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3º Prova Microbiologia Clínica Assuntos: Helicobacter, Clamídias, Rickettsias, Staphylococcus e Streptococcus Helicobacter pylori Digestão de alimentos: o suco gástrico presente no estômago está relacionado com a H. Pylori, o suco possui duas funções: 1- auxilia na digestão de alimentos, 2- Destruição de microorganismos. Quando se ingere alimentos contaminados, o suco gástrico já destrói as bactérias pela sua acidez, e às bactérias patogênicas sobrevivem melhor em pH neutro (próximo a 7), assim são destruídas pelo pH ácido do suco gástrico e só algumas bactérias permanecem dentro de alimentos, como exemplo: alimentos que não são bem mastigados, onde a digestão pelo suco gástrico se torna mais difícil e algumas bactérias conseguem sobreviver dentro desses alimentos, e então conseguem passar para o intestino e causar uma infecção. E outras bactérias, caracteristicamente conseguem sobreviver ao suco gástrico, como: Salmonella e H pylori. Porém a maiorias das bactérias são destruídas no pH ácido do estômago. H pylori, consegue sobreviver dentro do estômago e coloniza apenas o epitélio gástrico, ou seja, só tem afinidade por células do estômago e não de outros tecidos (não contaminam outros tecidos). H. pylori é uma bactéria gram negativa: cora-se de vermelho. Sua morfologia ajuda a sobreviver no ambiente do estômago, sendo um bacilo curvo, espiralado e liso, não forma esporos e é microaerófila Possuem como característica a alta motilidade, possuindo flagelos (multi flagelada) em sua extremidade, crescem em meio de cultura lentamente, tem receptores para células epiteliais do estômago o que confere capacidade de aderência e são produtoras de algumas toxinas. Podem sofrer pleomorfismo: ou seja, algumas vezes está em forma espiralada e em outras vezes se apresenta como coccus. Quando está em condição de estresse ambiental, que não favorece o seu crescimento, fica na forma de coccus (coccoidea) a forma cocoide não pode ser cultivada e já foi encontrada em locais de abastecimento de água e se suspeita que essa possa ser um meio de transmissão da bactéria, em um ambiente favorável, a bactéria na forma de cocos se transforma em espiralada para o seu crescimento e desenvolvimento. Origem do nome Helicobacter: Helicoidal e Pylori: Pois geralmente é encontrada no piloro do estômago , já se ligando ao duodeno e intestino. H. pylori sobrevive até 15 dias em água de rio (na forma de coccus), e no caso de modificar sua forma natural espiralada pela de um coco ainda menor pode sobreviver até um mês e meio. Quando se contamina com essa bactéria na infância, o sistema imune não consegue debelar a bactéria, então se cresce com a bactéria no estômago até que os sinais e sintomas apareçam Supõe-se que o homem seja o principal reservatório e fonte de contágio para outras pessoas (nas unhas dos manipuladores de alimentos, por exemplo, fonte de contágio). H. pylori irá morrer em pouco tempo num alimento infectado, que não é um meio adequado para esta bactéria. Para haver infecção por alimentos, seria necessária uma elevada quantidade de micro-organismos viáveis no alimento Transmissão Sabe-se que a bactéria consegue crescer facilmente no estômago, então pode-se encontrar, na saliva, placa dentária e fezes, demonstrando que as cavidades oral e fecal estão possivelmente envolvidas na transmissão da bactéria. Transmissão fecal-oral é possível Oral-ora é possivell: sua presença no suco gástrico indica a possibilidade de transmissão oral-oral Água e Falta de higiene Alimentos dificilmente transmitem a bactéria. Epidemiologia Os sintomas decorrentes da doença gástrica surgem na vida adulta, entretanto a aquisição de H. pylori ocorre na infância. Na infância por conta da incapacidade do sistema imunológico em eliminar esse microorganismo Devido à incapacidade do sistema imunológico em eliminar esse micro-organismo, acredita-se que, na ausência de tratamento, a primeira infecção por H. pylori pode persistir por toda a vida. 50% das pessoas do mundo estão contaminadas por H. pylori, dessas, 30% em países desenvolvidos e 80% em países em desenvolvimento. Afirmando que a higiene é importante para a não transmissão. 