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CENTRO UNIVERSITÁRIO DE TEOLOGIA APLICADA- UNINTA CURSO DE BACHARELADO EM ODONTOLOGIA IAMARA CRUZ LIMA RELATÓRIO: PROCESSOS INFECCIOSOS II SOBRAL/CE 2020 SUMÁRIO Introdução .......................................................................... Técnica utilizando swab...................................................1 Objetivo............................................................................... Materiais............................................................................. Métodos.................................:............................................ Conclusão........................................................................... Coloração de gram (caracterização macroscópica e microscópica dos organismos)...................................... 2 Objetivo.............................................................................. Materiais............................................................................ Métodos.................................:........................................... Conclusão.......................................................................... Isolamento de bactérias 3 Objetivo............................................................................ Materiais.......................................................................... Métodos.................................:......................................... Conclusão........................................................................ Antibiograma e resultado 4 Objetivo............................................................................ Materiais.......................................................................... Métodos.................................:......................................... Conclusão........................................................................ Coloração de gram com bactérias orais 5 Objetivo............................................................................ Materiais.......................................................................... Métodos.................................:......................................... Conclusão........................................................................ INTRODUÇÃO Independente dos diferentes tipos de microorganismo, todo sistema biológico se caracteriza por possuir reprodução, alimentação, eliminação de agentes tóxicos e adaptação ao seu habitat. Além disso, todos os microorganismo possuem estruturas biológicos, fisiológicas e genéticas que nos permitem conhecê-los melhores, quais seres vivos nos proporcionam vantagens e quais nos trazem desvantagens. A microbiologia nos permite descobertas incríveis a respeito do desenvolvimento, reprodução e morte dos organismos. Dessa forma, existem também maneiras diferentes de estudarmos de forma mais enfatizada esses microorganismo. Assim sendo, este relatório tem como objetivo demostrar algumas dessas técnicas feitas de forma prática na instituição UNINTA, por meio do professora Vassiliepe Arruda. Logo, foi preciso o isolamento de alguns tipos de microorganismo para que as práticas fossem realizadas, assim sendo, esse isolamento foi feito através de algumas técnicas como a utilização de swab, técnica essa para captura de microorganismo, a técnica de coloração de gram, usada como forma de identificar os tipos de bactérias por meio de corantes e a produção de antibiograma, técnica essa para analisar qual antibiótico seria mais eficiente para determinado microorganismo e por fim a técnica de coloração de gram em bactérias orais. Diante disso, o relatório dará início relatando em ordem o que houve em casa aula prática. 1 Primeira aula prática de processos infecciosos II Captura de microorganismo com o uso do swab 1.1 OBJETIVO O foco da primeira aula prática era capturar microorganismo da capa do celular e da orelha por meio do swab para que pudéssemos depois de 24 horas analisar se havia tido a formação de colônias de microorganismo ou não. 1.2 MATERIAIS Na primeira aula prática foram utilizados alguns matérias como um pincel, o swab, uma placa de petri, um tubo contendo NaCl, uma lamparina e os microorganismo da capa do celular e da região da orelha. 1.3 MÉTODOS A aula ocorreu no dia 0 de fevereiro do ano corrente, no laboratório de microbiologia, ministrada pelo professora Vassiliepe Arruda. De início, a turma no caso a t13 foi dividida em grupos com 12 pessoa, logo, no dia da aula prática foram preparar equipamentos usados na aula para cada pessoa presente no momento. Na primeira parte da aula foi preciso separar os microorganismo da capa do celular e da orelha, sendo esse processo feito através de um pincel, nesse caso foi feito uma linha no meio da placa de petri. Logo após, tivemos que pegar o swab por baixo para não infectar e, mergulhar dentro de um tubo com NaCl e passar na capa do celular. Depois tivemos que fazer o mesmo para a parte da orelha, sendo que cada microrregião ficava em um lugar específico da placa. Finalizando fechando a placa e esperando 24 horas para abalizarmos os resultados. 1.4 CONCLUSÃO Pôde-se concluir com a prática que a parte da placa que continha os microorganismo da capa de celular possuía um desenvolvimento de colônia inferior comparado com os microorganismo capturados da orelha. 