Fenotipagem sanguínea- Patologia Clínica

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Patologia Clínica
Ivilly Dayana- 2020/1
Fenotipagem Sanguínea
-Antígenos do sistema ABO são carboidratos na
membrana plasmática das hemácias
- antígeno: molécula de adesão antigênica, que
serve também para o transporte de antígenos e
carreamento proteico;
Antígeno H: grupo sanguíneo O
• Este é considerado o “antígeno base”;
• Paraglosididase: enzima que adiciona o
paraglosídeo a membrana na HC;
• Fucosiltransferase: enzima que adiciona o fucosil
para formação do antígeno;
Antígeno A:
• Paraglosídeo + Fucosil +
• N-acetil galactosamil, com a enzima N-acetil
galactosamil transferase;
Antígeno B:
• Paraglosídeo + Fucosil +
• D-galactose, com a enzima galactosamil
transferase;
Plasma:
• O: anticorpos contra A e B;
• A: anticorpos contra A;
• B: anticorpos contra B;
• AB: não possui anticorpos;
• Esses anticorpos são IgM (temporários – 6
meses), porque carboidratos não
conseguem sintetizar antígenos IgG;
-Sistema ABO é formado na quinta semana de
vida intra-uterina
-genes A e B controlam a síntese de enzimas
específicas responsáveis pela adição de um único
resíduo de carboidrato (N-acetil-galactosamina
no grupo A e Dgalactose no grupo B) em uma
glicoproteína básica antigênica ou em um
glicopeptídeo com terminal açúcar de L-fucose
no eritrócito, conhecida como substância H.
-Prova direta ou globular (Beth Vincent):
adiciona anticorpos nas hemácias
consiste em pôr em contato soros-teste
conhecidos – anti-A, anti-B e anti-AB – com
glóbulos vermelhos (GV) a serem testados, para
identificar a presença ou não dos antígenos A e B.
Assim, serão definidos os grupos sanguíneos: A, B,
AB, O (pesquisa dos antígenos fixados nas
hemácias do paciente.)
detecta antígenos, feito com hemácias
-Prova Reversa (ou prova de Simonin):
adiciona hemácias ao plasma
pesquisa o anticorpo no soro/plasma do paciente.
Deve ser feita com hemácias tipadas A e B, com
atenção para o fato de que o anticorpo B costuma
ser mais fraco (título fraco) que os demais
anticorpos. A prova reversa é uma contra-prova
fundamental para a conclusão do exame.
detecta os anticorpos, feito com o plasma
Exemplo: exame com um sangue A
• prova direta: presença de antigenos A;
• prova reversa: presença de anticorpos: anti-b
RH: Anticorpos anti-Rh raramente ocorrem de
forma natural, a maioria é imune e resulta de
transfusão ou gravidez anterior.
Fator RH → D → mais de 100 mil classes expressões
do antígeno na hemácia. Os anticorpos naturais
são da classe IgM, que não ultrapassam a
placenta, pois a placenta não possui receptores
de cadeia Mi e o IgM é grande e pentamérico
IgG passa pela placenta
** Recém nascido:
vida média do anticorpo é de 6 meses, fazendo
testagem em recém nascido ele pode ter o
anticorpo da mãe.
D Fraco → Indivíduos portadores de D fraco
apresentam menor expressão de antígenos D
nas hemácias
Não aglutina isoladamente porque não tem
antígeno D suficiente. ( tem que usar coombs)
•D normal: 10.000 a 25.000 sítios antigênicos
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•D fraco 66 a 5.000
As hemácias D fraco são consideradas como Rh
POSITIVO, podendo provocar alo-imunizações
transfusional ou feto-materna.
Se Rh negativo: conferir se ele não é D fraco.
Para isso, deve-se usar soro de Coombs
(antiglobulina humana)
• Se reagir: Rh +
• Se não reagir: Rh –
O fenótipo Bombay: tem problema na formação
do seu antígeno. “Falso O” pois apesar de
apresentar-se como O, seu antígeno H é
defeituoso. Assim, todo “O” tem que
pesquisar para saber se ele é Bombay. Tem que
doar sangue para si mesmo (deixar
reservas). Tipos de defeitos::
• Ausência de fucosil;
• Paraglosídeo defeituoso;
• Fucose defeituosa;
• Sem fucose e paragosídeo;
Antígeno Matergam → Anticorpo só com a
região FAB. Administrado 24h antes do parto.
