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CENTRO DE EDUCAÇÃO A DISTANCIA UNIVERSIDADE UNINASSAU POLO PALMAS-TO RELATORIO DE BIOQUIMICA HUMANA – Aula 2 BIOQUIMICA HUMANA – NUTRIÇÃO Paraiso do Tocantins 2021 RELATORIO DE BIOQUIMICA HUMANA – Aula 2 BIOQUIMICA HUMANA – NUTRIÇÃO Relatório apresentado para aquisição de conhecimentos e avaliação parcial de nota das atividades da matéria de Bioquímica Humana do curso de Nutrição da Universidade Uninassau, Campus Palmas-TO. Paraiso do Tocantins 2021 RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. Está reação é específica para substâncias que possuem pelo menos dois grupos CO-NH unidos por carbono ou nitrogênio como ocorre no biureto, que empresta o seu nome para a reação. Biureto é o nome dado à estrutura originada a partir da 43 decomposição da uréia, quando esta é submetida a uma temperatura de, aproximadamente, 180oC As proteínas e seus produtos de hidrólise que contém duas ou mais ligações peptídicas dão resultado positivo neste teste. A reação é também positiva para as substâncias que contém 2 grupos carbamínicos (-CO-NH2) ligados diretamente ou através de um único átomo de carbono ou nitrogênio. Esta é uma reação geral para proteínas. Esse fenômeno deve-se à formação de um complexo entre o íon Cu2+ , presente no reativo, e os átomos de nitrogênio presentes na molécula. 1. Materiais utilizados. Vidrarias: • 1 pipeta de vidro de 5mL • 2 pipetas de vidro de 1mL 44 • 2 Tubos de ensaio Reagentes: • Reativo de Biureto • Solução de ovoalbumina 10% Acessórios: • Estante para tubos de ensaio • Pêra de borracha • Papel Toalha • Descarte para pipetas Frasco com água destilada 1. Responda as Perguntas: A) Qual o princípio bioquímico da Reação de Biureto? É uma reação qualitativa ou quantitativa? R: Biureto é um reagente analítico, composto de Hidróxido de Sódio (NaOH 2,5N) e sulfato de cobre 1% (CuSO4). E uma reação qualitativa. B) Qual a ligação específica que reage com o reagente de Biureto e as moléculas identificadas? R: São 2 carbonilas (-CONH2) ligadas diretamente ou através de um único átomo de carbono ou nitrogênio. Os compostos com duas ou mais ligações peptídicas atingem uma coloração violeta quando submetidos a uma solução diluída de sulfato de cobre em meio alcalino. C) Comente os resultados obtidos na prática realizada. R: Tubo 1 (ovoalbumina): formação de coloração violácea indicando positivo para proteína. Tubo 2 (Água destilada): Não há mudança de cor, indicando reação negativa D) Exemplifique algumas aplicações do uso da Reação de Biureto. R: Podemos exemplificar na comprovação da existência de proteínas (macromoléculas que apresentam pelo menos dois aminoácidos ligados por meio de uma ligação peptídica) em alimentos ou soluções. 4. Conclusão sobre a identificação de proteínas através da Reação de Biureto. R: As proteínas que possuem grupamento fenil (-C6H5); reagem com HNO3 formando compostos fortemente coloridos. Esta prática teve como objetivos identificar aminoácidos com grupo aromático (cadeias laterais). TEMA DE AULA: REAÇÃO DO LUGOL (IDENTIFICAÇÃO DE POLISSACARÍDEOS) RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. O iodo metálico presente no lugol forma complexos com a cadeia de alfaamilose do amido que é um polissacarídeo formado um composto de cor roxo a azulado. Tendo como objetivo Identificar a presença do amido pela formação de complexos com iodo presente no reativo de lugol. 2. Materiais utilizados. Vidrarias: • 2 pipetas de vidro de 1mL • 2 Tubos de ensaio Reagentes: • Lugol • Solução de amido 1% Acessórios: • Estante para tubos de ensaio • Pêra de borracha • Papel Toalha • Descarte para pipetas • Frasco com água destilada 3. Responda as Perguntas: A) Qual a composição química do reagente Lugol? R: A solução de Lugol 5%, que é composta por iodeto de potássio (10%), iodo elementar inorgânico (5%) e água destilada B) Descreva a fundamentação teórica da Reação do Lugol? R: O amido, é um polissacarídeo produzido em grande quantidade nos vegetais, e é constituído por dois outros polissacarídeos estruturalmente diferentes: amilose e amilopectina. A molécula da amilose não apresenta ramificações e, no espaço, assume conformação helicoidal (forma de hélice). A amilopectina apresenta estrutura ramificada, sendo que os "ramos" aparecem a cada 24-30 moléculas de glicose. A ligação entre os átomos de carbono das unidades de glicose nas duas estruturas são do tipo alfa 1-4. C) Qual a indicação deste teste? R: Identificar a presença do amido pela formação de complexos com iodo presente no reativo de lugol. D) Comente os resultados obtidos na prática correlacionando com a presença ou ausência de polissacarídeos. R: Tubo 1 (Amido): Mudança de cor da solução transparente ou leitosa para uma cor azul intensa, resultado positivo. Tubo 2 (Água destilada): Não há mudança de cor da solução, reação negativa. 