2 Segunda aula prática de processos infecciosos II Preparo da lâmina juntamente a coloração de gram 2.1 OBJETIVO Essa aula prática tem como objetivo complementar a primeira aula prática de processos infecciosos II, além de focar no preparo da lâmina com microorganismo diferentes e a análise desses organismos por meio da técnica de coloração de gram e do microscópio. 2.2 MATERIAIS Durante a segunda aula prática foram utilizados os matérias como uma piceta lamparina, NaCL, uma lâmina de microscopia, uma alça de platina, corantes (cristal violeta, lugol, descolorante e fuscina) é um suporte para colocar a lâmina em cima. 2.3 MÉTODOS A aula ocorreu no dia 0 de fevereiro do ano corrente, no laboratório de microbiologia, ministrada pelo professora Vassiliepe Arruda. De início, a turma no caso a t13 foi dividida em grupos com 12 pessoa, logo, no dia da aula prática foram preparados os equipamentos usados na aula para cada pessoa presente no momento. A aula prática começou com os estudantes utilizados uma gota de NaCl e colocando no meio da lâmina microscópica, logo após a alça foi flambada e com a mesma foi tirada uma colônia de dentro da placa de petri cultivada na aula anterior podendo ser do material coletado da região da orelha ou da capa do celular e depois desse procedimento a lâmina foi posta sobre a lamparina como meio de fixar o material. Diante disso, foi enfim começado a coloração de gram, de início foi colocado sobre a lâmina o primeiro corante no caso o cristal violeta é esperado 1 minuto para ele fazer efeito e depois desse horário a lâmina foi lavada com água destilada, o segundo corante usado foi o lugol e tbm foi esperando 1 minuto e novamente lavado com água destilada, em seguida foi usado o descolorante e a fuscina para ambos os corante foi esperado 30 segundos e também foram lavados com água destilada. Finalizando secando a lâmina e levando para o microscópio para ser observada e para que pudéssemos diferenciar os microorganismo através da coloração. 2.4 CONCLUSÃO Através da observação microscópica e da coloração de gram foi possível a visualização de bactérias com o tom mais roxo sendo assim bactérias gram positivas.Imagem 1: Bactérias gram positivas 3 Terceira aula prática de processos infecciosos II Isolamento de bactérias 3.1 OBJETIVO O objetivo da terceira aula prática de processos infecciosos II tem como foco principal o isolamento de bactérias, na tentativa de purificar a placa já infectada produzida na segunda aula prática. 3.2 MATERIAIS Os equipamentos utilizados durante a prática foram uma alça microbiológica de platina, um tubinho cm NaCl, um frasco com fogo, uma placa com colônias de bactérias da orelha e da capinha do celular de alguns colegas de turma e outra placa limpa. 3.3 MÉTODOS A aula ocorreu no dia 02 de fevereiro do ano corrente, no laboratório de microbiologia, ministrada pelo professora Vassiliepe Arruda. De início, a turma no caso a t13 foi dividida em grupos com 12 pessoa, logo, no dia da aula prática foram preparados os equipamentos usados na aula para cada pessoa presente no momento. Na primeira parte foi preciso flambar a alça até que ela ficasse vermelha e, logo após deixar esfriar um pouco. Depois da alça já flambada tivemos que capturar uma ou mais colônias sendo essas idênticas, depois desse procedimento pegamos a alça com as colônias e colocamos dentro de um tubo, na qual, continha NaCl, e agitamos em um agitador, depois de flambar novamente a alça ela foi depositada no tudo já agitado até tirar um volume da alça, como se fosse uma gotinha, caso a alça esteja torta a gotinha não criava forma na alça. Por fim, pega o volume da alça e passa levemente na placa nova, apenas usando a ponta da alça de cantinho em cantinho e quando chegar no último cantinho da placa faz um risco em forma de zigue zagueiro. Imagem 2: Essa primeira imagem mostra os equipamentos usados na aula prática, uma lamparina, uma alça , duas placas, uma contaminada por microorganismo e outra nova e por fim um tubo transparente com NaCl dentro. Imagem 3: A primeira placa está infectada com microorganismo da orelha e da capinha do celular de um dos estudantes de aulas práticas anteriores, enquanto a segunda da placa está intacta. Imagem 4: Essa é uma imagem na lousa explicando todo o procedimento da aula prática. 3.4 CONCLUSÃO Nenhum dos isolamento feitos durante a aula prática funcionou. 4 Quarta e Quinta aula prática de processos infecciosos II Preparo de antibiograma e discussão 4.1 OBJETIVO Analisar quais antibióticos apresentavam melhores efeitos para inibir a bactéria utilizada na aula prática, no caso a Pseudomonas. Aerogenosa. 4.2 MATERIAIS Durante a quarta aula de processos infecciosos II foram utilizados alguns equipamentos como uma lamparina, uma pinça, uma alça microbiológica de platina uma placa com gel contendo uma marcação para passar a alça, um tubo contendo a pseudomona, álcool na qual foram mergulhada, a pipeta, e a pince. Por outro lado, os equipamentos usados durante a quinta aula foi uma placa já preparada com antibióticos e com a pseudomona é um paquímetro para medir o alo de inibição. 