Evita que a hemácia fetal seja capturada pelos
macrófagos maternos. Ele neutraliza o
antígeno D da hemácia fetal, tem
imunoglobulinas anti- rh
Anticorpos naturais: anticorpos formados contra
antígenos não presentes no organismo e sem
necessidade de contato prévio. Ex: anti-A e anti-B.
geralmente são imunoglobulinas M (IgM).
Anticorpos irregulares: anticorpos formados a
partir da exposição a um antígeno. Ocorrência
não esperada. Ex: aloimunização pelo sistema Rh.
Teste de Coombs:
Coombs direto → detecta anticorpos ligados aos
eritrócitos, produzidos pelo próprio organismo
ou recebidos por uma transfusão de sangue. É
usado para determinar se o anticorpo de ligação
de eritrócitos (IgG) ou complemento (C3) está
presente nas membranas dos eritrócitos. Os
eritrócitos do paciente são incubados com
anticorpos anti-IgG humana e C3. Se a IgG ou o
C3 estiverem ligados às membranas dos
eritrócitos, ocorre aglutinação. Frequentemente
utilizado para a detecção de anemia hemolítica, o
teste de Coombs direto é aplicado no
recém-nascido com sangue Rhpositivo cuja
mãe possui sangue Rh-negativo. O teste verifica
se a mãe produziu anticorpos contra o antígeno e
se estes se deslocaram pela placenta para o bebê.
Resultado negativo → significa que o sangue não
tem anticorpos ligados aos eritrócito
Resultado positivo → significa que o sangue tem
anticorpos contra os eritrócitos. Pode ser causado
por uma transfusão incompatível ou estar
relacionado a certas condições, como a anemia
hemolítica ou a doença hemolítica do
recém-nascido.
Coombs indireto → detecta anticorpos séricos
IgG antieritrócitos. O soro/plasma do paciente é
incubado com um reagente para eritrócitos;
então o soro de Coombs (anticorpos contra IgG
humana ou anti-IgG humana) é adicionado. Se
ocorrer aglutinação, anticorpos IgG (anticorpos
ou aloanticorpos) contra eritrócitos estão
presentes. Estes anticorpos podem atacar os
eritrócitos, mas não estão ligados a eles.
Normalmente, é realizado para revelar a
presença de anticorpos no sangue de um
receptor ou doador antes de uma transfusão.
Também pode ser útil no pré-natal, para proteger
os bebês no início de uma gravidez caso a mãe
possua sangue Rh-negativo.
Resultado negativo → significa que o sangue não
possui anticorpos livres que possam atacar
eritrócitos. No caso de transfusões, o sangue do
receptor é compatível com o do doador. Além
disso, um teste negativo de Coombs indireto para
o fator Rh (titulação de anticorpos Rh) em uma
mulher grávida significa que ela não
desenvolveu anticorpos contra o sangue
Rh-positivo do bebê, ou seja, a sensibilização
Rh não ocorreu.
Resultado positivo → significa que o sangue
analisado é incompatível com o sangue do
doador. Se o teste de título de anticorpos Rh for
positivo em uma mulher grávida ou que planeja
engravidar, isso quer dizer que ela tem
anticorpos contra o sangue Rh-positivo
(sensibilização ao Rh). Portanto deverá realizar o
teste no início da gravidez para verificar o tipo
sanguíneo do bebê. Se o bebê tiver sangue
Rh-positivo, a situação da mãe será
acompanhada durante a gravidez para evitar
riscos à criança.
Para transfusão sanguínea pode se realizar a
pesquisa de anticorpos irregulares(PAI) como
triacel 1 e triacel 2 HC (pool) (com antígenos de
outros grupos sanguíneos) + plasma ou soro do
receptor > a essa mistura será acrescida AGH(soro
coombs) > se aglutinar: PAI +