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1 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA ÁCIDOS NUCLEICOS - EXTRAÇÃO DO DNA DO MORANGO ÁCIDOS NUCLEICOS EXTRAÇÃO DO DNA DO MORANGO O material genético dos seres vivos é formado por grandes cadeias orgânicas, basicamente constituídas de um açúcar com cinco carbonos (pentose), um íon fosfato e uma base nitrogenada. Esses três constituintes formam os chamados nucleotídeos presentes em toda molécula de DNA. O DNA, ou ácido desoxirribonucleico, é um tipo de ácido nucleico formado por uma dupla hélice de nucleotídeos unidos por pontes de hidrogênio através das bases nitrogenadas, Figura 1 (LEHNINGER, et al., 2014). Figura 1 – Estrutura química do desoxirribonucleico. Um outro tipo de ácido nucleico é o RNA, ou ácido ribonucleico. A diferença básica entre essas moléculas é que na molécula de DNA existem duas longas fitas de nucleotídeos enroladas em forma de dupla hélice, enquanto na molécula de RNA existe apenas uma única fita, sintetizada pelo próprio DNA. Funcionalmente, o DNA é responsável por armazenar e transmitir toda a informação genética de cada ser vivo. Já a molécula de RNA atua na síntese proteica. Além disso, as células vegetais e animais são bastante parecidas, com algumas diferenças como as paredes celulares e presença de cloroplastos (LEHNINGER, et al., 2014). mailto:contato@algetec.com.br 2 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA ÁCIDOS NUCLEICOS - EXTRAÇÃO DO DNA DO MORANGO As frutas são constituídas basicamente de semente e pericarpo (três partes: casca, parte comestível e membrana que envolve a semente), como por exemplo, o abacate, o coco e o morango. O DNA dessas frutas pode ser extraído de modos muito similares. Dentre as frutas utilizadas para a extração do DNA, destaca-se o morango. Ele é uma fruta vermelha, que tem várias espécies, sendo a principal delas, a Fragaria. Essa fruta possui minerais, como por exemplo, Cálcio, Potássio e Ferro. Além disso, possui antioxidante a base de flavonoides, fibras alimentares e uma grande quantidade de DNA. É uma fruta macia, fácil de homogeneizar e, também, quando madura, produz enzimas que degradam a pectina e a celulose. No laboratório virtual você irá extrair o DNA do morango. Para a extração do DNA do morango é necessário o uso de detergente, cloreto de sódio (NaCl) e o etanol no processo. O cloreto de sódio aumenta a força iônica da solução com a ionização dos íons Na+ e Cl-. Isso proporcionará um ambiente favorável para a extração do DNA, visto que os grupos fosfatos serão neutralizados pelo sal. O lauril éter sulfato de sódio, molécula presente no detergente, tem a função de desestruturar os lipídios localizados nas membranas, promovendo a ruptura de todo o conteúdo celular, inclusive o DNA, que ficará disperso na solução. Em etanol há formação de aglomerados de DNA, pois o álcool desidrata essas moléculas, de forma que este não mais fica dissolvido no meio aquoso. Como o DNA tem menor densidade que os outros constituintes celulares, ele surge na superfície do extrato, podendo ser coletado com um palito. Além disso, quanto mais gelado o álcool, menos solúvel será o DNA (COSTA, et al., 2004). mailto:contato@algetec.com.br 3 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA ÁCIDOS NUCLEICOS - EXTRAÇÃO DO DNA DO MORANGO REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS COSTA, R.; GOMES, N. C. M.; MILLING, A.; SMALLA, K. Protocolo otimizado para extração simultanea de DNA e RNA de solo. Braz. J. Microbiol. 2004, 35, n.3, pp.230-234. LEHNINGER, A.L.; NELSON, D.L.; COX, M.M. Princípios de Bioquímica. 6. ed. São Paulo: Sarvier, 2014. mailto:contato@algetec.com.br
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