4.3 MÉTODOS A quarta aula prática ocorreu no dia 03 de fevereiro do ano corrente no laboratório de microbiologia ministrada pelo professor Vassiliepe Arruda, o assunto da aula era sobre a técnica de isolamento de microorganismo, no caso, foi usada a bactéria pseudomona.. Como ocorreu durante as aulas práticas anteriores a turma foi dividida em grupos com 12 pessoas. O primeiro passo da aula prática de antibiograma foi pegar a pipeta, logo após o tubo com a bactéria pseudomona, foi aberto e, com o conta gotas foi retirado uma gota contendo a bactéria, então a gota foi colocada no centro da placa com gel. O segundo passo foi mergulhar a alça em álcool e depois flambar ela, para logo após ser passada na placa contendo uma gota com a pseudomona, fazendo movimentos do meio para cima e para baixo utilizando de um lado e do outro e nas diagonais. Depois desse, procedimento foi necessário com a pince pegar três diferentes tipo de antibióticos e um em branco por fim foram colocados os antibióticos escolhidos na placa com gel, em seguida coloca a ponta da pince no álcool e finalizando fechando a placa e aguardando 24 horas para ver o resultado, no caso se houver o desenvolvimento de muitas bactérias do tipo pseudomonas significa que tal antibiótico não é o mais recomendado para esse tipo de bactéria e se o resultado for diferente e não houver um significativo desenvolvimento dessa bactéria é porque tal antibiótico foi eficaz contra ela. Já na quinta aula prática de processos infecciosos ocorreu no dia 05 de fevereiro do ano corrente dando continuidade a quarta aula, mostrando assim os resultados. Como em todas as aulas a turma estava dividida e, foram usadas as placas feitas na quarta aula, com os antibióticos inseridos na pseudomona, na tentativa de inibi-las, nessa aula nós estudantes tínhamos que observar se os resultados foram satisfatórios no caso, analisar se os antibióticos usados para fazer as placas durante a a quarta aula de antibiograma foram eficientes para inibir o desenvolvimento desse microorganismo, pseudomona. Imagem 5: A imagem reapresenta os materiais utilizados durante essa aula prática, uma lamparina, tubo contendo a bactéria, uma placa com gel e, com a marcação de onde se deve passar a alça, uma pince, conta gota e uma alça. Imagem 6: Essa imagem mostra todo o procedimento que ocorreu durante a prática de preparo antibiograma. 4.4 CONCLUSÃO Com a prática pôde-se concluir que nenhum dos antibióticos obtiveram o resultado suficiente para inibir o crescimento da pseudomona, apenas o NAL obteve alo de inibição, no entanto, apresentava apenas 3 ml, dessa forma não suficiente para inibir a pseudomona, já que, para um alo de inibição seja suficiente ele precisa ter 20 ml, o alo obtido pelo antibiótico NAL seria bom para Inibir infecções urinárias. Imagem 7: A imagem mostra um alo de inibição de 3 ml proporcionado pelo antibiótico NAL. Imagem 8: Placa pronta com antibiótico com a pseudomona e o paquímetro. 5 Sexta aula de processos infecciosos II Coloração de gram com bactérias orais 5.1 OBJETIVO Aula tinha como foco fazer coloração de gram e conseguir visualizar uma bactéria bucal, através da coloração e da sua parede celular. 5.2 MATERIAIS Nessa sexta aula prática foram utilizados como materiais um lâmina pronta para receber a coloração de gram, quatro tipos de corantes diferentes, cristal violeta, lugol, na qual Sérvia como fixador, um descolorante no caso o álcool 95% a safranina, água destilada, papel toalha e um microscópio 5.3 MÉTODOS Aula ocorreu no dia 9 de fevereiro do ano corrente. No laboratório de microbiologia, aula essa ministrada pelo professor Vassiliepe Arruda. De início, a turma foi dividida, a primeira turma deu início às 13:20 e a segunda turma logo após. O professora já havia colocado todos os corantes que seriam utilizados em ordem e a lâmina já estava pronta apenas precisava ser votado pelos estudantes, nesse caso os estudantes teriam que tentarem reproduzir a coloração sozinhos, já que, haviam tido uma aula sobre, mudando apenas o tipo de microorganismo analisados. Sendo assim, o primeiro corante cristal violeta ao ser depositado na lâmina precisava-se de 1 minuto para fazer efeito na lâmina, depois desse tempo era necessário lavar a lâmina com água destilada, esse procedimento com água destilada devia ser feito durante cada deposição dos corantes e do tempo esperado para cada. Depois do corante cristal violeta, foi utilizado um fixador o lugol, tendo que esperar também 1 minuto para fazer efeito, logo após de lavar alâmina com água destilada, foi depositado um descolorante de álcool 95% tendo que esperar 30 minutos para descolorir e novamente a lâmina foi lavada com água destilada e por fim foi usado o corante safranina e também foi necessário esperar 30 minutos e água destilada para lavar. Ao terminar os corantes foi pego um papel toalha para secar a lâmina com cuidado e depois de seca observamos a lâmina no microscópio e pudemos visualizar a bactéria gram-positiva, já que a coloração era roxa, se tratava de strepcoccus. 5.4 CONCLUSÃO Com essa aula prática podemos perceber que q bactéria observada tinha formado de cocos e se agrupavam em linha reta, sendo assim strepcoccus gram positivo já que a sua colocarão era roxa. Imagem 9: Strepcoccus. Imagem 10: Diferença entre os tipos de strepcoccus.
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