Relatório pronto

Prévia do material em texto

UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA 
 FACULDADE DE FARMÁCIA 
INSTITUTO DE BIOLOGIA 
 
 
ALESSANDRO DE JESUS SILVA 
 MARIANA FERREIRA DE BRITO 
SAYNARA BANDEIRA CAPARROSA 
VICTORIA LUIZA SANTOS DIAS 
 
 
 
 
RELATÓRIO DE EXTRAÇÃO DO DNA 
 
 
 
 
 
 
Salvador, BA 
2022 
 
ALESSANDRO DE JESUS SILVA 
 MARIANA FERREIRA DE BRITO 
SAYNARA BANDEIRA CAPARROSA 
VICTORIA LUIZA SANTOS DIAS 
 
 
 
 
 
RELATÓRIO DE EXTRAÇÃO DO DNA 
 
 
 
 
 
Relatório apresentado à Universidade Federal da Bahia, como 
requisito de avaliação da componente curricular Biologia 
aplicada à Farmácia do curso de Farmácia, orientado pela 
docente Profª Dra. Suzana Telles da Cunha Lima. 
 
 
 
 
 
 
 
 Salvador, BA 
2022 
 
1. Introdução 
Desde 1953, após a descoberta da estrutura dimensional da molécula de DNA por 
Francis Crick, James Watson e Maurice Wilkins, quando trabalhavam em Cambridge, no Reino 
Unido, essa estrutura se tornou uma das moléculas mais estudadas do mundo. Devido o 
importante papel do DNA para os seres vivos, o conhecimento sobre o sequenciamento de 
DNA pode ser útil em praticamente qualquer área da biologia como: estudos evolutivos e 
filogenéticos, busca da base genética de doenças, clonagem genética, análise de provas 
criminais e reprodução. 
Para a obtenção dessa importante molécula que é o DNA, o experimento irá se 
aproveitar de interações de detergentes, álcoois e sais; do comportamento do DNA em 
diferentes temperaturas e das reações das células a diferentes compostos afim de se atingir o 
objetivo. 
 
2. Objetivos 
Extração do DNA para identificação de corpos, análises de evidências e preservação. 
3. Materiais e métodos 
Os materiais usados serão: Banho-maria com termostato, centrífuga com rotor para 
vários tubos, microtubos de polipropileno, micropipetas automáticas para tubos diversos, 
cotonete bucal, solução de lysis, solução de sal, buffer de suspensão, etanol, álcool isopropílico. 
4. Procedimento 
Na primeira parte da extração do DNA, haverá a coleta do material através da raspagem 
do cotonete bucal na bochecha e a colocação a ponta desse cotonete no microtubo de 
polipropileno. 
Na segunda parte uma porção da solução de lysis é coletada pela micropipeta automática 
e inserida no microtubo que contém a amostra de células da bochecha para em seguida ser 
posto no banho-maria com termostato. 
Na terceira parte é retirado o microtubo do banho-maria e em sucessão colocado uma 
porção de concentração de sal para em sequência ser posto na centrífuga. 
Na quarta parte, após retirado da centrífuga, a mistura homogênea do microtubo é 
separado do precipitado por meio da micropipeta e posta em um novo microtubo. Nesse novo 
microtubo uma dose de álcool isopropílico é adicionada a solução, para em seguida ser posta 
na centrífuga. E após a decantação na centrífuga, a parte líquida é separada do DNA sólido 
através da pipeta. 
5. Fundamentação Teórica 
A coleta de células é possível por causa da troca de milhares de células todos os dias no 
nosso corpo, ao fixar uma dessas células no cotonete bucal e pô-la em contato com um tampão 
de lise celular o detergente presente na solução entra em contato com os lipídeos das 
membranas das células alvo e desestrutura sua organização. Desta forma as membranas sofrem 
ruptura e todo o conteúdo celular - inclusive o DNA - fica disperso na solução e ao ser posto 
no banho-maria, o aumento da temperatura promove uma maior agitação molecular, o que 
ajuda o detergente a desestabilizar as membranas lipídicas. Além disso, a alta temperatura 
inativa enzimas que podem degradar o DNA, já a adição do sal na terceira parte da experiência 
proporciona um ambiente favorável para extração, pois o sal, depois de dissolvido na água, se 
dissocia e contribui com íons positivos que neutralizam a carga negativa do grupo fosfato do 
DNA. As moléculas de DNA passam a não sofrer repulsão de cargas entre si, o que favorece 
sua aglomeração. O álcool isopropílico na quarta parte desidrata o DNA, de forma que este não 
mais fica dissolvido no meio aquoso e como ele não é solúvel em álcool suas moléculas se 
agrupam. Quanto mais gelado o álcool, menos solúvel estará o DNA. 
6. Discussão e resultados 
O resultado do experimento foi o DNA isolado em forma sólida que agora pode ser 
armazenado ou utilizado em outras experiências. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Referências 
DNA Extraction. Learn Genetics Genetic Science Learning Center, 2018. Disponível 
em: <https://learn.genetics.utah.edu/content/labs/extraction>. Acesso em: 24 de Março de 
2022. 
IEB USP. Biologia 8: DNA 1. Extração. USP, 2019. Disponível em: 
<http://www.ieb.usp.br/wp-content/uploads/sites/512/2019/08/extra%C3%A7%C3%A3o-
professor.pdf>. Acesso em: 25 de Março de 2022. 
 
https://learn.genetics.utah.edu/content/labs/extraction
http://www.ieb.usp.br/wp-content/uploads/sites/512/2019/08/extra%C3%A7%C3%A3o-professor.pdf
http://www.ieb.usp.br/wp-content/uploads/sites/512/2019/08/extra%C3%A7%C3%A3o-professor.pdf