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Sandy Caroline • ‘’Para se obter sucesso no cultivo, é necessário o conhecimento das exigências nutricionais do micro-organismo a ser isolado’’ Meio de cultura: solução ou gel nutriente utilizado para promover o crescimento de microrganismos em laboratório Tubo de ensaio – meio líquido : crescimento mais rápido Meio sólido: meio líquido + ágar 1,5% - células imobilizadas É o ágar que faz o meio ficar em forma de gel Colônia= aglomerado de células; formada a partir de uma célula ‘’ todas as células de uma colônia são idênticas ‘’ TIPO BÁSICO DE MEIOS DE CULTURA Meio quimicamente definido: a composição química exata do meio é conhecida; preparada com quantidades precisas de substâncias químicas altamente purificadas Meio indefinido (complexo): a composição química do meio não é conhecida; preparado com compostos químicos derivados da digestão de produtos naturais, como a caseína, carne, soja, levedura Meio enriquecido: contém nutrientes especiais que permitem o crescimento de um grupo específico de organismo; exemplos: Brain heart infusion (BHI) para favorecer o crescimento de microrganismos fastidioso, como o Streptococcus, pneumococcus e meningococcus; THM: tioglicolato e cisteina para anaeróbios MEIOS DE CULTURA ESPECIAIS Fornecem informações especiais sobre os microrganismos, auxiliando na caracterização e identificação Meio seletivo: favorece o crescimento de alguns microrganismos e suprime o crescimento de outros Meio diferencial: proporciona uma mudança visível, quando ocorre uma reação química especifica; exemplo: mudança na cor (ágar sangue é um exemplo) Meio seletivo e diferencial Meio reduzido: favorece o crescimento de microrganismos anaeróbios COLETA DE AMOSTRAS MICROBIOLÓGICAS Amostras devem ser: ❖ Livres de contaminação externa ❖ Representativas do universo do qual foram colhidas ❖ Examinadas logo após a obtenção (de preferência) ❖ Armazenadas sob baixas temperaturas Inoculação em meio líquido – plaqueamento em meio sólido – colônias isoladas CARACTERIZAÇÃO DO MICRORGANISMO Determinação de características: ❖ Morfológicas (microscopia de luz) ❖ Fisiológicas (testes bioquímicos) ❖ Resistência (antibiograma) ❖ Sorológicas (imunoensaios) Sandy Caroline • ❖ Genéticas (PCR) CARACTERIZAÇÃO MORFOLÓFICA Análise da morfologia colonial Análise da morfologia celular (tamanho, forma e arranjo celulares) esfregaço e coloração simples ou diferencial CARACTERIZAÇÃO FISIOLÓGICA Testes bioquímicos: análise da atividade enzimática; teste de fermentação de substratos ↪ Utilizados na identificação rápida de microrganismos; os resultados variam de 4 a 24 horas Perfil de utilização de substratos por multiensaios ↪ Contêm um grande número de meios seletivos e diferenciais ↪ Ocupam pouco espaço em incubadora ↪ Oferecem uma maneira mais rápida e confiável para a identificação de patógenos ANÁLISE DA ATIVIDADE ENZIMÁTICA Prova da coagulase: Capacidade do microrganismo de coagular o plasma sanguíneo Prova da catalase: a catalase converte o peróxido de hidrogênio em oxigênio molecular e água CARACTERIZAÇÃO DE RESISTÊNCIA Teste de sensibilidade a antibióticos (antibiograma)