERIAL: 2 a 3 amostras / sangue total Antissepsia prévia ✓ Lavar as mãos, calçar as luvas e localizar a veia ✓ Descontaminar com álcool 70% ✓ Descontaminar com iodo 1-2% ou PVPI (iodopovidona) 10% ✓ Retirar iodo com álcool 70% ✓ Para relocalizar a veia, fazer desinfecção da luva Coleta ✓ Desinfectar a tampa do frasco com álcool 70% ✓ Cobrir a tampa com gaze estéril seca ✓ Puncionar a veia, transferir para o frasco e homogeneizar (não trocar a agulha) ✓ Identificar o frasco: nome, data, hora, número Fatores que influenciam o resultado ✓ Volume de sangue ✓ Método de antissepsia ✓ Identificação dos frascos ✓ Número dos frascos ✓ Transporte Antibiograma ✓ Teste de sensibilidade a antimicrobianos ✓ Perfil de resistência ✓ Resultado → a bactéria é sensível/resistente ao antimicrobiano Urocultura ✓ Exame mais solicitado ✓ Crescimento em 48h ✓ Tipo de bactéria e número de colônias ✓ Diagnóstico de infecções urinárias (caso contrário pode acarretar insuficiência renal crônica) ✓ Incidência em mulheres > homens MULHER: curto tamanho da uretra, proximidade da uretra com o ânus, ausência de secreção para “limpeza” HOMEM: longo tamanho da uretra, presença de substâncias bactericidas no fluido prostático AGENTES MAIS FREQUENTES: ✓ Bacilos gram-negativos: E. coli (80%) ✓ Gram-negativos: K. pneumoniae. P. mirabilis, Enterobacter sp. ✓ Gram-positivos: S. aureus, S. saprophyticus, S. coagulase negativa Coleta o Criança: saquinho o Adulto: potinho o Aspiração suprapúbica, cateterização MATERIAL: jato médio e final (despreza o primeiro) → 8- 10ml ✓ Primeira urina da manhã ou urinar com no mínimo 4h após a última micção CUIDADOS: higienização da genitália externa com água e sabão ✓ Mulher: afastar os grandes lábios / 5 dias após o período menstrual ✓ Não enche o frasco até a borda ✓ Só utilizar frascos esterilizados ✓ Rápido processamento (24h para isolar + 24h antibiograma) ✓ Manter e enviar as amostras sob refrigeração – 4ºC (no processamento = T ambiente) ✓ Interferência: antibióticos Semeio ✓ Método da alça calibrada (0,001) Confecção da lâmina da gota de urina não centrifugada Leitura das lâminas ✓ Presença de diversos morfotipos bacterianos e células epiteliais → coleta inadequada ✓ Resultado: flora polimicrobiana → higienização incorreta / impossível o isolamento ✓ Ausência de bactérias e leucócitos → negativo ✓ Presença de leucócito e ausência de bactérias → uretrite ou micoplasma ou chlamydia Sabrina Linard – M41 Leitura das placas CRITÉRIOS DE INTERPRETAÇÃO ✓ 24h a 37ºC ✓ Ausência de leucócitos e crescimento de três ou mais espécies de microrganismos → contaminação (pedir nova amostra) ✓ Contaminação: até 10000 unidades formadoras de colônia/ml de urina ✓ Suspeita da infecção: 10000-90000 UFC/ml ✓ Indício de infecção: acima de 100000 UFC/ml BAIXA CONTAGEM ✓ Início de infecção ✓ Diluição por ingestão aumentada de líquidos ✓ Fluxo rápido de urina ✓ Presença de agentes antissépticos ou antimicrobianos EAS – Sumário de Urina ✓ Quantitativo ✓ Inespecífico ✓ FÍSICO: volume, cor, aspecto, depósito, cheiro, reação, densidade ✓ QUÍMICO: albumina, glicose, corpos cetônicos, hemoglobinas, pigmentos biliares, nitrito (bact. Entero) ✓ SEDIMENTOSCOPIA: leucócitos, hemácias, bactérias, células epiteliais, leveduras NORMAL: cor amarelo citrino ou pálido e aspecto límpido INFECÇÃO: cor amarelo intenso, âmbar, aspecto turvo, hemoglobina, leucocitoesterase Antibiograma Coprocultura MATERIAL: fezes recentes CUIDADOS: colher “in natura” (pus, muco, sangue) ✓ Colocar uma porção no “Cary Blain” (conservante para transporte no frasco) e enviar ao laboratório até no máximo 