90% das pessoas que têm úlcera gástrica, estão contaminadas com H pylori, além da irritação no estômago e gastrite a bactéria pode causar um carcinoma no estômago. Fatores de virulência O estômago é revestido por uma camada de muco que protege às próprias células do estômago da acidez do suco gástrico, a Helicobacter por ser multi flagelada, consegue através dos flagelos se inserir dentro do muco, para se proteger um pouco do pH gástrico. A helicobacter é capaz de produzir uma enzima chamada urease que forma amônia no interior do estômago, que alcaliniza a região onde a bactéria está. Bactéria libera urease, transforma em amônia e alcaliniza o meio. A própria amônia danifica a parede do estômago. Além da urease a bactéria é capaz de produzir outras enzimas como exotoxinas que promovem a formação de um vacúolo dentro do estômago, para viabilizar mais ainda a proteção da bactéria, produz uma enzima, fica dentro do vacúolo que a enzima produz se protegendo do pH ácido, o gene VacA faz com que a bactéria produza exotoxina, além de outras enzimas, como enzimas que quebram o muco: mucinase. Protease: quebra a proteína do muco para conseguir se movimentar dentro do ambiente, além da lipase. Por ser uma bactéria gram-negativa, tem lipopolissacarídeos característicos da parede celular de uma bactéria gram-negativo. Os lipopolissacarídeos servem para que a bactéria se liguem a célula do hospedeiro, uma vez que às células do estômago tem receptores para esses lipopolissacarídeos. Além disso outras proteínas vão servir para facilitar a adesão da bactéria nas células do estômago Os receptores são chamados de adesina, juntamente com os lipopolissacarídeos e outras proteínas. Ainda possui algumas substâncias que vão impedir a ação do sistema imunológico como de :IL8, Gene cagA: Quando transcrito e traduzido, forma proteínas que dificulta a ação do sistema imunológico. Estirpes bacterianas (cepas de H pylori) Sintomatologia Acidez, arrotos, inchaços, vômito, falta de apetite, gases e dor abdominal Patologia Gastrite crônica, úlcera péptica, adenocarcinoma gástrico e linfoma (doença hematológica Assim que o paciente percebe a acidez gástrica, faz endoscopia Diagnóstico laboratorial Pesquisa de Urease Faz-se uma biópsia gástrica ou duodenal obtidas por endoscopias: Então faz o teste da urease com a biópsia observa se a mudança de coloração no teste da urease, se sim, indica a presença da bactéria, pois a bactéria é produtora de urease Coloração de Gram Cultura A cultura é um teste diagnóstico mais específico e importante para a determinação da sensibilidade aos antimicrobianos e também pode caracterizar o tipo de bactéria Os melhores resultados têm sido com inoculação do fragmento em meio não seletivo, como o ágar sangue A bactéria semeada cresce como pontos, que pode ser confundido com staphylo ou strepto devido ao tamanho, mas não tem característica de staphylo e strepto Cultura em ágar sangue Este tipo de método necessita de atmosfera com 5-6% de oxigênio, 8 -10% de hidrogênio, 7-10% de dióxido de carbono, 80 % de nitrogênio, além de umidade. A bactéria não gosta de crescer em ambiente 100% de oxigênio, ela é microaerófila Após semeação coloca dentro da jarra de gaspac e em vez de atmosfera de anaerobiose coloca atmosfera de microaerobiose que favorece o crescimento de H pylori A cultura é cara em relação ao teste de urease que pode ser feito no consultório Sua limitação é o custo oneroso em relação ao teste da urease, tendo sido comumente usado para fins de pesquisa A pesquisa de anticorpos é mais recomendada para o diagnóstico após o tratamento PCR: monitora resposta após tratamento, pesquisa-se material genético da bactéria no material do paciente que coletou. Metronidazol é mais usado para anaeróbios, como H pylori é microaeróbio,também pode ser usado. Os índices de erradicação de H. pylori após antibioticoterapia estão próximos de 80%. Clamídias Durante muito tempo, Chlamydia spp e Rickettsias foram estudadas como sendo virus Às Chlamydia são bactérias que tem características de vírus, São bactérias intracelulares obrigatórias (por serem incapazes de sintetizar ATP, dependendo das células hospedeiras). Necessitam infectar uma célula para conseguir