Técnicas de Laboratório - Profa Louise Helena

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Técnicas de 
Laboratório
Profa. Louise Helena de Freitas Ribeiro
Biotecnologista - UFERSA
Mestra em Biotecnologia de Recursos Naturais - UFC
Doutoranda em Ciências Fisiológicas - UERN
https://docs.google.com/spreadsheets/d/12NFPMV3jhAIkdY35pYAzrgir9LBWq6Ww2a1_S5PFqGE/copy
Conteúdo Programático:
● Higiene, organização e segurança em laboratório.
● Técnicas de assepsia no trabalho laboratorial.
○ Esterilização.
○ Desinfecção.
● Instrumentação e métodos em biologia:
○ Microscopia óptica.
○ Microscopia eletrônica.
○ Espectrofotometria.
○ Cromatografia.
Higiene, 
organização e 
segurança 
em 
laboratório
Para quem 
exercitamos a 
biossegurança?
Quem são os beneficiários destas 
boas práticas?
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5
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Risco? Perigo?
É a concretização de um dano 
indesejado, de um evento 
prejudicial à integridade física, à 
psíquica ou ao patrimônio.
PERIGO
RISCO
 Probabilidade de ocorrer, de 
concretizar-se esse evento 
indesejado (perigo). 
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BPLs
● Manipulação de instrumentos e 
materiais.
● Manipulação de materiais 
cortantes e de punção.
● Ambiente e equipamentos.
● Indumentária e acessórios.
● Imunização.
● Condutas inadequadas.
Na linha de frente!
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Condutas inadequadas
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Olha a mão boba!
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Cuidado com os 
perfurocortantes!
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Limpeza e organização
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Organização e etiquetagem
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Indumentária
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Indumentária
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Adornos
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Maquiagem
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Unhas
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Imunização
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Práticas inadequadas
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Práticas inadequadas
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Práticas inadequadas
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Práticas inadequadas
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Práticas inadequadas
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Técnicas de 
assepsia no 
ambiente 
laboratorial
Princípios do Controle Microbiano
Principais métodos de controle físico
Principais métodos de controle por alta temperatura
Calor úmico: fervura
Calor úmido: autoclave
Calor úmido: pasteurização
Calor úmido: esterilização
Calor seco: estufa de esterilização
Calor seco: flambagem
Baixas temperaturas
Radiação UV
Filtração 
Dessecação: Liofilização
Atmosfera modificada
Pressão osmótica
Principais métodos FÍSICOS de controle microbiano
Controle Microbiano por Agentes Químicos
Agentes químicos possíveis
Agentes alquilantes
Fenol 
Biguanidas
Compostos com iodo
Compostos com cloro
Álcool: etílico e propílico
Peroxigênios
Metais pesados
Instrumentação e 
métodos em 
Biologia
Microscopia
Os microscópios são utilizados para ampliar objetos 
pequenos.
O tamanho de uma amostra determina quais microscópios 
podem ser utilizados para a observação efetiva
Microscopia óptica se refere ao uso de qualquer tipo de 
micros-
cópio que utilize luz visível para observar amostras. 
Microscopia eletrônica de varredura (MEV) e de transmissão 
(MET)
Microscopia ótica
Outras 
possibilidades 
da microscopia 
ótica
Campo claro: A iluminação de 
campo claro mostra as estruturas 
internas e o contorno da película 
transparente (revestimento 
externo).
Campo escuro: Contra o fundo 
preto, visto na microscopia de 
campo escuro, as bordas da célula 
estão brilhantes, algumas 
estruturas internas parecem 
brilhar, e a película é quase visível.
Contraste de fase: A microscopia 
de contraste de fase mostra uma 
diferenciação maior das estruturas 
internas e também mostra 
claramente a película.
Outras 
possibilidades 
da microscopia 
ótica
Microscopia eletrônica
Espectrofotometria
Espectrofotometria
Luz Prisma Amostra Detector Dados recolhidos em programas 
computacionais
Valor de absorbância (A) de 1,0 corresponde a uma concentração de 50 
g de DNA (fita dupla) por mililitro (mL)
Luz absorvida pelo DNA em 
solução no comprimento de 
onda de 260 nmLuz incidente Luz transmitida
Cromatografia em coluna
Cromatografia em coluna
Cromatografia em coluna
Cromatografia em coluna:
Gel filtração
Cromatografia em coluna:
Gel filtração
Vídeo
http://www.youtube.com/watch?v=0m8bWKHmRMM
Cromatografia em coluna:
Afinidade
Cromatografia em coluna:
Afinidade
Vídeo
http://www.youtube.com/watch?v=ezj9MVGCf8c
Cromatografia em coluna:
Interação hidrofóbica
Cromatografia em coluna: Interação 
hidrofóbica
Vídeo
http://www.youtube.com/watch?v=VeYxccuTSy0
Cromatografia em coluna:
Fase reversa
Cromatografia em coluna:
Fase reversa
Vídeo
http://www.youtube.com/watch?v=-ajxqELsCFM
Cromatografia em coluna:
Troca iônica
Cromatografia em coluna:
Troca iônica
Vídeo
http://www.youtube.com/watch?v=efUrl_djzQ0
“ Dúvidas?
Obrigada!
@profalouisehelena
Youtube: Profa. Louise Helena