12h ✓ Sem conserva = 1h INTERFERE: antibiótico INDICAÇÕES CLÍNICAS ✓ Diarreia: fezes liquefeitas e grande quantidade ✓ Desinteria: diarreia com sangue Fezes ✓ Diagnóstico da etiologia de diarreia bacteriana ✓ Quantidade: uma colher de sopa / porções muco- sanguinolentas ✓ Fezes frescas – processamento imediato para impedir a proliferação da microbiota Amostras não aceitáveis ✓ Fora do tempo estipulado ✓ Várias amostras colhidas no mesmo dia ✓ Fezes liquidas em fraldas Exame Parasitológico de Fezes (EPF) ✓ Paciente isolado, fezes gordurosas ✓ MACROSCÓPICO: consistência, odor, elementos anormais (muco e sangue), vermes ✓ MICROSCÓPICO: formas parasitárias ✓ PROCESSO DE ENRIQUECIMENTO: cistos ou trofozoítos (protozoários), ovos ou vermes (helmintos) Espermocultura MATERIAL: esperma (apenas em homens) CUIDADOS: antes da coleta, proceder a limpeza das mãos e do pênis usando água e sabão, urinar imediatamente antes da coleta INTERFERÊNCIA: antibióticos INDICAÇÃO CLÍNICA: infecções das glândulas acessórias como prostatite, prostovesiculite Obs: exame βHCG em homem = câncer de testículo Espermograma ✓ Quantidade, morfologia, vitalidade e motilidade dos espermatozoides ✓ Tipos A, B, C, D = velocidade (decrescente) ✓ Fertilidade (+50% A e B) ✓ Volume e constituição do sêmen ✓ Após vasectomia, análise criminalista Secreção de Orofaringe INDICAÇÃO MÉDICA: detecção de processos infecciosos, avaliação da flora normal do local, diagnóstico de faringites (crise de garganta) / quando há recidiva ✓ Streptococcus pyogenes: causa auto-imune (febre reumática – anticorpo ataca o rim) ✓ Coleta em jejum após higiene oral com água e bochechos ✓ Tratamento empírico: amoxicilina e azitromicina ✓ Recorrência → bactérias resistentes ✓ Com pus: infecção bacteriana ✓ Não utiliza coloração gram ASO ou ASLO ✓ Antiestreptolisina O ✓ Anticorpo direcionado contra componentes celulares do estreptococo ✓ Diagnóstico de febre reumática (+clínico) ✓ Determinação isolada de ASLO sem a clínica de FR → apenas contato ✓ Quantitativa: quanto mais, mais recente ✓ Tratamento e acompanhamento para observar a diminuição (benzetacil) Feridas, abscessos e exsudatos ✓ Furúnculos (cabeça de prego) ✓ Úlceras, Fústulas ✓ Abscessos, Drenados ✓ Mordidas e picadas de animais ✓ Úlceras de decúbito / depressão / escaras Aspirado Traqueal ✓ Pacientes entubados ou traqueostomizados ✓ Através da sonda de aspiração de calibre adequado e estéril ✓ Colonização do trato respiratório (pode entrar na circulação) ✓ Cortar a ponta da sonda com tesoura estéril, colocando-a em recipiente estéril e levando imediatamente ao laboratório Ponta de Cateter ✓ Infecções devem ser diagnosticadas imediatamente ✓ Pode cair na corrente sanguínea ✓ Bacteremias e fungemias ✓ Sinais inflamatórios no local de inserção: eritemas, pus, rubor ✓ Comprometimento da 1ª barreira ✓ Perfil de resistência – profilaxia Líquor ✓ Sinais clínicos: suspeita de meningite ✓ Coleta invasiva com riscos para o paciente ✓ Coleta em 3 tubos de 1,5ml MATERIAL: 5ml de líquido cefalorraquidiano CUIDADOS: enviar rapidamente / não refrigerar INTERFERÊNCIA: antibiótico 1. Análises bioquímicas e sorológicas 2. Microbiológico 3. Contagem de células Meningites ➢ Purulenta → neutrófilos, diminuição de glicose (<30mg/100ml), proteínas aumentadas, bacterioscopia direta positiva, cultura positiva ➢ Viral → linfócitos, glicose normal ou levemente aumentada, bacterioscopiadireta negativa, cultura negativa ➢ Tuberculosa → linfócitos, glicose diminuída, proteínas bastante elevadas (>100mg/100ml) – formação de reticulo, BD-ZN positivo, cultura- isolamento de Koch