Vamos analisar as alternativas para a superexpressão de uma proteína heteróloga em Escherichia coli: A) Construção com o promotor do gene de interesse fusionado ao gene da RNA polimerase do bacteriófago T7. - Incorreto, pois o promotor T7 é reconhecido pela RNA polimerase T7, não pelo gene da RNA polimerase. B) Construção com o promotor reconhecido pela RNA polimerase bacteriana controlando a expressão do gene de interesse. - Correto, pois a RNA polimerase bacteriana reconhece promotores bacterianos para expressar genes. C) Apenas por construções que incluam genes bacterianos. - Incorreto, genes heterólogos (de outras espécies) podem ser expressos em E. coli. D) Para genes eucariotos, desde que as regiões de introns estejam incluídas. - Incorreto, E. coli não processa introns, então genes eucariotos precisam estar sem introns para serem expressos. E) Construção com o promotor reconhecido pela RNA polimerase do bacteriófago T7 controlando a expressão do gene de interesse, apenas se essa E. coli estiver infectada com o vírus T7 íntegro. - Parcialmente correto, mas normalmente usa-se um sistema com RNA polimerase T7 expressa em E. coli (como em cepas BL21(DE3)), não a infecção pelo vírus. Resposta correta: B) Por uma construção com o promotor reconhecido pela RNA polimerase bacteriana controlando a expressão do gene de interesse.