Vamos analisar as alternativas apresentadas sobre a diferença entre o sequenciamento de Sanger manual e o automatizado: A) O manual todos os ddNTPs vão no mesmo tubo de reação pois a eletroforese separa todos eles permitindo distinguir uns dos outros. - Essa afirmação é verdadeira, mas não destaca a principal diferença em relação ao automatizado. B) O automatizado utiliza ddNTPs marcados fluorescentemente, cada nucleotídeo com uma cor, que é lido após corrida eletroforética em capilar e detecção da fluorescência pelo equipamento após excitação com laser. - Esta alternativa descreve corretamente uma das principais diferenças entre os métodos, que é o uso de marcadores fluorescentes no sequenciamento automatizado. C) O automatizado o equipamento faz todo o procedimento sozinho, lendo os nucleotídeos de DNA pela DNA polimerase. - Embora o sequenciamento automatizado seja mais eficiente, essa descrição não é precisa, pois a leitura dos nucleotídeos não é feita diretamente pela DNA polimerase. D) Ambos utilizam os ddNTPs que são os nucleotídeos sem a hidroxila livre no açúcar e o resultado obtido pela eletroforese em gel de poliacrilamida. - Essa afirmação é verdadeira, mas não destaca a diferença entre os métodos. A alternativa que melhor apresenta a diferença entre o sequenciamento manual e o automatizado é a B.