sobreviver e se multiplicar assim como os vírus. A parede celular da chlamydia não é formada por peptideoglicana, se tratar com uma penicilina ou cefalosporinas , não será útil,pois não chlamydia não tem peptideoglicana para destruir a parede. Se tratar com Aminoglicosídeos,eritromicina, tetraciclina dará certo, pois a chlamydia tem sitios onde o antibiotico consegue agir (ribossomos , DNA e RNA). Não apresentam enzimas oxidativas, que são enzimas da cadeia respiratória, então são considerados parasitas de energia, isso é: que não consegue se multiplica extracelularmente, pois elas consomem oxigênio, mas quando chega na cadeia respiratória não possui as enzimas que fazem a transferência de elétrons até o oxigênio final, e por isso não conseguem formar a sua própria energia. Precisam está dentro de uma célula hospedeira que tenham essas enzimas para que completem o ciclo de formação de energia. Não possuem susceptibilidade por antibióticos que agem na peptideoglicana, mas sim por antibióticos que agem a nível de ribosomal, DNA e RNA Ciclo de vida Dimorfo: possui duas formas: 1- corpúsculo elementar que é a forma infecciosa (na imagem: corpúsculos vermelhos que penetram dentro de uma célula hospedeira e forma o fagossomo que vai fagocitar os corpúsculos elementares, vão se unir com o lisossomo e às substâncias (enzimas) produzidas no lisossomo destroem todas as bactérias que estão nesse vacúolo. O corpúsculo elementar da chlamydia impede a associação do lisossomo com o fagossomo e inibem a sua destruição, começam a crescer se multiplicando dentro do corpúsculo, até formar o corpúsculo reticulado que é um corpúsculo grande cheio de corpúsculos elementares que se rompem e liberam os corpúsculos elementares Mesmo em ambiente com temperatura elevada não são destruídas. 2- Corpúsculo reticulado: é o crescimento do corpúsculo elementar que forma o reticulado Patologias 1- Tracoma: ceratoconjuntivite crônica 2- Uretrite não gonocócica: IST, libera secreção pelo órgão genital porém não é tão purulenta, como o da gonorreia 3- Conjuntivite de inclusão: conjuntivite purulenta, quem tem essa conjuntivite também terá a infecção genital 4- Linfogranuloma venéreo: bubão inguinal Diagnóstico Laboratorial Não é um meio de cultura artificial, por ela se comportar como um virus, e virus não crescer em meio de cultura artificial a chlamydia também não cresce. É necessário fazer uma cultura de células,onde serão utilizadas células McCoy e depois injeta o material do paciente nas células, observa-se em microscópio os corpúsculo de inclusão dentro das células de 2-4 dias. Tratamento Se tratar com Aminoglicosídeos,eritromicina, tetraciclina dará certo, pois a chlamydia tem sitios onde o antibiotico consegue agir (ribossomos , DNA e RNA) Tetraciclina ou eritromicina/azitromicina (para crianças e gestantes) - agem evitando a síntese de proteínas Ricketsias São parasitas intracelulares obrigatórios • São transmitidos por artrópodes infectados: piolhos,carrapatos,pulgas e/ou ácaros • São bacilos ou cocobacilos Gram negativos com uma parede celular em camada dupla Gram-negativa. • Coram-se fracamente devido à sua ocorrência dentro das células do hospedeiro (são parasitas intracelulares obrigatórios) • São melhor visualizadas sob microscopia óptica com um dos corantes policrômicos como Giemsa ou Macchiavello (que são corantes de célula) • Têm afinidade pelas células endoteliais localizadas por todo o sistema circulatório. Por isso causam infecções generalizadas. • Trombos focais são formados em vários órgãos incluindo a pele e uma variedade de pequenas hemorragias e distúrbios hemodinâmicos produz os sintomas. Patologias 1. Febre maculosa das montanhas rochosas A infecção é iniciada pela picada de um carrapato de madeira ou de cão infectado. Os carrapatos transmitem o organismo por seus ovos , de uma geração para outra. A doença é caracterizada por febre alta e mal estar, seguidos por um exantema proeminente que (petequias), invialmente é macular, mas pode se tornar petequial ou hemorrágico. Agente: Ricketsia rickettisii Diagnóstico Laboratorial Pois tetra em gravida faz o bebe nascer com dentes amarelados
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