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Universidade Vila Velha Biomedicina 2| 2021 - Grupo Prático 2 Aluna: Isabella Cardoso Novis Defaveri AOP2 - Microbiologia 1ª Questão: Antes de realizarmos a coleta, uma paciente foi orientada a fazer assepsia da região genital e também, dispensar o primeiro jato, coletando apenas o jato intermediário de urina. Feito esse procedimento, a urina foi semeada em meio de cultura não seletivo, estéril e colocada em estufa à 37º C/48 horas. Após esse período a cultura se apresentou mista, com aspecto das colônias típicas de bactérias. A coloração de gram realizada revelou a existência de cocos gram positivos e cocobacilos gram negativos. O técnico de laboratório concluiu, após avaliação, que os gram positivos eram Staphylococcus sp e pertenciam à microbiota normal, enquanto os gram negativos se tratavam de Ureaplasma sp provável gênero relacionado com o quadro infeccioso. RESPONDA: a) Caracterize, detalhadamente, a ultra-estrutura (composição química) da parede celular dos Staphylococcus identificados na cultura acima. R: A Ultra-estrutura se caracteriza pelas diversas camadas de PEPTIDIOGLICANO que correspondem a 90% da parede celular, ÁCIDO TEICOICO, ou seja, um polissacarídeo ácido com resíduo de glicerol fosfato ou ribitol fosfato, e o ÁCIDO LIPOTEICOICO. b) O Ureaplasma sp é uma bactéria sem parede celular. Por que então ela se mostrou como gram negativa? R: O Ureaplasma sp não possui membrana celular, mas possui membrana plasmática que se assemelha com todas as membranas celulares. A membrana celular se caracteriza no revestimento, porém se difere da parede celular, pela permeabilidade seletiva, pois ela, promove delimitação celular controlando o que entra e sai das células. Ela também apresenta em sua composição química camadas lipoproteicas, formadas por BICAMADAS FOSFOLIPÍDICAS tornando-a sensível ao uso álcool, e por ainda existir uma camada mais externa em sua parede, sendo ela constituída também por lipídeos se torna ainda mais permeável. Resumindo uma parte do processo da técnica de coloração de GRAM, quando aplicamos o álcool, como forma de lavagem da lâmina, solubilizamos a estrutura lipídica da célula tornando -a, mais permeável tanto para células GRAM POSITIVAS quanto para as GRAM NEGATIVAS. Deste modo, todos os dois tipos de células se descoram, porém a GRAM NEGATIVA se destaca, pois possui uma parede celular mais fina em relação à GRAM POSITIVA. A próxima etapa do processo após a lavagem com álcool, será lavar a lâmina com água e inserir o contra - corante (SAFRANINA O), conferindo cor “avermelhada” as células que se descoram mais, no caso as GRAM NEGATIVAS. c) O que é uma cultura do tipo mista? R: Uma cultura de microrganismos é considerada uma cultura pura quando apenas um tipo de organismo está presente, já uma cultura mista é quando populações de organismos diferentes estão presentes. d) Um aluno da disciplina de Microbiologia geral, ao ver a mesma lâmina acima, corada pelo método de Gram, afirmou que os cocos Gram positivos observados, na verdade se tratavam de uma levedura, questionando o laudo anterior. O que pode ser observado nessa lâmina que esclareça essa dúvida, Coco ou levedura? R: As bactérias do tipo COCOS, se caracterizam por possuírem formatos arredondados, e serem procariontes, por esses motivos, elas são menores e menos complexas por não possuírem muitas organelas em seu interior. Já no caso das leveduras, FUNGOS, são caracterizados pelos seus formatos arredondados também, porém o seu diferencial com relação aos COCOS é que eles são eucariontes, sendo seres mais complexos e por isso maiores microscopicamente, por isso a afirmação do aluno acima, sendo assertivo com relação à LEVEDURA. 2ª Questão: BIOLOGIA DA INFECÇÃO DE ZIKA VIRUS EM CÉLULAS HUMANAS O vírus Zika (ZIKV) é um flavivírus (família Flaviviridae) transmitido por Aedes aegypti e que foi originalmente isolado de uma fêmea de macaco Rhesus febril na Floresta Zika (daí o nome do vírus), localizada próximo de Entebe na Uganda, em 20 de abril de 1947. Esse vírus é relacionado ao vírus da febre amarela e dengue, e que causam febre hemorrágica. O vírus Zika tem causado doença febril, acompanhada por discreta ocorrência de outros sintomas gerais, tais como cefaleia, exantema, mal estar, edema e dores articulares, por vezes intensas. No entanto, apesar da aparente benignidade da doença, mais recentemente na Polinésia Francesa e no Brasil, quadros mais severos, incluindo comprometimento do sistema nervoso central (síndrome de Guillain-Barré, mielite transversa e meningite), associados ao Zika têm sido comumente registrados. Estruturalmente, este vírus apresenta genoma de RNA, fita simples e polaridade positiva. É envelopado e com capsídeo de simetria poliédrica. Haddow AD, Schuh AJ, Yasuda CY, Kasper MR, Heang V, et al. (2012) Genetic Characterization of Zika Virus Strains: Biology of Zika virus infection in human skin cells. J Virol 89:8880 –8896. Então, ao ler o texto acima, responda: a) O ZIKV, assim como descrito acima, é um vírus de RNA de polaridade positiva. O que isso significa? R: O ZIKV é um vírus de RNA de polaridade positiva, pois possui em seu genoma de RNA de fita simples que pode funcionar como sequência de mRNA, ou seja o seu genoma tem o mesmo senso do mensageiro. b) “Um vírus de capsídeo desnudo ou mesmo envelopado, quando perde, respectivamente, estas estruturas, perde também sua capacidade infectiva.” TRABULSI, 2010. Caracterize quimicamente o capsídeo e envelope viral e cite a etapa do processo de replicação viral dependente da presença destas estruturas. R: Os vírus, portanto são estruturas auto-replicativas e não são considerados organismos vivos, pois possui apenas material genético protegido por uma capa proteica chamada de CAPSIDEO, ou ENVELOPE VIRAL. Os CAPSÍDEOS são compostos por proteínas, já os ENVELOPES são compostos por proteínas e fosfolipídios. A principal diferença entre os dois é que o capsídeo é o revestimento protetor do material genético do vírus, enquanto o envelope é uma cobertura protetora do capsídeo proteico e é derivado da membrana celular do hospedeiro. Já a etapa de replicação viral refere-se ao processo pelo qual um vírus se reproduz dentro de um organismo vivo através da fusão das paredes celulares. O vírus começa ligando-se a uma célula vulnerável, penetrando então em sua superfície ou, de alguma outra forma, se infundindo na substância primária da célula hospedeira. Nesse ponto, o processo de replicação viral ocorre, no qual o vírus assume as funções reprodutivas da própria célula e a reprograma para criar cópias do DNA ou RNA do vírus. O processo de replicação viral continua até que a célula explode em um estágio chamado shedding, liberando várias duplicatas do vírus original no corpo do hospedeiro.
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