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Lembrete: o que está em cinza entra escrito no vídeo. Algumas informações vão apenas no vídeo. Fermentação de carboidratos na produção do biocombustível > Em 1917, Alexander Grahan Bell já proclamava os benefícios do álcool como combustível em um artigo publicado na National Geographic. Nessa época já se sabia das tantas matérias-primas possíveis para a produção de álcool, incluindo “serragem, sabugo de milho, e a maior parte dos vegetais, até mesmo sementes... os resíduos de nossas fazendas... e mesmo o lixo urbano” Vias de obtenção de biocombustiveis a base de carboidratos: > A via fermentativa é um processo com três fases: preparo do substrato, fermentação e destilação do fermentado. 1 - No preparo do substrato, a matéria-prima é tratada para dela se obterem os açúcares fermentescíveis. Essa etapa depende do tipo de matéria-prima utilizada. 2 - A fermentação é o processo pelo qual os carboidratos serão transformados em álcool e gás carbônico pela ação de microrganismos. 3 - Finalmente, na destilação, o etanol é separado do caldo de fermentação e purificado. > De acordo com o tipo de carboidratos presentes nas matérias-primas elas podem ser classificadas em três tipos: > Materiais açucarados – Contêm açúcares simples, monossacarídeos dissacarídeos, como glicose, frutose e maltose. - A fermentação de monossacarideos é utilizada apenas na produção de álcool em bebidas como vinho e sidra. - Já os dissacarídeos são fermentados após uma hidrólise ocorrida pela ação da enzima invertase, produzida pelo próprio agente de fermentação. Exemplos: - 1 t de maçãs levaria produção de 56 L de álcool. - Uma tonelada de melaço produziria de 250 a 300 L de álcool - Uma tonelada de beterrabas pode levar a um rendimento de cerca de 100 L de álcoo - Cana-de-açúcar – A eficiência da extração é de 95% com rendimento em torno de 90L de biocombustivel por tonelada de cana. > Materiais amiláceos – Contêm como o amido e inulina. Esses materias requerem um processo de cozimento para diluição e gelatinização do amido, e, em seguida, de sacarificação ou hidrólise no qual o amido é transformado em açúcares fermentescíveis. (A hidrólise pode ser por maltagem, por adição de enzimas ou pela ação de ácidos. = só no vídeo) Exemplo: - grãos amiláceos (milho, sorgo, cevada, trigo), raízes e tubérculos (batata, batata-doce, mandioca). - A produtividade do milho é de uma tonela para 407 litros de etanol > Materiais celulósicos – São constituídos de celulose. Para tornarem-se fermentescíveis, devem passar por um processo complexo de hidrólise ácida. As vantagens desses substratos são sua grande disponibilidade, baixo custo e questões ambientais. Os materiais celulósicos são compostos de lignina, hemicelulose e celulose em diferentes proporções. Exemplos: palha, madeira, resíduos agrícolas e de fábricas de papel e microalgas. Microalgas: - As microalgas contêm elevada eficiência de conversão fotossintética, rápido crescimento e possibilidade de manipulação do meio de cultivo para produzir biomassa com elevado teor de carboidratos, além do uso de áreas com baixa aptidão agrícola. (> Algumas espécies de grupos da Spirulina spp., Porphyridium cruentum, Spyrogyra sp., Chlorella vulgaris, Clamydomona reinhardtii, Dunaliella tertiolecta, Scenedesmus acutus e Tetraselmisem subcordiformis apresentaram em estudos a capacidade de acumular uma grande quantidade de carboidratos. = colocar só no video) - As condições de cultivo podem variar dependendo da espécie de microalga. (Outros parâmetros influeciam na produção da biomassa: intensidade da luz e comprimento de onda adequados, temperatura, concentração de CO2, quantidade de nutrientes, condições de mistura e contaminação. = só no vídeo) - As tecnologias envolvidas para colheita da biomassa microalgal incluem a coagulação-floculação por adição de reagentes químicos, a centrifugação e a filtração. - A partir de todos esses processos, é feita a fermentação desses carboidratos obtidos pela colheita da biomassa microalgal, realizada por leveduras (como a Saccharomyces cerevisiae). Ela