4. Conclusão sobre a identificação de polissacarídeos através da Reação do Lugol. R: Conclui que na presença de iodo pode sofrer reações de complexação, com a formação de compostos coloridos variando do azul intenso ao vermelho- violácea. Com isso, objetivou-se identificar a presença de amido em alimentos rotineiros, utilizando o lugol como reagente. REAÇÃO DE SAPONIFICAÇÃO RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. Os lipídios podem ser caracterizados pelas suas características físico-químicas. Em geral são insolúveis na água e solúveis em solventes apolares. Os triglicerois, na presença de bases, podem ser hidrolisados liberando glicerol e sais de ácidos graxos (sabões). Os sais de ácidos graxos apresentam uma característica anfipática onde em solução aquosa diminuem a tensão superficial da água formando espuma sob agitação. Com o objetivo de realizar a hidrólise alcalina dos triglicerídeos presentes no óleo. 2. Materiais utilizados. Vidrarias: • 4 pipeta de vidro de 5mL • 2 pipetas de vidro de 1mL • 3 Tubos de ensaio Reagentes: • Óleo de soja ou de girassol • Solução etanólica de hidróxido de potássio 5% • Solução de Cloreto de cálcio 10% Equipamentos: • Banho-Maria Acessórios: • Estante para tubos de ensaio • Pêra de borracha • Pinça • Termômetro • Cronômetro • Papel Toalha • Descarte para pipetas • Frasco com água destilada 3. Responda as Perguntas: A) Explique bioquimicamente o que é um são ácido graxo e o triacilglicerol? R: Os ácidos graxos pertencem a uma categoria de moléculas biológicas chamadas lipídios (ou gorduras), que geralmente são insolúveis em água, mas altamente solúveis em solventes orgânicos. Triacilgliceróis são prontamente reconhecidos como óleos ou gorduras (ver óleo vegetal e gordura), produzidos e armazenados nos organismos vivos para fins de reserva alimentar. B) Explique a fundamentação teórica da Reação de Saponificação. R: E explicar a hidrólise alcalina dos triglicerídeos presentes no óleo. C) Comente os resultados obtidos na prática de Saponificação explicando a formação de espuma em um tubo e não formação em outro tubo. R: Tubo 1: Formação de espuma indica a presença de sais de ácidos graxos Tubo 2: formação de precipitado indica a presença de sabões de cálcio que não formam espuma. 4. Conclusão sobre a Reação de Saponificação. R: Concluímos que na reação de saponificação de triglicerídeos, é produzida, além do sabão, a glicerina, que é aproveitada pela indústria para ser usada na fabricação de cosméticos, como cremes e sabonetes. TEMA DE AULA: SOLUBILIDADE DOS LIPÍDIOS RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. Devido à natureza apolar, os lipídios apresentam baixa solubilidade em água e boa solubilidade em solventes orgânicos. Tendo como objetivo verificar a solubilidade dos lipídeos nos mais variados tipos de solventes. 2. Materiais utilizados. Materiais Vidrarias: • 5 pipetas de vidro de 1mL • 5 Tubos de ensaio Reagentes: • Ácido Clorídrico 0,1N • Hidróxido de Sódio 0,1N • Etanol• Éter etílico Acessórios: • Estante para tubos de ensaio • Pêra de borracha • Papel Toalha 3. Responda as Perguntas: A) Descreva a estrutura química dos lipídios. R: Compostos por carbono, hidrogênio e oxigênio. Mas podem conter nitrogênio, fósforo e enxofre. B) Explique por que os lipídios são insolúveis em soluções aquosas. R: Por que em solução aquosa, gotas de gordura (que possuem caráter hidrófobo), sob agitação, são fragmentadas em partículas menores. C) Explique o princípio bioquímico do Teste de Solubilidade dos Lipídios. R: Sabendo que os lipídios são moléculas apolares e conhecendo o princípio da solubilidade que "semelhante dissolve semelhante", certamente as amostras que contêm lipídios formarão soluções de apenas uma fase com as substâncias apolares; e com as substâncias polares formarão soluções onde observaremos mais de uma fase. D) Comente os resultados obtidos na prática correlacionando com o princípio químico da solubilidade das moléculas. R: Foram obtidos o óleo apresentar solubilidade no tudo 5, baixa no tubo 4 e insolúvel nos 1, 2 e 3. 4. Conclusão sobre a Reação de Solubilidade dos Lipídios. R: Conclui que quanto maior o número de carbonos da cadeia de um ácido graxo saturado, maior o seu ponto de fusão e menor a solubilidade. Lipídeos compostos por AGs saturados tem alta probabilidade de estar em estado sólido em temperatura ambiente. Quanto maior o número de insaturações, menor o ponto de fusão. REFERENCIAS CONSULTADAS LEHNINGER, A.L., NELSON, D.L. & COX, M.M. Princípios de Bioquímica. 2ª ed., Editora Sarvier, São Paulo, 1995. GUYTON, Arthur C. & HALL, John E. Tratado de Fisiologia Médica. 11 ed. Rio de Janeiro: Elsevier, 2006. VALIM, Yara Maria Lucisano (Coord). Práticas de Bioquímica- Conceitos Gerais. USP: Ribeirão Preto, 2008.