é considerada uma das mais eficazes na produção de bioetanol possuindo vantagens como alta produção a partir de hexoses, elevada tolerância ao etanol, sendo cultivadas a temperaturas de 30º C na presença de carbono e nitrogênio. Fermentação alcoólica: - A fermentação alcoólica ocorre dentro das leveduras, que possuem essa capacidade de converter açúcares assimiláveis (correspondente a um substrato oxidado) em etanol (substrato reduzido) por uma série de reações bioquímicas reguladas por enzimas específicas. - Apesar de não ser o único microrganismo capaz de produzir álcool, as propriedades específicas das leveduras, como tolerância a altas concentrações de álcool e CO2, o crescimento rápido e a capacidade de fermentação as tornam os microrganismos mais adequados para a escala industrial. - As mais importantes para a produção de álcool são as Saccharomyces cerevisiae e Saccharomyces carlsbergensis. (Sua biomassa pode ser recuperada como subproduto da fermentação e transformada em levedura seca, que se constitui em matéria-prima para fabricação de ração animal ou suplemento vitamínico humano. = encaixar só no video) - Os açúcares fermentescíveis são os monossacarídeos glicose, frutose, manose e galactose, bem como os dissacarídeos maltose e sacarose, e os trissacarídeos rafinose e maltotriose. (Os polissacarídeos amido e celulose não são metabolizados por leveduras, porém através de ferramentas de biologia molecular é possível introduzir genes de amilases para a construção de linhagens de Saccharomy cerevisiae.= colocar só no video) - As características genéticas que as leveduras devem ter para uma boa produção industrial de álcool são: alta produção (relação entre o álcool produzido e o açúcar disponível à levedura); alta velocidade de fermentação; alta tolerância ao álcool; tolerância a altas temperaturas e estabilidade. - A via metabólica envolvida na produção de etanol em leveduras é a via gicolítica, Ela ocorre com uma série de reações catalisadas por enzimas, onde o produto são duas moléculas de piruvato para cada molécula de glicose. Em condições anaeróbicas e em alta concentração de glicose, o piruvato é reduzido a etanol com liberação de CO2. Em teoria a porcentagem obtida de etanol é de 51,1% e 48,9% de CO2 em relação à glicose metabolizada. Como produto da glicose tem dois moles de ATP por mol de glicose, que podem ser usados para manutenção energética das células. (usar imagem com o texto acima da imagem) - Parte da energia é usada para o metabolismo celular e parte é perdida na forma de calor. Além disso, parte da glicose será destinada ao crescimento da levedura e existem outros subprodutos, como glicerol, ácidos orgânicos e álcoois superiores. - Na indústria, a eficiência da conversão em etanol pode chegar a 90-93% devido ao crescimento celular e à produção de produtos finais de metabolismo secundário. - Tudo o que é necessário para iniciar a fermentação é misturar o inóculo de leveduras e manter as condições adequadas para o seu crescimento e produção de etanol. - O tempo de fermentação pode variar com a matéria-prima, o microrganismo, o pH, a temperatura e entre outros fatores, levando, normalmente, de 2 a 5 dias. - Diversos fatores físicos (temperatura, pressão osmótica), químicos (pH, oxigenação, nutrientes minerais e orgânicos, inibidores) e microbiológicos (espécie, linhagem e concentração da levedura, contaminação bacteriana) afetam o rendimento da fermentação, a conversão de açúcar em etanol. - Geralmente, as quedas na eficiência fermentativa decorrem de uma alteração no equilíbrio do processo, levando à maior formação de produtos secundários, ou por contaminação de outros microrganismos, como bactérias, que competem pelo substrato para produção de outros produtos. http://objdig.ufrj.br/60/teses/coppe_m/BernardoAlvesCinelli.pdf http://objdig.ufrj.br/60/teses/coppe_m/BernardoAlvesCinelli.pdf Produção de álcool combustível a partir de carboidratos - CristinaMaria Monteiro Machado1 Frederique Rosa e Abreu2 video: https://www.youtube.com/watch?v=TAPlTgccU2g&t=109s https://www.youtube.com/watch?v=TAPlTgccU2g&t=109s